ISO 17099-2014 Radiological protection - Performance criteria for laboratories using the cytokinesis block micronucleus (CBMN) assay in peripheral blood lymphoc.pdf

1、 ISO 2014 Radioprotection Critres de performance pour les laboratoires pratiquant la dosimtrie biologique par le test des micronoyaux avec blocage de la cytodirse (CBMN) dans les lymphocytes du sang priphrique Radiological protection Performance criteria for laboratories using the cytokinesis block

2、micronucleus (CBMN) assay in peripheral blood lymphocytes for biological dosimetry NORME INTERNATIONALE ISO 17099 Premire dition 2014-11-15 Numro de rfrence ISO 17099:2014(F) ISO 17099:2014(F)ii ISO 2014 Tous droits rservs DOCUMENT PROTG PAR COPYRIGHT ISO 2014 Droits de reproduction rservs. Sauf ind

3、ication contraire, aucune partie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie, laffichage sur linternet ou sur un Intranet, sans autorisation crite pralable. Les demandes dautorisation peuve

4、nt tre adresses lISO ladresse ci-aprs ou au comit membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyright office Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en Suisse ISO 17099:2014(F)Sommaire Page Avant-propos v Introd

5、uction vi 1 Domaine dapplication . 1 2 T ermes et dfinitions . 1 3 Mthodologie du test des micronoyaux 4 3.1 Gnralits 4 3.2 Exigences gnrales relatives au laboratoire 4 3.3 Demandes danalyse et prlvement de sang . 4 3.4 Culture des cellules . 5 3.5 Coloration 6 3.6 Microscopie 6 3.7 Dnombrement visu

6、el des lames 6 3.7.1 Gnralits 6 3.7.2 Critres de dnombrement . 6 3.7.3 Tableaux de dnombrement 7 3.8 Analyse automatise 7 4 C onfidentialit des informations personnelles 7 4.1 Gnralits 7 4.2 Applications du principe de confidentialit . 8 4.2.1 Dlgation de responsabilits au sein du laboratoire . 8 4.

7、2.2 Demandes danalyse . 8 4.2.3 Transmission dinformations confidentielles . 8 4.2.4 Anonymat des chantillons 8 4.2.5 Prsentation des rsultats . 8 4.2.6 Stockage . 8 5 Exigences de scurit du laboratoire 9 5.1 Gnralits 9 5.2 Exigences de scurit microbiologique . 9 5.3 Exigences de scurit chimique . 9

8、 5.4 Exigences de scurit optique 11 5.5 Procdures de scurit 11 6 Source(s) dtalonnage, courbe de calibration et dose minimum dtectable .11 6.1 Source(s) dtalonnage .11 6.2 Courbe de calibration .11 6.3 Frquence de base des micronoyaux 12 6.4 Mesure de la dose minimum dtectable 13 7 Responsabilit du

9、demandeur 13 8 Responsabilit du laboratoire danalyse 13 8.1 Mise en place et maintenance dun programme dassurance de la qualit (AQ) 13 8.2 Responsabilit pendant le service .14 9 Surexposition accidentelle dun petit nombre dindividus .15 9.1 Procdure de dnombrement des micronoyaux dans les cellules b

10、inucles 15 9.1.1 Codage des chantillons et des lames .15 9.1.2 Techniques de dnombrement .15 9.1.3 Comptence du laboratoire pour le dnombrement .15 9.2 Critres pour convertir un taux de micronoyaux en une estimation de dose absorbe .15 9.2.1 Gnralits .15 9.2.2 Comparaison avec les valeurs tmoins 16

11、9.2.3 Dtermination de la dose estime et des limites de lintervalle de confiance .16 9.2.4 Cas dexposition aigu et non aigu .16 9.2.5 Analyse de la rpartition des micronoyaux par cellule binucle 16 ISO 2014 Tous droits rservs iii ISO 17099:2014(F)9.3 Prsentation des rsultats .17 9.3.1 Gnralits .17 9.

12、3.2 Contenu du rapport (voir Annexe E pour un format normalis) 17 9.3.3 Interprtation des rsultats 18 10 Tri de population 18 10.1 Gnralits .18 10.2 Utilisation dun rseau employant le test des CBMN pour les expositions de grande ampleur .18 10.3 Procdure de dnombrement des micronoyaux dans les cellu

13、les binucles 18 10.4 Critres pour convertir un taux de micronoyaux en une estimation de dose absorbe .19 10.5 Prsentation des rsultats .19 11 Assurance et contrle de la qualit .19 11.1 Gnralits .19 11.2 Assurance de la qualit .19 11.2.1 Plan dassurance de la qualit .19 11.2.2 Personne ou organisatio

