1、ICS 07.100.30 B 46 GB 中华人民共和国国家标准G/T 13091- 2002 代替GB/T13091-1991 饲料中沙门氏菌的检测方法Determination of Salmonella in feeds (lSO 6579: 1993 ,Microbiology-General guidance on methods for the detection of Salmonella ,MOD) 2002- 09-24发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2003 - 03 -01实施发布050928075217 中华人民共和国国家标准饲料中沙门氏菌的检测方法GB/T
2、 13091-2002 峙中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售4峰开本880X12301/16 印张lX字数34千字2003年4月第一版2003年4月第一次印刷印数1-1500 峙书号:155066. 1-19203 定价13.00元网址晤科目634-493版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533G/T 130912002 前言本标准代替GB/T13091 1991(饲料中沙门氏菌的检验方法,因为国际上的发展原标准在技术上已过时。本标准修改采用
3、ISO6579:1993(微生物学沙门氏菌检验导则(英文版)。本标准根据ISO6579:1993重新起草。除增加了资料性附录D、附录E外,本国家标准章条编号与ISO 6579:1993完全一样。考虑到我国国情,在采用ISO6579:1993时,本标准做了一些修改。有关技术性差异己编入正文中并在它们所涉及的条款的页边空白处用垂直单线标识。在附录E给出了这些技术性差异及其原因的一览表以供参考。为便于使用,本标准还做了以下编辑性修改:a) 本国际标准一词改为本标准气b)用小数点代替作为小数点的逗号C)删除国际标准的前言;d)标准名称由微生物学沙门氏菌检验导则改为饲料中沙门民菌的检测方法。本标准的附录
4、A、附录B、附录C为规范性附录,附录D、附录E为资料性附录。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:国家饲料质量监督检验中心(北京)。本标准主要起草人:饶正华、李丽蓓、高生、杨曙明、苏晓鸥。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T13091199L G/ T 13091 - 2002 饲料中沙门氏菌的检测方法警告:为保障实验室人员的健康,只有具备适当设备的实验室才能承担沙门氏菌检验。应小心处理所有培养材料的废弃物。范围本标准适用于饲料中沙, 2 规范性引用文件3 下列术语3. 1 4 原理注:样品中可能存在少量自确监受伤的沙门氏
5、菌,常:羞得如曾菌。4. 1 用非选择性液体培养基预增4.2 在选择性液体培养基上增菌将4.1中的培养物接种到氯化镇-孔雀绿培养基和亚晒酸盐脱氨酸培养基中。氯化镜-孔雀绿培养基在42C培养24h,亚晒酸盐脱氨酸培养基在36C :l: 1 C培养24h或再延长24 h。4. 3 划线及识别将4.2的培养物接种到以下两个选择性培养基:应使用酣红煌绿琼脂培养基,除非国际标准对检样有规定或有特殊考虑(如分离乳糖阳性沙门氏菌)。GB/T 13091一2002一-DHL琼脂培养基(见5.2.4.2)。在36CC士1C培养,24h后检查,必要时培养至48h,根据菌落特性,辨别可疑菌落。4.4 鉴定挑出4.3
