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SN T 2319-2009 进出口食品中喹氧灵残留量的检测方法.pdf

1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口食品中喹氧灵残留量检测方法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前言本标准的附录、附录、附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人:杨方、卢声宇、陈祥明、刘正才、林永辉、李捷、林安清、李波、蓝锦昌、江锦彬。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛犖

2、犜进出口食品中喹氧灵残留量检测方法范围本标准规定了进出口食品中喹氧灵残留量的液相色谱与液相色谱质谱质谱的检测方法。本标准适用于大豆、花椰菜、樱桃、木耳、葡萄酒、茶叶、蜂蜜、猪肝、鸡肉、鳗鱼中喹氧灵残留量的测定和确证。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法方法提要试样中残留的喹氧灵采用乙酸乙酯振荡或饱和碳酸氢钠溶液乙酸乙酯提取,固相萃取小柱净

3、化或凝胶渗透色谱结合固相萃取小柱净化,液相色谱仪或液相色谱质谱质谱仪检测及确证,外标法定量。试剂和材料除非另有规定,所用试剂均为分析纯,水为规定的一级水。正己烷:色谱纯。乙酸乙酯:色谱纯。乙腈:色谱纯。甲醇:色谱纯。环己烷:色谱纯。丙酮:色谱纯。碳酸氢钠。无水硫酸钠:使用前于干燥,密封保存。环己烷乙酸乙酯溶液:分别量取环己烷与乙酸乙酯,混匀。丙酮正己烷溶液:移取丙酮于正己烷中,混匀。乙腈水溶液:分别量取乙腈与水,混匀。饱和碳酸氢钠溶液:称取一定量碳酸氢钠溶于水溶液中至饱和。喹氧灵标准物质(英文名,分子式,相对分子质量):纯度大于等于。喹氧灵标准贮备液():准确称取喹氧灵标准物质,用甲醇溶解并定

4、容至,该标准储备液于可保存个月。喹氧灵标准工作液:根据需要取适量标准贮备液,以乙腈水溶液稀释成适当浓度的标准工作液。标准储备液于可保存个月。氨基()固相萃取柱:,。滤膜:,有机系。犛犖犜仪器和设备液相色谱仪,配紫外或二极管阵列检测器。液相色谱质谱质谱联用仪,配电喷雾()源。分析天平,感量分别为与。凝胶渗透色谱。离心机:,配有的具塞塑料离心管。粉碎机。组织捣碎机。涡旋混合器。超声波清洗器。固相萃取装置。氮吹仪。试样制备和保存水果蔬菜类取有代表性样品,将可食部分切碎后(不可水洗),用组织捣碎机将样品加工成浆状,混匀,分成两份,装入洁净容器内,密封并标识。茶叶、粮谷与坚果类取有代表性样品,用粉碎机粉

5、碎并通过圆孔筛,混匀,分成两份,装入洁净容器内,密封并标识。肉及肉制品取有代表性样品,切碎后用组织捣碎机将样品加工成浆状,混匀,装入洁净容器内,分成两份,密封并标识。蜂蜜取有代表性样品,对于无结晶的蜂蜜样品,将其搅拌均匀。对有结晶的样品,在密闭情况下,置于不超过的水浴中温热,振荡,待样品全部融化后搅匀,迅速冷却至室温,分成两份,装入洁净样品瓶中,密封并标识。果汁、果酒等样品将取得的全部原始样品倒入洁净的混样桶中,充分搅拌混匀,再将混匀样品分装两份,每份约,密封并标识。保存条件茶叶、果酒、蜂蜜、粮谷于保存,蔬菜、水果、肉及肉制品于保存。在制样过程中,应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定

6、步骤提取茶叶、谷物及坚果等样品:称取(精确至)试样,置于具塞塑料离心管中,加入饱和碳酸氢钠溶液()振摇浸泡,加入乙酸乙酯(),涡动后超声提取,离心,移出有机相,残渣再加入乙酸乙酯重复提取次,合并提取液,经无水硫酸钠()干燥后于旋转蒸发至近干,加入正己烷(),涡动溶解残渣,按步骤净化。蔬菜与水果样品:称取(精确至)试样,置于具塞塑料离心管中,加入犛犖犜乙酸乙酯,振摇均匀后超声提取,离心,移出有机相,残渣再加入乙酸乙酯重复提取次,合并提取液,经无水硫酸钠干燥后于旋转蒸发至近干,加入正己烷,涡动溶解残渣,按步骤净化。果汁、蜂蜜、葡萄酒等:称取(精确至)试样置于具塞三角瓶中,加入饱和碳酸氢钠溶液、乙酸