14、n en charge de lassurance de la qualit 19 11.3 Contrle de la qualit .19 11.3.1 Gnralits .19 11.3.2 Procdures de contrle de la qualit .19 11.3.3 Contrle de performance du transport des prlvements .20 11.3.4 Contrle de performance de lintgrit des prlvements par le laboratoire danalyse .20 11.3.5 Contr

15、le de performance de lappareillage .20 11.3.6 Contrle de performance des protocoles exprimentaux .20 11.3.7 Contrle de performance de la qualit de dnombrement 21 11.3.8 Contrle de performance de lestimation de la dose et de lintervalle de confiance 21 11.3.9 Contrle de performance du rapport dexpert

16、ise 21 Annexe A (informative) Tableau type pour le dnombrement des micronoyaux dans les cellules binucles.22 Annexe B (informative) Automatisation du dnombrement des micronoyaux 23 Annexe C (informative) Instructions pour le demandeur (exemple) 25 Annexe D (informative) Exemple de questionnaire .26

17、Annexe E (informative) Exemple de rapport portant sur une valuation individuelle 28 Annexe F (informative) Exemple de rapport portant sur un groupe dindividus .29 Bibliographie .31 iv ISO 2014 Tous droits rservs ISO 17099:2014(F) Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est u

18、ne fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations inter

19、nationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. L ISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les procdures utilises pour laborer le prsent document

20、et celles destines sa mise jour sont dcrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des diffrents critres dapprobation requis pour les diffrents types de documents ISO. Le prsent document a t rdig conformment aux rgles de rdaction donnes dans les Directive

21、s ISO/IEC, Partie 2 (voir www. iso.org/directives). Lattention est appele sur le fait que certains des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de prop

22、rit et averti de leur existence. Les dtails concernant les rfrences aux droits de proprit intellectuelle ou autres droits analogues identifis lors de llaboration du document sont indiqus dans lIntroduction et/ou dans la liste des dclarations de brevets reues par lISO (voir www.iso.org/brevets). Les

23、appellations commerciales ventuellement mentionnes dans le prsent document sont donnes pour information, par souci de commodit, lintention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement. Pour une explication de la signification des termes et expressions spcifiques de lISO lis lvaluation d

24、e la conformit, ou pour toute information au sujet de ladhsion de lISO aux principes de lOMC concernant les obstacles techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: Avant-propos Informations supplmentaires. Le comit charg de llaboration du prsent document est lISO/TC 85, nergie nuclaire, sous-c

25、omit SC 2, Radioprotection. ISO 2014 Tous droits rservs v ISO 17099:2014(F) Introduction Lobjectif de la prsente Norme internationale est de dfinir lutilisation de la dosimtrie biologique par le test des micronoyaux avec blocage de la cytodirse (CBMN) dans les lymphocytes du sang priphrique humain q

26、ui ont t exposs des rayonnements ionisants. Ce test est destin tre appliqu en cas dexposition accidentelle ou malveillante impliquant a) un nombre de personnes rduit afin de fournir des estimations de doses compltes et individuelles, ou b) dans une situation de tri durgence afin de fournir des estim

27、ations de doses provisoires pour les individus dune population. Le test des CBMN est une autre technique cytogntique qui est plus simple et ventuellement plus rapide mettre en uvre que le dnombrement des dicentriques (ISO 19238:2014, ISO 21243:2008). Il est galement couramment employ pour dmontrer l

28、exposition aux agents gnotoxiques autres que les rayonnements ionisants, qui ne sont pas couverts par la prsente Norme internationale. Bien que la priode de culture des chantillons de sang soit lgrement plus longue que pour les dicentriques, le dnombrement des micronoyaux dans les lymphocytes binucl

29、s est plus ais. Comme pour le dnombrement des dicentriques, le test des CBMN a t adapt pour le tri en urgence en cas daccident dirradiation impliquant de trs nombreuses personnes. Le volume de sang requis pour disposer dun nombre suffisant de cellules binucles dnombrables est similaire celui requis

30、pour le dnombrement des dicentriques. Une fois encore, la rapidit de comptage des micronoyaux compense lallongement de la priode de culture. De plus, le test des CBMN peut tre automatis. La prsente Norme internationale fournit des lignes directrices pour lvaluation dosimtrique en utilisant des procd

31、ures de test des CBMN documentes et valides. Lvaluation de dose en utilisant le test des CBMN est pertinente pour la prise en charge mdicale, la radioprotection, lenregistrement et les exigences mdico-lgales. La prsente Norme internationale est scinde en deux parties, selon lutilisation du test des

32、CBMN: exposition aux rayonnements dun petit nombre dindividus ou tri dune population en cas dvnement radiologique de grande ampleur. Une partie de linformation contenue dans la prsente Norme internationale est incluse dans dautres guides et publications scientifiques internationales, et principaleme

33、nt dans le document sur la Dosimtrie Biologique dans la Srie de Rapports Techniques de lAgence Internationale de lnergie Atomique (AIEA). Cependant, la prsente Norme internationale dveloppe et normalise lassurance et le contrle de la qualit, les critres daccrditation et lvaluation des performances.