6、中的可疑沙门氏菌菌落,再次培养,用合适的生化和血清学试验进行鉴定。5 培养基、试剂和血清5. 1 总则微生物实验室的操作,按照GB4789.1进行。5.2 培养基和试剂注:由于有大量的培养基和试剂可供选择,为明确起见,在附录B中规定了它们的成分和制备方法。除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯和蒸馆水或去离子水或相当纯度的水。5.2. 1 缓冲蛋白陈水(BP):见第B.1章。5.2.2 氯化镜-孔雀绿增菌液(RV):见第B.2章。5.2.3 亚晒酸盐胧氨酸增菌液(SO:见第B.3章。5.2.4 选择性划线固体培养基:a) 酣红、煌绿琼脂:见第B.4章和附录C。b) DHL琼脂:见第B.5章。
7、5.2.5 营养琼脂:见第B.6章。5.2.6 兰糖铁琼脂(TSl):见第B.7章。5.2.7 尿素琼脂:见第B.8章。5.2.8 赖氨酸脱竣试验培养基:见第B.9章。5.2.9 日半乳糖昔酶试剂:见第B.12章。5.2.10 V-P反应培养基(见第B.10章): a) V-P培养基。b) 肌酸溶液。c) -荼酣乙醇溶液。d) 氢氧化饵溶液。5.2.11 肯定基质反应培养基(见第B.11章): a) 膜蛋白陈色氨酸培养基。b) 柯凡克试剂。5.2. 12 半固体营养琼脂:见第B.13章。5.2.13 盐水溶液:见第B.14章。5. 2. 14 沙门氏菌因子0,叭,H型血清。6 设备与材料注3:
8、可以用一次性使用的仪器代替可重复使用的仪器。6.1 高压灭菌锅或灭菌箱。6.2 干热灭菌箱:37C士1C55cC士lC。6. 3 培养箱:36C士1C。6.4 42 C士1C,j(浴或42C士0.5C培养箱。6. 5 水浴:45C士1cC ,55 C士1cC ,70 C士1C 0 6. 6 水浴:36C土1C。6. 7 接种环:铀钝或镰铅丝,直径约3mmo 2 6.8 pH 仪。6.9 培养瓶或三角瓶。注:可用无毒金属或塑料螺丝盖的培养瓶或三角瓶。6.10 培养试管:直径8mm,长度160mm。6. 11 量筒。6.12 刻度吸管。6.13 平皿:皿底直径9cm或14mm。7 采样GB/T 1
9、3091-2002 实验室样品真实、具有代表性,在运输和贮存过程中没有发生损失或改变是非常重要的。采样方法可按照国家标准GB/T14699. 1进行(器具要经过消毒)。8 试样的制备将至少2kg具有代表性的饲料样品,四分法缩分至约250g,过40目筛,在密闭瓶中低温保存。9 操作步骤(见附录A)9. 1 试料和1: 10稀释班制备9.1.1 用预增菌被(5.2.1)作为稀释液,来制备1: 10稀释液。9.1.2 取试料25g,加入装有225mL缓冲蛋白陈水(5.2.1)的500mL广口瓶内。如果试料量不是25 g,试料质量与预增菌攘的体积比应约为1: 10。注1:当检测来自同一特定样品的多个试
10、料时,若有证据表明试料混合不影响检验结果,试料可以混合。例如:若需检测10份25g试料时,混合这10份,形成250g试料,缓冲蛋白陈水用2250L。或者从10个单独的试料预增菌液中分别取出0.1mL和10mL入RV培养基和亚砸酸盐脱氨酸增菌液中,混合后分别接入0.1L和1L 选择性增菌培养基中。注2:干样和粉状样可能需要特殊的水合过程以提高沙门氏菌的复性。9.2 非选择性增菌将增菌液在36C土1C培养,时间不少于16h,不超过20ho 9. 3 选择性增菌培养9.3.1 取9.2中获得的预增菌培养物0.1mL,接种于装有10mL氯化娱叩孔雀绿增菌液(5.2.2)的试管中,另取预增菌培养物10m
11、L,接种于装有100mL亚晒酸盐脱氨酸增菌液(5.2.3)培养瓶中。9. 3. 2 接种后两种培养基(9.3.1)的培养条件如下:a) 氯化娱孔雀绿增菌液试管在42C培养24h。b) 亚晒酸盐脱氨酸培养瓶在36C土1C培养24h或48h。注:在某些情况下,可以将亚硝酸盐脱氨酸培养基的培养温度增加至42C。但需在检验报告中提及此改动。9.4 分离培养和鉴定9.4.1 氧化镜孔雀绿增菌液在培养24h后,分别用接种环划线接种在酣红煌绿琼脂(5.2.4a)J平皿和DHL琼脂(5.2.4b)J平皿上,为取得明显的单个菌落,取一环培养物,接种两个平1ill.,第一个平皿接种后,连续在第二个平皿上划线接种。
