ISO 11348-3-2007 Water quality - Determination of the inhibitory effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test) - .pdf

1、 Numro de rfrence ISO 11348-3:2007(F) ISO 2007NORME INTERNATIONALE ISO 11348-3 Deuxime dition 2007-12-01 Qualit de leau Dtermination de leffet inhibiteur dchantillons deau sur la luminescence de Vibrio fischeri (Essai de bactries luminescentes) Partie 3: Mthode utilisant des bactries lyophilises Wat

2、er quality Determination of the inhibitory effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test) Part 3: Method using freeze-dried bacteria ISO 11348-3:2007(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres.

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8、org Publi en Suisse ii ISO 2007 Tous droits rservsISO 11348-3:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-propos. iv Introduction v 1 Domaine dapplication 1 2 Rfrences normatives 1 3 Principe 2 4 Interfrences . 2 5 Ractifs et matriaux 2 6 Appareillage 3 7 chantillonnage et prtraiteme

9、nt des chantillons 4 8 Mode opratoire 5 9 valuation 7 10 Expression des rsultats . 9 11 Critres de validit 11 12 Fidlit . 11 13 Rapport dessai . 11 Annexe A (informative) Mthode de correction de la couleur . 12 Annexe B (informative) Niveau de dilution D Prparation des sries de dilutions. 15 Annexe

10、C (informative) Donnes de fidlit 18 Annexe D (informative) Essai de bactries luminescentes sur des chantillons deau sale utilisant des bactries lyophilises 19 Bibliographie 23 ISO 11348-3:2007(F) iv ISO 2007 Tous droits rservsAvant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une f

11、dration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internati

12、onales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles

13、 donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 2. La tche principale des comits techniques est dlaborer les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lap

14、probation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de p

15、roprit et averti de leur existence. LISO 11348-3 a t labore par le comit technique ISO/TC 147, Qualit de leau, sous-comit SC 5, Mthodes biologiques. Cette deuxime dition annule et remplace la premire dition (ISO 11348-3:1998), qui a fait lobjet dune rvision technique. LISO 11348 comprend les parties

16、 suivantes, prsentes sous le titre gnral Qualit de leau Dtermination de leffet inhibiteur dchantillons deau sur la luminescence de Vibrio fischeri (Essai de bactries luminescentes): Partie 1: Mthode utilisant des bactries frachement prpares Partie 2: Mthode utilisant des bactries dshydrates Partie 3

17、: Mthode utilisant des bactries lyophilises ISO 11348-3:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs v Introduction Les mesurages spcifis dans lISO 11348 peuvent tre raliss au moyen de bactries frachement prpares, de mme quavec des prparations bactriennes lyophilises ou dshydrates. Les travaux de normalisati

18、on mens par le DIN Normenausschuss Wasserwesen et lISO/TC 147/SC 5/WG 1 ont montr que, dans certains cas particuliers, ces diffrentes techniques pouvaient donner des rsultats diffrents, notamment en prsence de mtaux lourds. Une telle varit dans la sensibilit rsulte des diffrences de composition des

19、milieux utiliss pour la prparation de bactries lyophilises ou dshydrates. Ces milieux protecteurs influent sur la biodisponibilit des produits toxiques et/ou sur lmission de lumire des bactries luminescentes. Cela signifie que lorigine et le type de prparation doivent tre pris en considration lors d

20、e linterprtation des rsultats. Cette prise en compte peut savrer parfois difficile, du fait que les bactries lyophilises et dshydrates peuvent tre obtenues auprs de fournisseurs diffrents. Il peut donc en rsulter une mconnaissance des dtails de la composition, qui, par consquent, ne peut pas tre int

21、erprte par lutilisateur. Pour cette raison, la prsente partie de lISO 11348 comprend, en complment des mesurages de toxicit laide de bactries dshydrates (ISO 11348-2) et de bactries frachement prpares (ISO 11348-1), la description dun mode opratoire utilisant des bactries lyophilises dont les perfor

22、mances peuvent tre interprtes par lutilisateur dans les moindres dtails. Les laboratoires responsables des rsultats ont lopportunit de slectionner la technique la mieux adapte, en se fondant sur des jugements dexperts et des informations relatives aux chantillons deau soumis essai. NORME INTERNATION