34、De manire gnrale, la prsente Norme internationale se conforme lISO/IEC 17025, Exigences gnrales concernant la comptence des laboratoires dtalonnages et dessais en portant une attention particulire aux besoins spcifiques de la dosimtrie biologique. Lexpression des incertitudes dans les estimations de

35、 dose indiques dans la prsente Norme internationale est en accord avec le Guide ISO pour lexpression de lincertitude de mesure (ancien GUM) et toutes les parties de la norme ISO 5725.vi ISO 2014 Tous droits rservs Radioprotection Critres de performance pour les laboratoires pratiquant la dosimtrie b

36、iologique par le test des micronoyaux avec blocage de la cytodirse (CBMN) dans les lymphocytes du sang priphrique 1 Domaine dapplication La prsente Norme internationale porte sur: a) la confidentialit des informations personnelles pour le demandeur et le laboratoire; b) les exigences de scurit du la

37、boratoire; c) les sources de rayonnements, les dbits de doses et les gammes utilises pour tablir les courbes dose-effet dtalonnage de rfrence qui permettent destimer les doses partir des rsultats du test des CBMN, ainsi que la dose minimum dtectable; d) le prlvement de sang, la mise en culture, le r

38、ecueil des cellules aprs culture et la prparation des chantillons pour le test des CBMN; e) les critres de dnombrement; f) la conversion de la frquence des micronoyaux dans les cellules binucles en estimation de dose absorbe; g) la prsentation des rsultats; h) lassurance et le contrle de la qualit;

39、i) les annexes informatives contenant des exemples de questionnaire, dinstructions dutilisation, de tableau de dnombrement au microscope et de rapport, ainsi quune synthse des avantages et limites des systmes automatiss actuellement disponibles pour le dnombrement des micronoyaux. 2 T ermes et dfini

40、tio ns Pour les besoins du prsent document, les termes et dfinitions suivants sappliquent. 2.1 acentrique fragment chromosomique de taille variable Note 1 larticle: lorsquil est form indpendamment dune aberration chromosomique de type dicentrique ou anneau centrique, il est habituellement considr co

41、mme un fragment acentrique en excs. 2.2 taux de base frquence spontane (ou nombre) de micronoyaux dnombrs sur des chantillons ou des individus tmoins 2.3 biais erreur statistique lchantillonnage ou lors de la mesure, qui est due au fait de favoriser systmatiquement certains rsultats par rapport daut

42、res NORME INTERNATIONALE ISO 17099:2014(F) ISO 2014 Tous droits rservs 1 ISO 17099:2014(F) 2.4 cellules binucles cellules ayant effectu une division nuclaire aprs une stimulation mitognique et type de cellule dans lequel les micronoyaux sont dnombrs Note 1 larticle: ces cellules sont regroupes dans

43、un milieu de culture contenant de la cytochalasine B, qui est un inhibiteur de la cytodirse. 2.5 laboratoire danalyse des CBMN laboratoire qui pratique la dosimtrie biologique par le test des CBMN 2.6 anneau centrique chromosome circulaire aberrant rsultant de la jonction de deux points de cassure s

44、ur les diffrents bras dun mme chromosome (gnralement accompagn dun fragment acentrique) 2.7 centromre rgion spcialise dun chromosome portant une constriction, runissant les deux chromatides surs et qui apparat pendant la mitose 2.8 chromosome structure qui porte linformation gntique Note 1 larticle:

45、 normalement, 46 de ces structures sont contenues dans le noyau dune cellule humaine. Pendant la division nuclaire, ils se condensent pour former des lments de forme caractristique. 2.9 chromatide un des deux brins dun chromosome dupliqu qui sont runis par le centromre Note 1 larticle: les chromatid

46、es se sparent pendant la mitose pour sindividualiser comme des chromosomes. 2.10 i n t e r v a l l e d e c o n f i a n c e intervalle statistique autour dune quantit estime lintrieur de laquelle la valeur de la quantit est attendue avec une certaine probabilit spcifie 2.11 cytochalasine B cytoB ract

47、if utilis pour bloquer la cytodirse pendant la division cellulaire et permettant didentifier les cellules ayant effectu une seule division comme des cellules binucles Note 1 larticle: les cellules binucles sont les cellules dans lesquelles les micronoyaux sont spcifiquement dnombrs. 2.12 dicentrique chromosome aberrant portant deux centromres rsultant de la jonction des morceaux de deux chromosomes coups (gnralement accompagn dun fragment acentrique)2 ISO 2014 Tous droits rservs ISO 17099:2014(F) 2.13 h y b r i d a t i o n f l u o r e s c e n t e i n s