12、注:在盼红煌绿琼脂平板上划线时,建议使用以下方法:两个平皿用同一接种环(6.7);按附录D进行划线操作;如l完整个平皿g第一个平皿接种后,不要烧接种环.也不要换接种环。当仅用一个平皿时,划线方法按附录D中的第一个平皿的方法。9.4.2 亚晒酸盐脱氨酸培养瓶在培养24h后,重复9.4.1的操作。9.4.3 将(9.4.1)和(9.4.2)的平皿底部向上,在36C士1C培养箱中培养。9.4.4 亚晒酸盐脱氨酸培养基(9.3.2和9.4.3)在培养48h后,重复9.4.2和9.4.3。GB/ T 13091 - 2002 9.4.5 培养20h24 h后,检查平皿(9.4.3和9.4.4)中是否出现
13、沙门氏菌典型菌落,生长在酣红煌绿琼脂上的沙门氏菌典型菌落,使培养基颜色由粉红变红。9.4.6 如生长微弱,或无典型沙门氏菌落出现时,可在36C士1C重新培养18h24 h。再检验平皿是否有典型沙门氏菌菌落。注:任何典型或可疑菌落均应进行鉴定(9.5)。辨认沙门氏茵茵落.在很大程度上依靠经验,它们外表各有不同,不仅是种与种之间,每批培养基之间也有不同,此时,可用沙门氏菌多价因子血清,先与菌落作凝集反应,以帮助辨别可疑菌落。9. 4.7 在进行沙门氏菌鉴定时,可以使用商业鉴定材料。9. 5 鉴定9.5.1 鉴定菌落的选择从每种分离平皿培养基上(9.或可疑菌落供进行鉴定。挑选的菌落在营养琼月化和血清
14、鉴定。9. 5. 2 生化鉴定将按9.5.1挑选9. 5. 2.1 三糖铁培在琼脂斜面上琼脂斜变黑)。当分离到乳糖阳性养的结果(9.5.3)。9. 5. 2. 2 尿素琼脂培养基(5.在琼脂表面划线,在36CC士红的颜色变成玫瑰红色至桃红色,以9.5. 2.3 L赖氨酸脱殷反应培养基(5.2.8)落。少于5个时,可将全部典型24 h.用纯培养物作生仅仅限于三糖铁培,尿素极快地释放氨,它使酣将培养物刚好接种在液体表面之下,在36C:J:1 C培养24h.生长后产生紫色,表明是阳性反应。9.5. 2.4 检查卢半乳糖昔酶的反应(5.2.9)取一接种环可疑菌落,悬浮于装有0.25mL生理盐水的试管中
15、,加甲苯I滴,振摇混匀,将试管在36 C士1C水浴锅中放置数分钟,加ONPG试液0.25mL.将试管重新放入36C :J: 1 C水浴锅中24h.随时检查,黄色表明为阳性反应,反应常在20min后明显出现。9.5.2.5 v-P反应培养基(5.2.10)挑取一环可疑菌落,接种在v-P反应培养基C5.2. 10 a)J上,在36C士lC培养24h.取培养物0. 2 mL于灭菌试管中,加肌酸榕液C5.2. 10 b)J2滴,充分泪匀后加-茶酣乙醇C5.2.10 c)J溶被3滴,GB/ T 13091 - 2002 充分棍匀后再加氢氧化押溶液(5.2.10d)J2滴,再充分振摇泪匀,在15min内,
16、形成桃红色,表明为阳性反应。9. 5. 2. 6 能基质反应培养基(5.2.11)取可疑菌落,接种于装有5mL膜蛋白陈色氨酸培养基(5.2.11a)J的试管中,在36C:!:1 C培养24 h,培养结束后,加柯凡克试剂(5.2.11b)J1 mL,形成红色,表明是阳性反应。9. 5. 2. 7 生化试验生化试验见表2。可疑菌在培养基上的反应三糖铁葡萄糖形成酸二糖铁葡萄糖产气a Salmonella c Salmonella 以纯培养菌落(9.9. 5. 3. 1 除去能自凝的在仔细擦净的玻璃板动30s60s,对着黑的背提供作抗原鉴定。9.5. 3. 2 0抗原检查用认为无自凝力的纯菌落,按9.