7、乙酯,振摇均匀后超声提取,离心,移出有机相,残渣再加入乙酸乙酯重复提取次,合并提取液,经无水硫酸钠干燥后于旋转蒸发至近干,加入正己烷,涡动溶解残渣,按步骤净化。肉及肉制品:称取(精确至)试样置于具塞塑料离心管中,加入饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯,以均质器于均质提取,离心,移出有机相,残渣再加入乙酸乙酯重复提取次,合并提取液,经无水硫酸钠干燥后于旋转蒸发至近干,加入环己烷乙酸乙酯(),涡动溶解残渣,于离心,按与步骤顺序净化。净化凝胶渗透色谱对于所得的提取液,取通过样品环注入凝胶色谱柱,按以下条件操作:)净化柱:填料,(内径);)流动相:环己烷乙酸乙酯(,体积比);)流速:。收集的流出液,旋转蒸发至

8、近干,加入正己烷,待固相萃取小柱净化。注:若样品中所含的脂肪量大于,则应调整样品提取液体积,使得注入凝胶色谱的样液中所含的脂肪量不大于。固相萃取小柱净化使用前以甲醇、正己烷预淋洗小柱,将样品提取液上柱,用正己烷淋洗,弃去全部淋洗液,以丙酮正己烷()洗脱,保持流速约为,收集洗脱液,于氮吹至近干,以乙腈水溶液()定容,过滤膜,供高效液相色谱测定;或以乙腈水溶液定容,过滤膜,供液相色谱质谱质谱测定。液相色谱测定色谱条件)色谱柱:柱,(内径),或相当者;)流动相:乙腈水(,体积比);)流速:;)检测波长:;)进样量:。色谱测定以喹氧灵标准工作液进样,以峰面积为纵坐标,工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲

9、线,用标准工作曲线对样品进行定量。标准工作液和待测样液中喹氧灵的响应值均应在仪器线性响应范围内。按项下规定进行结果计算。在本方法条件下,喹氧灵的保留时间约为。标准品色谱图参见附录中图。液相色谱质谱质谱法测定色谱条件)色谱柱:柱,(内径),或相当者;)柱温:;犛犖犜)流动相:乙腈水(,体积比);)流速:;)进样量:。质谱条件)离子源:电喷雾源(),正离子模式;)扫描方式:多反应监测()。其他参考质谱条件参见附录中表。液相色谱质谱质谱测定根据试样中被测物的含量情况,选取响应值适宜的标准工作液进行色谱分析。标准工作液和待测样液中喹氧灵的响应值均应在仪器线性响应范围内。按项下规定进行结果计算。在本方法

10、条件下,喹氧灵的保留时间约为,在锥孔电压为时,标准品的二级质谱图与多反应监测()色谱图分别参见附录中图与图。定性标准进行样品测定时,如果检出的色谱峰保留时间与标准样品一致,并且在扣除背景后的样品谱图中,各定性离子的相对丰度与浓度接近的同样条件下得到的标准溶液谱图相比,最大允许相对偏差不超过表中规定的范围,则可判断样品中存在对应的被测物。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度允许的相对偏差空白实验除不加试样外,均按上述步骤进行。结果计算和表述用数据处理软件或按式()计算试样中喹氧灵药物的残留量,计算结果需扣除空白值:犡犮犞犿()式中:犡试样中喹氧灵残留量,单位为毫克每千克();犮从标

11、准工作曲线得到的喹氧灵溶液浓度,单位为毫克每升();犞样品溶液最终定容体积,单位为毫升();犿最终样液所代表的试样质量,单位为克()。测定低限、回收率测定低限液相色谱法的测定低限为。液相色谱质谱质谱法的测定低限为。回收率液相色谱法检测喹氧灵添加回收率数据见表。犛犖犜表液相色谱法检测喹氧灵药物残留的添加回收率数据样品名称添加浓度()回收率大豆花椰菜樱桃木耳葡萄酒茶叶蜂蜜猪肝鳗鱼鸡肉犛犖犜液相色谱质谱质谱法检测喹氧灵添加回收率数据见表。表液相色谱喹氧灵药物残留的添加回收率数据样品名称添加浓度()回收率大豆花椰菜樱桃木耳葡萄酒茶叶蜂蜜猪肝鳗鱼鸡肉犛犖犜附录犃(资料性附录)喹氧灵的液相色谱图图犃喹氧灵