23、ALE ISO 11348-3:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs 1 Qualit de leau Dtermination de leffet inhibiteur dchantillons deau sur la luminescence de Vibrio fischeri (Essai de bactries luminescentes) Partie 3: Mthode utilisant des bactries lyophilises AVERTISSEMENT Il convient que lutilisateur de la prsen

24、te partie de lISO 11348 connaisse bien les pratiques courantes de laboratoire. La prsente norme na pas pour but de traiter tous les problmes de scurit qui sont, le cas chant, lis son utilisation. Il est de la responsabilit de lutilisateur de mettre en place des pratiques dhygine et de scurit adquate

25、s et de sassurer de la conformit avec toutes les dispositions rglementaires nationales. IMPORTANT Il est indispensable que les essais mens selon la prsente partie de lISO 11348 le soient par du personnel qualifi. 1 Domaine dapplication LISO 11348 dcrit trois mthodes de dtermination de linhibition de

26、 la luminescence mise par la bactrie marine Vibrio fischeri (NRRL B-11177). La prsente partie de lISO 11348 spcifie une mthode utilisant des bactries lyophilises. Cette mthode est applicable: aux eaux uses; aux extraits aqueux et aux lixiviats; aux eaux douces (eaux de surface ou souterraines); leau

27、 de mer ou aux eaux saumtres; aux luats de sdiments (eau douce, eau saumtre et eau de mer); aux eaux interstitielles; aux substances individuelles dilues dans leau. 2 Rfrences normatives Les documents de rfrence suivants sont indispensables pour lapplication du prsent document. Pour les rfrences dat

28、es, seule ldition cite sapplique. Pour les rfrences non dates, la dernire dition du document de rfrence sapplique (y compris les ventuels amendements). ISO 5667-16, Qualit de leau chantillonnage Partie 16: Lignes directrices pour les essais biologiques des chantillons ISO 5814, Qualit de leau Dosage

29、 de loxygne dissous Mthode lectrochimique la sonde ISO 11348-3:2007(F) 2 ISO 2007 Tous droits rservs3 Principe Linhibition de la luminescence produite par des cultures de Vibrio fischeri est dtermine au moyen dun essai par lots. Celui-ci est mis en uvre par mlange de volumes spcifis de lchantillon s

30、oumis essai, ou de lchantillon dilu, et de bactries luminescentes mises en suspension dans une cuvette. Le critre suivi est la luminescence, mesure aprs un temps de contact de 15 min ou de 30 min, et ventuellement de 5 min, prenant en compte un facteur de correction (f kt ) qui reprsente une mesure

31、des changements dintensit des tmoins pendant le temps dexposition. Leffet inhibiteur de lchantillon deau peut tre dtermin sous forme des valeurs de DMSE (voir Annexe B) ou des valeurs de CE 20et/ou de CE 50 , au moyen dune srie de dilutions (CE est la concentration effective). 4 Interfrences Des sub

32、stances insolubles, faiblement solubles ou volatiles, ou des substances qui ragissent avec leau de dilution ou avec la suspension, ou qui saltrent au cours de la priode dessai, sont susceptibles dinfluer sur les rsultats ou de nuire la reproductibilit des rsultats dessai. Les pertes de luminescence,

33、 provoques par labsorption ou la diffusion de lumire, peuvent se produire en prsence deaux fortement colores ou turbides. Cette interfrence peut tre compense en soumettant lchantillon un traitement contre la turbidit (7.2) ou, par exemple, en utilisant une cuvette de correction de labsorption double

34、 compartiment (voir Annexe A). La bioluminescence6ncessitant de loxygne, les chantillons forte demande en oxygne (et/ou possdant une faible concentration en oxygne) peuvent provoquer un dficit en oxygne et tre inhibiteurs. La prsence de substances nutritives biodgradabilit rapide dans lchantillon pe

35、ut provoquer une rduction de la bioluminescence indpendante de la pollution 1 . Les chantillons dont le pH se trouve en dehors de la plage de pH = 6,0 pH = 8,5 affectent la luminescence des bactries 6, 7 . Un ajustement de lchantillon est ncessaire si leffet toxique du pH est indsirable. tant donn q