17、为阳性。9. 5. 3. 3 Vi抗原检查表2生化试验表出现此反应者沙门氏菌株百分率100 91.9 匀?昆合后,轻轻摇被认为能自凝。不宣. 14)代替盐水,如发生凝集,判用认为无自凝力的纯菌落,按9.5.3.1方法,用1滴Vi型血清(5.2.14)代替盐水,如发生凝集,判为阳性。9.5.3.4 H抗原检查用认为无自凝力的纯菌落接种在半固体营养琼脂(5.2.12)中,在36C:!:1C培养18h20 h,用这种培养物作为检查H抗原用,按照9.5.3.1方法,用1滴H血清(5.2.14)代替盐水,如发生凝集,判为阳性。9.5.4 生化和血清试验综合鉴定5 GB/T 13091-2002 表3给出
18、了对菌落(9.5.1)的鉴定实验(9.5.2和9.5. 3)结果。表3生化和血清试验综合鉴定表生化反应有无自凝血清学反应说明典型无。、Vi或H抗原阳性被认为沙门氏茵茵株典型无全为阴性反应可能是沙门氏菌典型无未作检查(9.5.3.1) 可能是沙门氏菌无典型反应无。、Vi或H抗原阳性可能是沙门氏菌无典型反应无全为阴性反应不认为是沙门氏菌9.5.5 权威性确认沙门氏菌可疑菌株(见表3),送专门菌种鉴定中心进行鉴定。10 结果表示根据分析结果,得出z克样品中存在或不存在沙门氏菌。11 检验报告检验报告应给出检测方法和结果。应给出在本标准没有说明的操作条件。检验报告中也应说明培养温度,以及亚硝酸盐肮氨酸
19、培养基的培养温度是否增加到42C。检验报告应包括样品鉴定的所有必须的内容。12 精度确认为检验实验室用本标准中的方法和培养基检测沙门氏菌的能力,可将参考样接入预增菌培养基(5.2.1)作对照。检测程序与检样相同。日附录A(规范性附录)检验程序圄检验样品25g+预增菌培养基缓神蛋白陈水)225 mL, 在36,吐lC培养16h 20 h 每平皿取5个有沙门民菌特征的商落,接种在营养琼脂上,36C:tlC培养18h24 h 固A.1检验程序固GB/T 13091-2002 7 GB/ T 13091 - 2002 B. 1 缓冲蛋白陈水B. 1. 1 成分蛋白陈氯化饷B. 2 氯化镜-孔雀B. 2
20、.1 溶液AB. 2.1.1 成分蛋白陈氯化铀磷酸二氢梆(K蒸馆水pH 7. 0 B. 2.1.2 制法将MgCl2 6H20溶于水中。B. 2.3 溶渡CB. 2. 3. 1 成分孔雀绿蒸馆水B. 2. 3. 2 制法附录B(规范性附录)培养基和试剂制备将孔雀绿溶于水中。溶液可室温保存于棕色玻璃瓶中。B. 2.4 完全培养基B. 2.4.1 成分溶液A8 10 g 5 g 9 g 1.5 g 400 g 1 000 mL 0. 4 g 100 mL 1 000 mL 溶液B溶液CB.2. 4.2 制法GB /T 13091 - 2002 100 mL 10 mL 按上述比例配制,校正pH值,
21、使灭菌后pH值为5.2,分装于试管中,每管10mLo 115 C高压灭菌15 min。冰箱保存。B.3 亚晒酸盐眈氨酸增菌液B. 3. 1 基础液B. 3. 1- 1 成分膜蛋白陈B. 3. 2. 1 成分L-脱氨酸B. 3. 3 完全培养B. 4 酣红、煌绿琼脂B. 4.1 基础液B. 4.1.1 成分牛肉浸膏蛋白陈酵母漫液粉末磷酸氢二铀(Na2HP04)磷酸二氢铀(NaH2P04)琼脂蒸馆水pH 7. 0 B.4.1.2 制法5 g 4g 10 g 4g 5 g 10 g 3 g 1 g 0. 6 g 12g18g 900 mL 9 GB/T 13091-2002 将上述成分加水煮沸溶解,