12、的液相色谱图犛犖犜附录犅(资料性附录)参考质谱条件)参考质谱条件:)毛细管电压:;)源温度:;)去溶剂温度:;)锥孔气流(氮气):;)去溶剂气流(氮气):;)碰撞气压(氩气):;)驻留时间:。其他质谱参数见表。表犅喹氧灵的主要参考质谱参数化合物母离子()子离子()驻留时间锥孔电压碰撞能量喹氧灵该离子为定量离子。注:对于不同质谱仪器,仪器参数可能存在差异,测定前应将质谱参数优化到最佳。)非商业性声明:附录所列参考质谱条件是在型液质联用仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅为提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛犖犜附录犆(资料性附录)喹氧灵的二级质谱图与多反应监测(

13、犕犚犕)离子色谱图图犆喹氧灵的二级质谱图图犆喹氧灵的多反应监测()离子色谱图犛犖犜犉狅狉犲狑狅狉犱犃狀狀犲狓犃,犃狀狀犲狓犅,犃狀狀犲狓犆狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犲狊犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲狅犳狋犺犲犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犪犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犉狌犼犻犪狀犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲

14、狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪,犜犻犪狀犼犻狀犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪,犛犺犪狀犵犺犪犻犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犲犿犪犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犢犪狀犵犉犪狀犵,犔狌犛犺犲狀犵狔狌,犆犺犲狀犡犻犪狀犵犿犻狀犵,犔犻狌犣犺犲狀犵犮犪犻,犔犻狀犢狅狀犵犺狌犻,犔犻犑犻犲,犔犻狀犃狀狇犻狀犵,犔犻犅狅,犔犪狀犑犻狀犮犪狀犵,犑犻犪狀犵犑犻狀犫犻狀犜犺犻狊狊狋

15、犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狉狅犳犲狊狊犻狅狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犳狅狉犲狀狋狉狔犲狓犻狋犻狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱狇狌犪狉犪狀狋犻狀犲狆狉狅犿狌犾犵犪狋犲犱犳狅狉狋犺犲犳犻狉狊狋狋犻犿犲犛犖犜犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犛犮狅狆犲犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狉犲狊犻犱狌犲犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犫狔犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犪狀犱犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪

16、狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犿犲狋犺狅犱犜犺犲犿犲狋犺狅犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅犱犲狋犲狉犿犻狀犲狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狉犲狊犻犱狌犲犻狀狊狅狔犫犲犪狀狊,犮犪狌犾犻犳犾狅狑犲狉,犮犺犲狉狉狔,犿狌狊犺狉狅狅犿,狑犻狀犲,狋犲犪,犺狅狀犲狔,犾犻狏犲狉,犲犲犾,犮犺犻犮犽犲狀犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狉犲犳犲狉狋狅狋犺犲犳狅犾犾狅狑犻狀犵狊狋犪狀犱犪狉犱狊犪狀犱狋犺犲犾犪狋犲狊狋狏犲狉狊犻狅狀狊犪狉犲狉犲犮狅犿犿犲狀犱犲犱犌犅犜犠犪狋犲狉犳狅狉犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾犪犫狅狉犪狋狅狉狔狌狊犲犛狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱狋犲狊狋犿犲狋犺

17、狅犱狊犘狉犻狀犮犻狆犾犲犈狓狋狉犪犮狋犻狅狀狅犳狋犺犲狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狉犲狊犻犱狌犲狑犻狋犺犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲狅犳狊犪狋狌狉犪狋犲犱狊狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲,犪狀犱狋犺犲狀狆狌狉犻犳犻犮犪狋犻狅狀狑犻狋犺犪犖犎狊狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀(犛犘犈)犮犪狉狋狉犻犱犵犲,狅狉犵犲犾狆犲狉犿犲犪狋犻狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犮狅犿犫犻狀犲犱狑犻狋犺犖犎犛犘犈犮犾犲犪狀狌狆犜犺犲狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狉犲狊犻犱狌犲狑犪狊犪狀犪犾狔狊犻狊犫狔犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犪狀犪犾狔狊犻狊犪狀犱犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋

18、狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱,犪犾犾狉犲犪犵犲狀狋狊狌狊犲犱犪狉犲犃犚犵狉犪犱犲,犪狀犱狑犪狋犲狉犻狊狋犺犲犳犻狉狊狋犵狉犪犱犲犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅犌犅犜狀犎犲狓犪狀犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犈狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犛犖犜犕犲狋犺犪狀狅犾:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犆狔犮犾狅犺犲狓犪狀犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犃犮犲狋狅狀犲:犎犘犔犆犵狉犪犱犲犛狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲犛狅犱犻狌犿犛狌犾犳犪狋犲犃狀犺狔犱狉狅狌狊:犆犪犾

19、犮犻狀犲犪狋犳狅狉犺犪狀犱狊狋狅狉犲犻狀犪犱犲狊犻犮犮犪狋狅狉犆狔犮犾狅犺犲狓犪狀犲犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲:犃犱犱犿犔犮狔犮犾狅犺犲狓犪狀犲犻狀狋狅犿犔犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲犪狀犱犿犻狓狑犲犾犾犪犮犲狋狅狀犲犺犲狓犪狀犲:犘犻狆犲犿犔犿犲狋犺犪狀狅犾犻狀狋狅犿犔狀犺犲狓犪狀犲犪狀犱犿犻狓狑犲犾犾犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狑犪狋犲狉:犃犱犱犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犻狀狋狅犿犔狑犪狋犲狉犪狀犱犿犻狓狑犲犾犾犛犪狋狌狉犪狋犲犱狊狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀:犠犲犻犵犺犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犪犿狅狌狀狋狅犳狊狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲,犱犻狊狊狅犾狏犲犻狀狑犪狋犲狉狋犻

20、犾犾狊犪狋狌狉犪狋犻狅狀犛狋犪狀犱犪狉犱狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀:犕狅犾犲犮狌犾犪狉犳狅狉犿狌犾犪犆犎犆犾犉犖犗,犆犃犛犖狅,犿狅犾犲犮狌犾犪狉狑犲犻犵犺狋,狆狌狉犻狋狔犛狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狊狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀(犿犵犔):犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狑犲犻犵犺狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狊狋犪狀犱犪狉犱犿犪狋犲狉犻犪犾,犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾狋狅犪狏狅犾狌犿犲狅犳犿犔,犪狀犱狊狋狅狉犲犪狋犪狆狆狉狅狓犻犿犪狋犲犾狔犳狅狉犪犿犪狓犻犿狌犿狆犲狉犻狅犱狅犳犿狅狀狋犺狊犆犪犾犻犫狉犪狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀狊狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀:犇犻犾狌狋犲犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲狏狅犾狌犿犲狅犳狊

21、狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狊狋狅犪犻狀狋犲狀犱犲犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狑犪狋犲狉(,犞犞)犪狀犱狊狋狅狉犲犪狋犪狆狆狉狅狓犻犿犪狋犲犾狔犳狅狉犪犿犪狓犻犿狌犿狆犲狉犻狅犱狅犳犿狅狀狋犺犃犿犻狀狅狆狉狅狆狔犾(犖犎)狊狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犮犪狋狉犻犱犵犲:犿犵,犿犔犉犻犾狋犲狉犿犲犿犫狉犪狀犲:犿,犿,狀狔犾狅狀狊狔狉犻狀犵犲犳犻犾狋犲狉犃狆狆犪狉犪狋狌狊犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔:犈狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺狌犾狋狉犪狏犻狅犾犲狋狅狉犱犻狅犱犲犪狉狉犪狔犱犲狋犲犮狋狅狉犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉

22、犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔:犈狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺犲犾犲犮狋狉狅狊狆狉犪狔(犈犛犐)犔犆犻狀狋犲狉犳犪犮犲犈犾犲犮狋狉狅狀犻犮犫犪犾犪狀犮犲:犃犮犮狌狉犪犮狔犿犵犪狀犱犵,狉犲狊狆犲犮狋犻狏犲犾狔犛犖犜犌犲犾狆犲狉犿犲犪狋犻狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲:狉犿犻狀犌狉犻狀犱犲狉犜犻狊狊狌犲狊犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲狉犞狅狉狋犲狓犿犻狓犲狉犝犾狋狉犪狊狅狀犻犮犿犪犮犺犻狀犲犛狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犲狇狌犻狆犿犲狀狋犘狉犲狊狊狌狉犲犱犵犪狊犫犾狅狑犻狀犵犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋狅狉犛犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲犉狉狌