36、ue lorganisme dessai Vibrio fischeri est une bactrie marine, les essais sur des chantillons deau sale suivant le mode opratoire normalis ont souvent pour rsultat une stimulation de la bioluminescence, susceptible de masquer des effets inhibiteurs (voir Annexe D). Les concentrations en sel de lchanti

37、llon initial suprieures 30 g/l de NaCl, ou les teneurs en composs autres produisant une osmolarit quivalente, peuvent conduire, en association avec ladjonction de sel requis pour lessai, des effets hyperosmotiques. Pour viter ces effets, il convient que la concentration en sel rsultante dans les cha

38、ntillons soumis essai nexcde pas losmolarit dune solution de chlorure de sodium 35 g/l. 5 Ractifs et matriaux Utiliser des substances chimiques de qualit analytique reconnue. Utiliser de leau distille ou prsentant une puret quivalente. 5.1 Bactries pour essai. Utiliser une souche de bactries lumines

39、centes appartenant lespce Vibrio fischeri NRRL B-11177. Les suspensions de bactries utilises pour les mesurages de la toxicit sont prpares partir de ractifs lyophiliss disponibles dans le commerce, pouvant tre conservs au conglateur entre 18 C et 20 C. Les bactries commencent mettre de la lumire imm

40、diatement aprs leur rhydratation et sont prtes tre utilises pour lessai. ISO 11348-3:2007(F) ISO 2007 Tous droits rservs 3 5.2 Solution de chlorure de sodium, utilise comme diluant. Dissoudre 20 g de chlorure de sodium (NaCl) dans de leau et complter 1 l avec de leau. 5.3 Solution aqueuse dhydroxyde

41、 de sodium, c(NaOH) = 1 mol/l, par exemple. 5.4 Acide chlorhydrique, c(HCl) = 1 mol/l, par exemple. Il peut tre ncessaire, pour lajustement du pH, dutiliser des acides ou des bases de concentrations suprieures ou infrieures. 5.5 Solution destine aux bactries lyophilises. 20 g Chlorure de sodium (NaC

42、l) 2,035 g Chlorure de magnsium hexahydrat (MgCl 2 ,6H 2 O) 0,30 g Chlorure de potassium (KCl) Dissoudre dans de leau et complter 1 l avec de leau. Cette solution peut tre conserve sous forme daliquotes de 18 C 20 C dans un conglateur. 5.6 Substances de rfrence. Prparer les solutions mres des substa

43、nces de rfrence suivantes en utilisant la solution de chlorure de sodium (5.2) sparment comme diluant, sans ajustement du pH: 19,34 mg/l Sulfate de zinc heptahydrat (ZnSO 4 ,7H 2 O) 6,8 mg/l 3,5-Dichlorophnol (C 6 H 4 OCl 2 ) (puret 99 %) 105,8 mg/l Dichromate de potassium (K 2 Cr 2 O 7 ) Ces concen

44、trations reprsentent environ le double des valeurs de CE 50attendues pour les substances de rfrence respectives dans la prsente partie de lISO 11348. Les volumes ncessaires dpendent de la configuration des essais. NOTE Il est possible dutiliser des prparations chimiques du commerce ayant des concent

45、rations dfinies en ZnSO 4et K 2 Cr 2 O 7(titrisol) pour prparer les solutions mres des substances de rfrence. 6 Appareillage 6.1 Conglateur, destin la conservation des bactries prserves. 6.2 Incubateur ou rfrigrateur, destin maintenir la suspension mre (8.2) et, ventuellement, la solution destine au

46、x bactries lyophilises (5.5) (variante B) une temprature de (4 3) C. 6.3 Bloc thermique thermostat, destin maintenir les chantillons soumis lessai une temprature de (15 1) C. Au sein dun essai, il convient que lcart de temprature soit au plus de 0,3 C. 6.4 Luminomtre, dont la cellule de mesure est m

47、aintenue (15 1) C, quip de cuvettes appropries. 6.5 Cuvettes, fabriques partir dun matriau chimiquement inerte, adaptes au luminomtre choisi, ayant une capacit suffisante pour favoriser la lecture sur la plus grande surface possible et de taille adapte pour pouvoir tre places dans le bloc thermique (6.3). 6.6 pH-mtre. 6.7 Chronomtre. ISO 11348-3:2007(F) 4 ISO 2007 Tous