22、校正pH.121C高压灭菌20mino B.4.2 糖、酣红溶液B. 4. 2.1 成分乳糖萧糖酣红蒸榴水B.4.2.2 制法10 g 10 g 0.09 g 加至100mL 将各成分溶解于水中,在70C J.(洛锅中加温20min,冷却至55C立即使用。B.4.3 撞绿溶液见B.2. 4条。B. 4. 4 完全培养基制备基础液900 mL 糖、酣红洛液100 mL 惶绿1 mL 在无菌条件下,将煌绿榕液加入到冷却至约55C的糖、酣红溶液中,再将糖、酣红、煌绿溶液加入到50C55C基础液中混合。B. 4.5 琼脂平皿制备将.4. 4制备的培养基在水浴锅中榕解,冷却至50C - 55 C ,倾注
23、入灭菌的平皿中。大号平皿,倾入约40mL,小号平皿,倾入约15mL,待凝固后备用,平皿在室温保存,不超过4h,在冰箱保存,不超过24 ho B.5 DHL琼脂8.5.1 成分蛋白陈20 g 牛肉浸膏3 g 乳糖10 g 脖、糖10 g 去氧胆酸铀1 g 硫代硫酸铀2.3 g 拧攘酸铀1 g 拧攘酸铁镀1 g 中性红0.03 g 琼脂18 g20 g 蒸馆水1 000 mL pH 7.3 B. 5. 2 制法将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸榴水中,校正pH,再将琼脂于600mL蒸榴水中煮沸溶解,两液合井,加入0.5%中性红榕液6mL,待冷却至50C55C,倾注平皿。B.6 营养琼脂B
24、.6.1 成分牛肉浸膏3g !O 蛋白陈琼脂蒸锢水pH 7.0 B. 6. 2 制法将上述各成分煮沸溶解,校正pH,121C高压灭菌20millo B. 6. 3 平皿制备GB/T 13091 2002 5 g 9 g18 g 1 000 mL 将B.6. 2制备的营养琼脂在水浴锅里溶解,冷却至50C55C时,倾注入灭菌平皿中,每皿约15 mL。B.7 三糖铁琼脂B. ? 1 成分牛肉浸膏3 g 酵母浸膏3g 蛋白陈20 g 氯化饷5 g 乳糖10 g 煎糖10 g 葡萄糖1 g 拧攘酸铁0.3 g 硫代硫酸铀0.3 g 酣红0.024 g 琼脂12g18g 蒸馆水1 000 mL pH 7.
25、4 B. 7. 2 制法将除琼脂和酣红以外的各成分揭穿解于蒸榴水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以榕化琼脂,再加入0.2%酣红溶液12mL,摇匀,分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层,121C高压灭菌20mill,放置高层斜面备用。B.8 尿素琼脂B.8.1 基础液B. 8. 1. 1 成分蛋白陈1 g 葡萄糖1 g 氯化专内5 g 磷酸二氢伺2 g 酣红0.012 g 琼脂12g18g 蒸馆水1 000 mL pH 6.8 B. 8. 1. 2 制法将上述成分溶于水中,煮沸,校正pH,121C高压灭菌20millo 11 GB /T 13091 - 2002 B. 8. 2 尿素溶液B
26、. 8. 2.1 成分尿素蒸馆水B. 8. 2. 2 制法将尿素溶于水中,通过滤器除菌,并应检查灭菌情况。B. 8. 3 完全培养基制备基础液尿素溶液400 g 加至1000 mL 950 m L 50 m L B. 9 赖氨酸脱援试验培养gbobgb phquI 支约5mL I 121 t高压灭菌10min , B.10 v-P反B. 10. 1 基础B. 10. 1.1成蛋白陈葡萄糖磷酸氢二饵蒸馆水pH 6. 9 B.10.1.2 制法将上述成分溶于水中,万gbgbub 巧Jnhuphd20 min 。B. 10. 2 肌酸溶液B. 10. 2. 1 成分肌酸单水化合物蒸馆水B. 10.