23、犻狋狊犪狀犱狏犲犵犲狋犪犫犾犲狊犆狅犾犾犲犮狋犮犪犵狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊狋犺犲犲犱犻犫犾犲狆狅狉狋犻狅狀狊犪狉犲犮狌狋狌狆(狑犻狋犺狅狌狋狑犪狊犺犻狀犵犫狔狑犪狋犲狉)犪狀犱犿犻狓犲犱狑犲犾犾狑犻狋犺犪狋犻狊狊狌狉犲犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲狉,犱犻狏犻犱犲狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狊犪犿狆犾犲狊,狊犲犪犾犻狀狋狑狅犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狊犪狀犱犾犪犫犲犾犜犲犪,犵狉犪犻狀狊犪狀犱狀狌狋狊犆狅犾犾犲犮狋犮犪犵狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊犪狀犱犮狉狌狊犺狑犻狋犺犪犵狉犻狀犱犲狉,犾犲狋狋犺犲犿狆犪狊狊狋犺狉狅狌犵犺犪犿犿犿犲狊犺狊犻犲狏犲,犱犻狏犻犱犲

24、狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狊犪犿狆犾犲狊,犲犪犾犻狀狋狑狅犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狊犪狀犱犾犪犫犲犾犕犲犪狋狊犪狀犱犿犲犪狋狆狉狅犱狌犮狋狊犆狅犾犾犲犮狋犮犪犵狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊犪狀犱狋犺犲犲犱犻犫犾犲狆狅狉狋犻狅狀狊犪狉犲犿犻狓犲犱狑犲犾犾狑犻狋犺犪狋犻狊狊狌狉犲犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲狉,犱犻狏犻犱犲狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狊犪犿狆犾犲狊,狊犲犪犾犻狀狋狑狅犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狊犪狀犱犾犪犫犲犾犎狅狀犲狔犆狅犾犾犲犮狋犮犪犵狋犺犲狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊,狋犺犲犮狉狔狊狋犪犾犾犻狀犲狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾犱犫犲犿犲犾狋狑犻狋犺狑犪狋犲狉犫犪

25、狋犺狌狀犱犲狉犇犻狏犻犱犲狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅狋狑狅狊犪犿狆犾犲犫狅狋狋犾犲狊,狊犲犪犾犪狀犱犾犪犫犲犾犑狌犻犮犲犪狀犱狑犻狀犲犕犻狓狑犲犾犾犪狀犱犮狅犾犾犲犮狋犮犪犿犔狋犺犲犲狀狋犻狉犲狊犪犿狆犾犲狊,犇犻狏犻犱犲狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅狋狑狅狊犪犿狆犾犲犫狅狋狋犾犲狊,狊犲犪犾犪狀犱犾犪犫犲犾犛犖犜犛犪犿狆犾犲狊狊狋狅狉犪犵犲犛犪犿狆犾犲狊狊狌犮犺狋犲犪,狑犻狀犲,犺狅狀犲狔犪狀犱犵狉犪犻狀狊狊狋狅狉犲犪狋,狊犪犿狆犾犲狊狊狌犮犺犪狊狏犲犵犲狋犪犫犾犲狊,犳狉狌犻狋狊,犿犲犪狋狊犪狀犱犿犲犪狋狆狉狅犱狌犮狋狊狊狋狅狉犲犪狋犐狀狋犺犲犮狅狌狉狊犲狅犳狊

26、犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀,狆狉犲犮犪狌狋犻狅狀狊犿狌狊狋犫犲狋犪犽犲狀狋狅犪狏狅犻犱犮狅狀狋犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅狉犪狀狔犳犪犮狋狅狉狊,狑犺犻犮犺犿犪狔犮犪狌狊犲狋犺犲犮犺犪狀犵犲狅犳狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋犕犲狋犺狅犱狅犳犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犈狓狋狉犪犮狋犻狅狀犜犲犪,犵狉犪犻狀狊犪狀犱狀狌狋狊:狑犲犻犵犺犵狅犳狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犻狀狋狅犪犿犔狊狋狅狆狆犲狉犲犱狆犾犪狊狋犻犮犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲,犪犱犱犿犔狊犪狋狌狉犪狋犲犱狊狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀()犪狀犱犾犲狋狊狋犪狀犱犳狅狉犿犻狀,犪犱犱犿犔犲狋犺狔犾犪犮犲狋

