SN T 2538-2010 进出口动物源性食品中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶核二甲氧甲基苄胺嘧啶残留量的检测方法 液相色谱-质谱 质谱法.pdf

1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口动物源性食品中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶残留量的检测方法液相色谱质谱质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犔犆犕犛犕犛犿犲狋犺狅犱发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前言本标准的附录、附录、附录和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、重庆出入境检验检疫局。本标准主要起草人：李贤

2、良、丁涛、张晓燕、王国民、张雷、章宇、张婧、曹淑瑞。犛犖犜进出口动物源性食品中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶和二甲氧甲基苄氨嘧啶残留量的检测方法液相色谱质谱质谱法范围本标准规定了动物源性食品中二甲氧苄氨嘧啶（简称：）、三甲氧苄氨嘧啶（简称：）、二甲氧甲基苄氨嘧啶（简称：）三种磺胺类增效剂残留量的制样和液相色谱质谱质谱检测方法。本标准适用于肌肉（猪肉、鸡肉）、内脏（猪肝、牛肾、鸡肝）、牛脂肪、鸡蛋、鱼肉、牛奶及蜂产品（蜂蜜和王浆）中二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶三种磺胺增效剂残留量的测定和确证。方法提要试样中的磺胺增效剂用三乙胺乙腈混合提取液或三氯乙酸乙腈溶液提取，提取液经反

3、相阳离子混合固相萃取柱净化、浓缩和脱脂后，用液相色谱串联质谱仪测定和确证，外标法峰面积定量。试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。三氯乙酸。浓氨水（）。三乙胺。乙腈：色谱纯。甲醇：色谱纯。正己烷：色谱纯。甲酸：色谱纯。甲酸铵：优级纯。无水硫酸钠：灼烧，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。乙腈饱和的正己烷：正己烷中加入乙腈饱和。甲酸溶液：取甲酸，用水稀释至。氨水甲醇溶液：取浓氨水，用甲醇稀释至。乙腈水溶液：取水，用乙腈稀释至。三氯乙酸溶液：称取三氯乙酸，用水稀释至。三乙胺乙腈混合提取液：取适量三乙胺和乙腈，按（体积比）混合备用。三氯乙酸乙腈混合提取液：移取适量三氯乙酸溶

4、液（）和乙腈按（体积比）混合备用。二甲氧苄氨嘧啶（，号：，分子式：）标准品：纯度大于或等于。三甲氧苄氨嘧啶（，号：，分子式：）标准品：纯度大于或等于。犛犖犜二甲氧甲基苄氨嘧啶（，号：，分子式：）标准品：纯度大于或等于。空白样品提取液：用不含三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶残留的样品，按照、制备空白样品提取液。标准储备液：准确称取适量三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶标准品，分别用乙腈配制成浓度为的标准储备液。此溶液在避光保存。标准工作溶液：除蜂王浆、蜂蜜和牛奶样品标准溶液用流动相起始比例溶液配制以外，其余样品根据需要用空白样品提取液将标准储备液稀释成适当浓度的

5、标准工作溶液。置于避光保存。阳离子固相萃取柱：，或相当者；使用前用水和甲醇活化。微孔滤膜，有机系。仪器和设备高效液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源（）。组织捣碎机。天平：感量为和。均质器：。离心机：。氮吹仪。具塞塑料离心管：。试样制备与保存试样制备牛奶取代表性样品，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的容器内，密闭并标明标记。肌肉、内脏和鱼等试样取代表性样品，将其切碎后，依次用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，分装入洁净的盛样袋内，密封并标明标记。蛋取有代表性样品约，搅拌均匀后装入洁净容器内，密封并做好标识。蜂产品取有代表性样品量，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀；对王浆样品将其搅拌均匀。制备好的试

6、样均分成两份，分别装入样品瓶中，密封，并标明标记。试样的保存王浆、肌肉、内脏和鱼等试样于冷冻保存；奶和蛋试样于保存；蜂蜜试样于常温下避光保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤提取肌肉、内脏和鱼等试样准确称取均匀试样（精确到）于干净塑料离心管中，加入无水硫酸钠（），混匀后加入三乙胺乙腈混合提取液（），用均质器均质，离心，将有机相转移至容量瓶中，残渣再用提取液（）均质提取。离心合并有机相，用提取液（）定容至，混匀后待净化。犛犖犜牛奶、蜂蜜、王浆等试样准确称取均匀试样（精确至）于干净塑料离心管中，牛奶和蜂蜜加入三氯乙酸乙腈混合提取液（），蜂王浆加入三氯乙酸提取液