27、2. 2 制法将肌酸单水化合物溶于水中,备用。B. 10. 3 -寨酣Z醇溶液B. 10. 3. 1 成分-荼酣0. 5 g 100 mL 6 g 12 96%乙醇B. 10. 3. 2 制法将-荼酣溶于乙醇溶液中。B. 10.4 氢氧化饵溶液B.10.4.1 成分氢氧化伺蒸锚水B. 10. 4. 2 制法将氢氧化伺溶于水中。B.11 能基质反应培养基B. 11. 1. 1 成分膜蛋白陈氯化铀DL-色氨酸蒸馆水pH 7.5 B. 11. 1. 2制?将上述各15 min 。B. 11. 2 柯凡B. 11. 2. 1成对二甲氨B. 12. 1 缓冲液B.12. 1. 1 成分磷酸二氢铀(NaH
28、2P04)0.1 mol/L氢氧化铀溶液蒸锢水B.12. 1. 2 制法GB /T 13091 - 2002 100 mL 40 g 100 mL 10 g 5 g 1 g 5遭L,121C高压灭菌5 g mL 6.9 g 3 mL 加至50mL 将磷酸二氢铀榕于大约45mL 水中,用氢氧化铀调pH为7.0,加水至最后容量50mL,贮存于冰箱中备用。B. 12. 2 ONPG溶液B. 12. 2. 1 成分邻硝基酣自-D-半乳糖昔(ONPG)蒸锢水B. 12.2.2 制法80 mg 15 mL 13 GB/T 13091-2002 将ONPG溶解于50C水中冷却。B.12.3 完全试剂制备缓冲
29、液。NPG溶液将缓冲液加入到ONPG榕液中。B.13 半固体营养琼脂B. 13. 1 成分牛肉浸膏蛋白陈琼脂蒸馆水pH 7.0 B. 13. 2 制法将上述成分榕于水中,校正pH,121C高压灭菌20mino B. 14 盐水溶液B. 14. 1 成分氯化饷蒸馆水pH 7.0 B.14.2 制法将氯化纳溶解于水煮沸,校正pH后分装,1210C高压灭菌20min。C. 1 细菌学特性附录C(规范性附录)煌绿的规格5 mL 15 mL 3 g 5 g 4 g5 g 1 000 mL 8.5 g 1 000 mL 在酣红煌绿琼脂(5.2.4a)上,变形杆菌的伸展受抑制,而沙门氏菌的生长不被捕制。C.
30、2 检测方法C.2.1 培养基根据B.4,准备酣红煌绿琼脂平板,但煌绿需具不同浓度,范围从4.5mg/L到6mg/L。c. 2. 2 程序在-系列具不同煌绿浓度的琼脂平板上,接种一种纯的变形杆菌;并且在类似系列的平板上,接种一种纯的沙门氏菌。在36C土1C下培养,时间不超过24h。煌绿的合适浓度应当能使沙门氏菌在其中生长,菌落为典型的粉红色,直径为1mm2 mm。而变形杆菌的生长却被限制,即不能伸展。按此浓度配制煌绿榕液(见B.4. 3)。11 GB/T 13091-2002 附录D(资料性附录)平板划线的标准方法平板划线的标准方法见图D.1。第一个平板第二个平板圄D.1平板划线的标准方法附录
31、E(资料性附录)本标准与ISO6579: 1993技术性差异及其原因表E.1给出了本标准与ISO6579: 1993的技术性差异及其原因。表E.1本标准与ISO6579: 1993技术性差异及其原因本标准的章条编号技术性差异原因删除ISO6579: 1983第一章中适用于人本标准只针对饲料。类消费品。l 此内容是从国际角度叙述的,我国不适用删除培养温度(35C或37C)应当被有关于这种叙述。部门认可并应在检测报告中说明。用GB4789.1代替ISO6887: 1983. Mi-crobiology-General guidance for the prepa-引用的国际标准未被等同或修改采用为
32、ration of dilutions for microbiological exami-国家标准或行业标准。引用的国家标准与相2 nation:用GB4789.1代替ISO7218: 1985 Microbiology-General guidance for microbi 应国际标准一致性程度均为非等效。logicalexaminations 0 以适应我国标准。增加引用GB/T14699.1 0 4. 3 5. 2. 4 b) 选用其他培养基中的DHLJ音养基根据使用效果和我国工业实际情况。5.1 用GB4789.1代替ISO7218。理由与规范性引用文件的代替一样。7 增加GB/T
33、14699. 1,饲料采样方法。适应我国国情。8 ISO 6579:1993要求各国制定。采取我国常用试样制备方法。NOON-gpGB/T 13091 -2002 H阁。表E.1 (续)本标准的章条编号技术性差异原因9.1.2中注1、注2删除食品两字。本标准只针对饲料。9.5.2.7.表2中注删除ISO6579:1993表注中的1)、2)两项。表中1)不符合我国标准编制习惯;表中们是从国际角度叙述的。侵权必究qdE AU nFnudE 唱BAEl . huphUE nu FhdE F气-1 . 号一价书一定告岳JI; 13.00 科目634-493 9峰版权专有GB/T 13091-2002