27、犪狋犲(),犲狓狋狉犪犮狋狑犻狋犺狌犾狋犲狉狊狅狀犻犮犿犪犮犺犻狀犲犳狅狉犿犻狀,犪狀犱狋犺犲狀犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀,狋狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅犪狀狅狋犺犲狉犮犾犲犪狀狋狌犫犲犪狀犱狉犲狆犲犪狋狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狆狉狅犮犲犱狌狉犲犪犵犪犻狀犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲狀狋犻狉犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狊,犱狉狔狅狏犲狉狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲(犪狀犺狔犱狉狅狌狊)()犪狀犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狋狅犱狉狔狀犲狊狊犪狋,犇犻狊狊狅犾狏犲狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犿犔狅犳狀犺犲狓犪狀犲(),犆犾犲犪狀狌狆狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅

28、犮犾犲犪狀狌狆狊狋犲狆犞犲犵犲狋犪犫犾犲狊犪狀犱犳狉狌犻狋狊:狑犲犻犵犺犵狅犳狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犻狀狋狅犪犿犔狊狋狅狆狆犲狉犲犱狆犾犪狊狋犻犮犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲,犪犱犱犿犔犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲,犲狓狋狉犪犮狋狑犻狋犺狌犾狋犲狉狊狅狀犻犮犿犪犮犺犻狀犲犳狅狉犿犻狀,犪狀犱狋犺犲狀犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀,狋狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅犪狀狅狋犺犲狉犮犾犲犪狀狋狌犫犲犪狀犱狉犲狆犲犪狋狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狆狉狅犮犲犱狌狉犲犪犵犪犻狀犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲狀狋犻狉犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狊,犱狉狔狅狏犲狉狊狅犱犻狌犿

29、狊狌犾犳犪狋犲(犪狀犺狔犱狉狅狌狊)犪狀犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狋狅犱狉狔狀犲狊狊犪狋,犱犻狊狊狅犾狏犲狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犿犔狅犳狀犺犲狓犪狀犲,犮犾犲犪狀狌狆狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅犮犾犲犪狀狌狆狊狋犲狆犑狌犻犮犲,犺狅狀犲狔犪狀犱狑犻狀犲:狑犲犻犵犺犵狅犳狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊犻狀狋狅犪犿犔犮狅狀犻犮犪犾犳犾犪狊犽狑犻狋犺狊狋狅狆狆犲狉,犪犱犱犿犔狊犪狋狌狉犪狋犲犱狊狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀,犿犔犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲,犲狓狋狉犪犮狋狑犻狋犺狌犾狋犲狉狊狅狀犻犮犿犪犮犺犻狀犲犳狅狉犿犻狀,犪狀犱狋犺犲狀犮犲狀狋狉

30、犻犳狌犵犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀,狋狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅犪狀狅狋犺犲狉犮犾犲犪狀狋狌犫犲犪狀犱狉犲狆犲犪狋狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狆狉狅犮犲犱狌狉犲犪犵犪犻狀犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲狀狋犻狉犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狊,犱狉狔狅狏犲狉狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲(犪狀犺狔犱狉狅狌狊)犪狀犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狋狅犱狉狔狀犲狊狊犪狋,犱犻狊狊狅犾狏犲狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犿犔狅犳狀犺犲狓犪狀犲,犮犾犲犪狀狌狆狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅犮犾犲犪狀狌狆狊狋犲狆犕犲犪狋犪狀犱犿犲犪狋狆狉狅犱狌犮狋狊:狑犲犻犵犺犵狅犳狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狋犲狊狋狊犪犿

31、狆犾犲狊犻狀狋狅犪犿犔狊狋狅狆狆犲狉犲犱狆犾犪狊狋犻犮犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲,犪犱犱犿犔狊犪狋狌狉犪狋犲犱狊狅犱犻狌犿犫犻犮犪狉犫狅狀犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀,犿犔犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲犪狀犱犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲狋犺犲狊犪犿狆犾犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉狊,犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀,狋狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅犪狀狅狋犺犲狉犮犾犲犪狀狋狌犫犲犪狀犱狉犲狆犲犪狋狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狆狉狅犮犲犱狌狉犲犪犵犪犻狀犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲狀狋犻狉犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狊,犱狉狔狅狏犲狉狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲(犪狀犺狔犱狉狅狌狊)犪狀犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪

