SN T 0276-1993 出口禽肉中氨丙嘧吡啶残留量检验方法 薄层色谱法.pdf

1、 SN/T 0276-1993 出口禽肉中氨丙嘧吡啶残留量检验方法 1994年5月1 日实施 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口禽肉中癸氧喹酯残留量检验的抽样、制样和荧光法测定方法。 本标准适用于出口鸡肉中癸氧喹酯残留量的检验。 2 抽样和制样 2.1 检验批 以不超过 2500 件为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同的特征 ,如包装、标记、产地、规格和等级等。 2.2 抽样数量 2.3 抽样方法 按 2.2 规定的抽样件数随机抽取 ,逐件开启。每件取 500g(或一袋 )作为原始样品 ,原始样品总量不得少于 2kg。加封后 ,标明标记 ,及时送实验室。 2.4 试样制备 将所取原始

2、样品缩分出 1kg,取可食部分 ,经组织捣碎机捣碎 ,均分成两份 ,装入洁净容器内 ,作为试样。密封 ,并标明标记。 2.5 试样保存 将试样于 -18以下冷冻保存。 注 :在抽样和制样的操作过程中 ,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 3 测定方法 3.1 方法提要 试样在甲醇 -三氯甲烷中匀浆 ,加入偏磷酸后 ,癸氧喹酯被提取到三氯甲烷中 ,在弗罗里硅土层析柱上与干扰物质分离 ,用氯化钙 -甲醇溶液洗脱柱上的癸氧喹酯 ,荧光法测定。 3.2 试剂和材料 1 3.2.1 甲醇 :分析纯 ,重蒸馏 ,收集 64 65馏分。 3.2.2 三氯甲烷 :分析纯 ,重蒸馏。 3.2.3 无水

3、氯化钙 :分折纯。 3.2.4 偏磷酸 :分析纯。 3.2.5 甲醇 -三氯甲烷 (4 1)。 3.2.6 洗脱液 :将 10g 无水氯化钙溶解于 1L 重蒸馏甲醇中 ,放置 24h。取澄清液备用。 3.2.7 偏磷酸溶液 :将 50g 偏磷酸溶解于 1L 水中。在 5下冷藏 ,使用冷溶液。 3.2.8 弗罗里硅土 :100 200 目 ,层析用。于 130烘箱中活化 5h,取出 ,放置干燥器中冷却备用。 3.2.9 癸氧喹酯标准品 :纯度 99。 3.2.10 癸氧喹酯标准溶液 :准确称取适量的癸氧喹酯标准品 ,用三氯甲烷配成浓度为 200g/mL 的标准储备溶液 ,根据需要再配成适当浓度的

4、标准工作溶液。 3.3 仪器和设备 3.3.1 荧光分光光度计 ,配有 10mm 荧光比色皿。 3.3.2 组织捣碎机。 3.3.3 刻度试管 :15mL,具塞。 3.3.4 高速匀浆器。 3.3.5 离心管 :50mL,具塞。 3.3.6 分液漏斗 :250mL。 3.3.7 层析柱 :玻璃柱 ,200mm10mm(内径 )。柱底部填少量玻璃棉。柱中加入 5mL 三氯甲烷 ,然后加 0.40.01g 弗罗里硅土。再加入 2mL 三氯甲烷并用细玻璃棒搅动 ,用三氯甲烷冲洗柱壁。临使用前制备。 3.4 测定步骤 3.4.1 提取 称取试样 20g(精确到 0.1g)于高速匀浆器中 ,加入 801

5、g 甲醇 -三氯甲烷 (4 1)。匀浆 1min 后转入离心管中 ,在约 2000r/min 下离心 5min。倾出并称取 50g 上清液 (相当于 10g 样品 )于250mL 分液漏斗中。加入 100mL 偏磷酸溶液 (3.2.7),将分液漏斗颠倒 50 次 ,静置分层 10min,收集三氯甲烷层 ,保留水相。再加入 10mL 三氯甲烷于分液漏斗中 ,如前摇动和分层。合并两次三氯甲烷提取液 ,加入 2mL 甲醇 ,并用三氯甲烷稀释至 25mL。 3.4.2 净化 将 25mL 提取液加于层析柱中 ,用 10mL 甲醇洗层析柱 ,弃去流出液。用 15mL 洗脱液 (3.2.6)进行洗脱 ,收

6、集 15mL 流出液 ,供测定。 23.4.3 测定 3.4.3.1 分光荧光条件 a 激发波长 :265nm; b. 发射波长 :390nm。 3.4.3.2 标准曲线的绘制 在 4 个 250mL 的分液漏斗中 ,分别加入 55mL(50g)甲醇 -三氯甲烷 (4 1)溶液 ,再分别加入0.0,0.1,0.3 和 0.5mL 标准工作溶液 (10g/mL),其中分别含 0,1,3 和 5g 癸氧喹酯。从 “加入 100mL 偏磷酸溶液 (3.2.7)”开始按测定步骤操作。用荧光强度与对应的癸氧喹酯 (g/mL)绘制标准曲线。 3.4.3.3 荧光分光测定 测定样液中癸氧喹酯的荧光强度。样液

7、中癸氧喹酯含量应在仪器检测的线性范围内。 由标准曲线查得样液中癸氧喹酯的浓度 (g/mL)。 3.4.4 空白试验 除不加试样外 ,按上述测定步骤进行。 3.5 结果计算和表述 按下式计算试样中癸氧喹酯残留含量 : cV X m 式中 :X试样中癸氧喹酯残留量 ,mg/kg; c样液中癸氧喹酯的浓度 ,g/mL; V样液最终定容体积 ,mL; m最终样液所代表的试样量 ,g。 注 :计算结果需扣除空白值。 4 方法的测定低限、回收率 4.1 测定低限 本方法的测定低限为 0.1mg/kg。 4.2 回收率 回收率的实验数据 :癸氧喹酯的添加浓度在 0.10 0.50mg/kg 范围内 ,回收率为 80.0 106.0。 附加说明 : 本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。 3 本标准由中华人民共和国浙江进出口商品检验局负责起草。 本标准主要起草人郑自强、徐亮、唐红芳。 4