32、狋犲狋狅犱狉狔狀犲狊狊犪狋,犱犻狊狊狅犾狏犲狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犿犔狅犳犮狔犮犾狅犺犲狓犪狀犲犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲(),犮犾犲犪狀狌狆狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅犮犾犲犪狀狌狆狊狋犲狆犪狀犱犛犖犜犆犾犲犪狀狌狆犌犲犾狆犲狉犿犲犪狋犻狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀狅犫狋犪犻狀犲犱犳狉狅犿狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狋犲狆犃狆狆犾狔犿犔狅犳狋犺犲狉犲狊狌犾狋犻狀犵狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅犪犮狅犾狌犿狀犳狅狉犵犲犾狆犲狉犿犲犪狋犻狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犪狀犱狆犲狉犳狅狉犿犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犳狅犾犾狅狑犮狅狀

33、犱犻狋犻狅狀狊:犪)犆犾犲犪狀狌狆犮狅犾狌犿狀:犅犻狅犅犲犪犱狊犛犡犮狅犾狌犿狀,犿犿(犻犱)犿犿;犫)犕狅犫犻犾犲狆犺犪狊犲:犆狔犮犾狅犺犲狓犪狀犲犲狋犺狔犾犪犮犲狋犪狋犲(,犞犞);犮)犉犾狅狑狉犪狋犲:犿犔犿犻狀犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲犳犳犾狌犲狀狋犪狋狋犺犲狋犻犿犲狅犳犿犻狀犿犻狀犪狀犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狋狅犱狉狔狀犲狊狊犪狋,犱犻狊狊狅犾狏犲狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狀犿犔狀犺犲狓犪狀犲犪狀犱犳狅犾犾狅狑犲犱犫狔犛犘犈犮犾犲犪狀狌狆犖狅狋犲:犐犳狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犲犱犳犪狋犮狅狀狋犲狀狋狅犳犪犵狊犪犿狆犾犲狋狅犫犲犪狆狆犾犻犲犱狋狅狋犺犲犮狅犾狌犿狀犲狓犮犲犲犱狊犵,犪犱犼狌狊狋狋犺

34、犲狏狅犾狌犿犲狅犳狋犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀狋狅犫犲犪狆狆犾犻犲犱狋狅狋犺犲犮狅犾狌犿狀狊狅狋犺犪狋犻狋犻狀犮犾狌犱犲狊犵狅犳犳犪狋犛狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犮狅犾狌犿狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犆狅狀犱犻狋犻狅狀犪犖犎犛犘犈犮狅犾狌犿狀狑犻狋犺犿犔狀犺犲狓犪狀犲,犪狆狆犾狔狋犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀狋狅狋犺犲犮狅犾狌犿狀犪狀犱犲犾狌狋犲狋犺犲犮狅犾狌犿狀狑犻狋犺犿犔狀犺犲狓犪狀犲,犱犻狊犮犪狉犱狋犺犲犲犳犳犾狌犲狀狋犈犾狌狋犲狋犺犲犮狅犾狌犿狀狑犻狋犺犿犔犪犮犲狋狅狀犲狀犺犲狓犪狀犲()犆狅犾犾犲犮狋狋犺犲犲狀狋犻狉犲狏狅犾狌犿狀犲狅犲犳犳犾狌犲狀狋犪狀犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狋狅犱

35、狉狔狀犲狊狊犪狋狌狀犱犲狉犪狊狋狉犲犪狀狅犳狀犻狋狉狅犵犲狀犪狀犱狉犲犱犻狊狊狅犾狏犲犻狀犿犔狅犳犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狑犪狋犲狉(),犳犻犾狋犲狉犲犱狅狀犪犿狀狔犾狅狀狊狆狉犻狀犵犲犳犻犾狋犲狉犳狅狉犎犘犔犆犪狀犪犾狔狊犻狊犉狅狉犔犆犕犛犕犛犪狀犪犾狔狊犻狊,狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狊狉犲犱犻狊狊狅犾狏犲犱犻狀犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀犪狀犱犳犻犾狋犲狉犲犱狅狀犪犿狀狔犾狅狀狊狆狉犻狀犵犲犳犻犾狋犲狉犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犫狔犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔犿犲狋犺狅犱犎犘犔犆狅狆犲狉犪狋犻狅狀犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊犪)犆狅犾狌犿狀:犠犪狋犲狉狊犛狔犿犿犲狋狉狔犆

36、犮狅犾狌犿狀,犿犿(犻犱)犿犿,犿狅狉犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋犮狅犾狌犿狀狊;犫)犕狅犫犻犾犲狆犺犪狊犲:狑犪狋犲狉犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲(,犞犞);犮)犉犾狅狑狉犪狋犲:犿犔犿犻狀;犱)犇犲狋犲犮狋狅狉狑犪狏犲犾犲狀犵狋犺:狀犿;犲)犐狀犼犲犮狋犻狅狀狏狅犾狌犿犲:犔犛犖犜犎犘犔犆犱犲狋犲犮狋犻狅狀犘狉犲狆犪狉犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狊犮狅狀狋犪犻狀犻狀犵狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀犪狋犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犪狀犪犾狔狋犲犻狀狊犪犿狆犾犲犲狓狋狉犪犮狋狊犜犺犲狉犲狊狆狅狀狊犲狊狅犳狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狊犪狀犱狊犪犿狆犾犲狊狅

37、犾狌狋犻狅狀狊狊犺狅狌犾犱犫犲狑犻狋犺犻狀狋犺犲犾犻狀犲犪狉狉犪狀犵犲犜犺犲狉犲犳犲狉犲狀犮犲犱狉犲狋犲狀狋犻狅狀狋犻犿犲狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀犻狊犿犻狀犉犻犵狌狉犲犃犻狀犪狀狀犲狓犃犻狊狋犺犲犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪犿狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犫狔犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔犔犆狅狆犲狉犪狋犻狅狀犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊犪)犆狅犾狌犿狀:犃犮狇狌犻狋狔犝犘犔犆犅犈犎犆犮狅犾狌犿狀,犿犿(犻犱)犿犿,犿,狅狉犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋;犫)犆狅犾狌犿狀狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲:;犮)犕狅犫犻犾犲

38、狆犺犪狊犲:犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狑犪狋犲狉(,犞犞);犱)犉犾狅狑狉犪狋犲:犔犿犻狀;犲)犐狀犼犲犮狋犻狅狀狏狅犾狌犿犲:犔犕犛狅狆犲狉犪狋犻狅狀犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊犪)犐狅狀狊狅狌狉犮犲:犈犛犐,狆狅狊犻狋犻狏犲犻狅狀犻狊犪狋犻狅狀犿狅犱犲;犫)犛犮犪狀犿狅犱犲:犿狌犾狋犻狆犾犲狉犲犪犮狋犻狅狀犿狅狀犻狋狅狉犻狀犵(犕犚犕)犿狅犱犲犗狋犺犲狉狉犲犳犲狉犲狀犮犲犿犪狊狊狅狆犲狉犪狋犻狀犵犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊犪狉犲犾犻狊狋犲犱犻狀犜犪犾犫犲犅犻狀犃狀狀犲狓犅犔犆犕犛犱犲狋犲犮狋犻狅狀犘狉犲狆犪狉犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狊犮狅狀狋犪犻狀犻狀犵狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀犪狋犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犪狀犪犾狔狋犲犻狀狊犪犿狆犾犲犲狓狋狉犪犮狋狊犜犺犲狉犲犳犲狉犲狀犮犲犱狉犲狋犲狀狋犻狅狀狋犻犿犲狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀犻狊犿犻狀犃狀狀犲狓犆犻狊狋犺犲狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱犻狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪犿狅犳狇狌犻狀狅狓狔犳犲狀狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀犆狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀狋犲狊狋犜犺犲狇狌犪犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犻狅狀狊狅犳狋犺犲犪狀犪犾狔狋犲犿狌狊狋犫犲犳狅狌狀犱,犪狀犱犪狋犾犲犪狊狋犻狀犮犾狌犱犲狅狀犲狆狉犲犮狌狉狊狅狉犻狅狀犪狀犱狋狑狅犱犪狌犵犺狋犲狉

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