7、（），涡旋振荡，超声，离心，过滤纸后待净化。净化肌肉、内脏和鱼等试样移取待净化溶液（），于下浓缩至干。加入乙腈水溶液（）溶解残渣，加入正己烷旋涡混匀后，离心，将下层过滤膜后，供液相色谱串联质谱仪测定。牛奶、蜂蜜和王浆试样将待净化溶液（）移入固相萃取柱（），水和甲醇淋洗，氨水甲醇（）洗脱，于下浓缩至干。加入乙腈水溶液（）溶解残渣，过滤膜后，供液相色谱串联质谱仪测定。测定液相色谱串联质谱条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者；）柱温：；）流动相：甲醇甲酸，梯度洗脱程序参见附录中表；）流速：；）进样量：；）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：正离子；）检测方式：多反应监测（）；）串联质谱参考条件均优化至

8、最佳灵敏度：参见附录。定性、定量按照液相色谱串联质谱条件测定样液和标准工作溶液，外标标准曲线法测定样液中的磺胺增效剂残留量。样品中待测物残留量应在标准曲线范围之内，如果残留量超出标准曲线范围，应用空白样品提取液进行适当稀释。在上述色谱条件下，二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶的质量色谱峰保留时间约为、。标准品的多反应监测色谱图参见附录。在相同实验条件下，样品与标准工作液中待测物质的色谱峰保留时间偏差在以内，并且在扣除背景后的样品质量色谱图中，所选择的离子对均出现，同时与标准品的相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表液相色谱串联质谱定性时相对离子丰

9、度最大允许偏差相对离子丰度允许的相对偏差空白试验空白样品，按上述测定步骤进行。结果计算和表述用数据处理软件中的外标法，或绘制标准曲线，按式（）计算样品中磺胺增效剂残留量。犡犻（犮犻犮犻，）犞犿（）犛犖犜式中：犡犻试样中磺胺增效剂的残留量，单位为微克每千克（）；犮犻由标准曲线得到的样液中磺胺增效剂的浓度，单位为纳克每毫升（）；犮犻，由标准曲线而得的空白实验中的磺胺增效剂的浓度，单位为纳克每毫升（）；犞样液最终定容体积，单位为毫升（）；犿最终样液所代表的试样质量，单位为克（）。测定低限本方法检测低限均为，回收率参见附录。犛犖犜附录犃（资料性附录）流动相梯度洗脱程序表犃流动相梯度洗脱程序时间甲醇甲酸

10、犛犖犜附录犅（资料性附录）串联质谱参考条件）串联质谱参考条件：）毛细管电压：；）离子源温度：；）脱溶剂气温度：；）锥孔气流量（氮气）：；）脱溶剂气流量（氮气）：；）碰撞气流量（氩气）：；）碰撞室压力（氩气）：（）；）定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、驻留时间见表。表犅待测物定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、驻留时间化合物母离子（）子离子（）锥孔电压碰撞能量驻留时间二甲氧苄氨嘧啶三甲氧苄氨嘧啶二甲氧甲基苄氨嘧啶离子为定量离子。）非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪

11、器。犛犖犜附录犆（资料性附录）二甲氧苄氨嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、二甲氧甲基苄氨嘧啶的多反应监测（犕犚犕）离子色谱图）图犆二甲氧苄氨嘧啶标准溶液的多反应监测离子色谱图）图犆三甲氧苄氨嘧啶标准溶液的多反应监测离子色谱图犛犖犜）图犆（续）图犆二甲氧甲基苄氨嘧啶标准溶液的多反应监测离子色谱图犛犖犜书书书附录犇（资料性附录）不同基质回收率表犇不同基质回收率基质化合物添加水平（）回收率添加水平（）回收率添加水平（）回收率添加水平（）回收率猪肉猪肝牛肾牛脂肪鸡肉鸡肝犛犖犜书书书表犇（续）基质化合物添加水平（）回收率添加水平（）回收率添加水平（）回收率添加水平（）回收率鸡蛋鱼肉牛奶蜂蜜王浆犛犖犜犉狅狉犲狑狅狉犱

12、犃狀狀犲狓犃、犃狀狀犲狓犅，犃狀狀犲狓犆犪狀犱犃狀狀犲狓犇狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲犪狀狀犲狓犲狊犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犼狌狉犻狊犱犻犮狋犻狅狀狅犳狋犺犲犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犃犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犫狔犑犻犪狀犵狊狌犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌，犪狀犱犮犺狅狀犵狇犻狀犵犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌犕犪

13、犻狀犱狉犪犳狋犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狉犲：犔犻犡犻犪狀犾犻犪狀犵，犇犻狀犵犜犪狅，犣犺犪狀犵犡犻犪狅狔犪狀，犠犪狀犵犌狌狅犿犻狀犵，犣犺犪狀犵犔犲犻，犣犺犪狀犵犢狌，犣犺犪狀犵犑犻狀，犆犪狅犛犺狌狉狌犻犛犖犜犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犳狅狅犱狊狋狌犳犳狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犔犆犕犛犕犛犿犲狋犺狅犱犛犮狅狆犲犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲，犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱犮狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻

14、犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狉犲狊犻犱狌犲狊犫狔犔犆犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔（犔犆犕犛犕犛）犻狀犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵狀犳狅狅犱狊犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱犮狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犿犲犪狋（狆狅狉犽犪狀犱犮犺犻犮犽犲狀），狏犻狊犮犲狉犪（狆犻犵犾犻狏犲狉，犮犪狋狋犾犲犽犻犱犻狀犲狔犪狀犱犮犺犻犮犽犲狀犾犻狏犲狉），犮犪狋狋犾犲犳犪狋，犲犵犵，犳犻狊犺狋犻狊狊狌犲，犿犻犾犽犪狀犱犫犲犲狆狉狅犱狌犮狋（犺狅狀犲狔，狉狅狔

15、犪犾犼犲犾犾狔）犘狉犻狀犮犻狆犾犲犛狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狉犲狊犻犱狌犲狊狑犪狊犲狓狋狉犪犮狋犲犱狑犻狋犺狋狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀狅狉狋狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犪犮犻犱，犳狅犾犾狅狑犲犱犮犾犲犪狀狌狆犫狔犿犻狓犲犱狉犲狏犲狉狊犲犱狆犺犪狊犲犪狀犱犮犪狋犻狅狀狊狅犾犻犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犮狅犾狌犿狀犃犳狋犲狉犫犲犻狀犵犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱犪狀犱狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱，狋犺犲犪犾犻狇狌狅狋犻狊犱犲狋犲狉犿犻狀犲犱犪狀犱犮狅狀犳犻狉犿犲犱犫狔犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅

16、犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔（犔犆犕犛犕犛）狌狊犻狀犵犲狓狋犲狉狀犪犾狊狋犪狀犱犪狉犱犿犲狋犺狅犱犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱，犪犾犾狋犺犲狉犲犪犵犲狀狋狊狌狊犲犱狊犺狅狌犾犱犫犲犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犵狉犪犱犲“犠犪狋犲狉”犻狊狉犲犱犻狊狋犻犾犾犲犱狑犪狋犲狉犜狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱犃犿犿狅狀犻犪：（）犜狉犻犲狋犺狔犾犪犿犻狀犲犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲：犎犘犔犆犌狉犪犱犲犕犲狋犺犪狀狅犾：犎犘犔犆犌狉犪犱犲犛犖犜狀犺犲狓犪狀犲：犎犘犔犆犌狉犪犱犲犉狅狉犿犻犮犪犮犻犱：犎犘犔犆犵狉犪犱犲犃犿犿狅

17、狀犻狌犿犳狅狉犿犻犪狋犲：犌犚狅狉狋犺犲犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋犃狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲：犇狉犻犲犱犪狋犳狅狉犺，犮狅狅犾狋狅狉狅狅犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲犻狀犪犱犲狊犻犮犮犪狋狅狉犪狀犱狊狋狅狉犲犻狀狊犲犪犾犲犱犮狅狀狋犪犻狀犲狉犃犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狊犪狋狌狉犪狋犲犱狀犺犲狓犪狀犲：狀犺犲狓犪狀犲狊犪狋狌狉犪狋犲犱犫狔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀：犇犻犾狌狋犲犱犿犔犳狅狉犿犻犮犪犮犻犱狑犻狋犺狑犪狋犲狉狋狅狋犺犲狏狅犾狌犿犲狅犳犿犔犪犿犿狅狀犻犪犿犲狋犺犪狀狅犾狊狅犾狌狋犻狅狀：犇犻犾狌狋犲犱犿犔犪犿犿狅狀犻犪狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾狋狅狋

18、犺犲狏狅犾狌犿犲狅犳犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀：犇犻犾狌狋犲犱犿犔犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉狋狅狋犺犲狏狅犾狌犿犲狅犳犿犔犜狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀（犠犞）：犇犻犾狌狋犲犱犵狋狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱狑犻狋犺狑犪狋犲狉狋狅狋犺犲狏狅犾狌犿犲狅犳犿犔犜狉犻犲狋犺狔犾犪犿犻狀犲犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲（犞犞）犿犻狓犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀：犿犻狓犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲狋狉犻犲狋犺狔犾犪犿犻狀犲犪狀犱犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狋狅犵犲狋犺犲狉犜狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾

19、犲（犞犞）犿犻狓犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀：犕犻狓犪狆狆狉狅狆狉犻犪狋犲狋狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀犪狀犱犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狋狅犵犲狋犺犲狉犇犻犪狏犲狉犻犱犻狀犲，（犆犎犖犗，犆犃犛犖狅：）：犘狌狉犻狋狔犜狉犻犿犲狋犺狅狆狉犻犿，（犆犎犖犗，犆犃犛犖狅：）：犘狌狉犻狋狔犗狉犿犲狋狅狆狉犻犿，（犆犎犖犗，犆犃犛犖狅：）：犘狌狉犻狋狔犅犾犪狀犽犿犪狋狉犻狓犲狓狋狉犪犮狋狊狅犾狌狋犻狅狀：犈狓狋狉犪犮狋狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊狑犺犻犮犺狋犺犲狉犲犪狉犲狀狅犱犻犪狏犲狉犻犱犻狀犲，狋狉犻犿犲狋犺狅狆狉犻犿，狅狉犿犲狋狅狆狉犻犿狉犲狊犻犱狌犲狊犪犮犮狅狉犱犻

20、狀犵狋狅狋犺犲犪狀犱狋狅狆狉犲狆犪狉犲狋犺犲犫犾犪狀犽犿犪狋狉犻狓犲狓狋狉犪犮狋狊狅犾狌狋犻狅狀犛狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀：犃犮犮狌狉犪狋犲犾狔狑犲犻犵犺狋犪狀犪犱犲狇狌犪狋犲犪犿狅狌狀狋狅犳狊狋犪狀犱犪狉犱狊；犱犻狊狊狅犾狏犲犻狀犪狊犿犪犾犾狏狅犾狌犿犲狅犳犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲犇犻犾狌狋犲狑犻狋犺犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狋狅犳狅狉犿犪狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犵犿犔犻狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀（犅犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑）犛狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀：犕犻狓犪狀犱犱犻犾狌狋犲狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狋狅犮犽狊狅犾狌狋犻狅狀狉犲狊狆犲

21、犮狋犻狏犲犾狔狑犻狋犺犿犲狋犺犪狀狅犾狋狅狋犺犲狉犲狇狌犻狉犲犱犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犪狊狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀（犅犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑）犛犖犜犛犘犈犮狅犾狌犿狀（犿犻狓犻狀犵狉犲狏犲狉狊犲犱犪狀犱犮犪狋犻狅狀狊狅犻犾犱狆犺犪狊犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犮狅犾狌犿狀）：犘犆犡，犿犵，犿犔，狅狉犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋；犪犮狋犻狏犪狋犲犱狑犻狋犺犿犔狑犪狋犲狉犪狀犱犿犔犿犲狋犺犪狀狅犾犫犲犳狅狉犲狌狊犲犕犲犿犫狉犪狀犲犳犻犾狋犲狉：犿，狅狉犵犪狀犻犮犃狆狆犪狉犪狋狌狊犪狀犱犲狇狌犻狆犿犲狀狋犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿狅狋狅犵狉犪狆犺犿狊狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔（犔犆

22、犕犛犕犛）犲狇狌犻狆狆犲犱狑犻狋犺犈犾犲犮狋狉狅狊狆狉犪狔犻狅狀犻狕犪狋犻狅狀犜犻狊狊狌犲狋狉犻狋狌狉犪狋狅狉犅犪犾犪狀犮犲，狊犲狀狊犻狋犻狏犻狋狔：犿犵犪狀犱犵犎狅犿狅犵犲狀犻狕犲：狉犿犻狀犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲：狉犿犻狀犖犻狋狉狅犵犲狀犲狏犪狆狅狉犪狋狅狉犘犾犪狊狋犻犮犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲狑犻狋犺犮犪狆：犿犔犛犪犿狆犾犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲犘狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犕犻犾犽犃犫狅狌狋犵狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊狊犺狅狌犾犱犫犲狋犪犽犲狀犳狉狅犿犪犾犾狊犪犿狆犾犲狊犜犺犲狀犱犻狏犻犱犲狋犺犲犿犻犾犽狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅狋狑狅犲狇

23、狌犪犾狆狅狉狋犻狅狀狊犈犪犮犺狆狅狉狋犻狅狀犻狊狆狌狋犻狀犪犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犃狀犻犿犪犾狋犻狊狊狌犲，狏犻狊犮犲狉犪犪狀犱犪狇狌犪狋犻犮狆狉狅犱狌犮狋（犳犻狊犺狋犻狊狊狌犲）犃犫狅狌狋犵狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊狊犺狅狌犾犱犫犲狋犪犽犲狀犳狉狅犿犪犾犾狊犪犿狆犾犲狊，犪狀犱犮狌狋犻狀狋狅犿犻狀犮犲犪狀犱犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犱犫狔犪犺犻犵犺狊狆犲犲犱狋犻狊狊狌犲狋狉犻狋狌狉犪狋狅狉犜犺犲狀犿犻狓犲犱狋狅狆狉狅犱狌犮犲犺狅犿狅犵犲狀狅狌狊狊犪犿狆犾犲狊，犪狀犱狆狌狋犻狀犪犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱

24、犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犈犵犵犃犫狅狌狋犵狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊狊犺狅狌犾犱犫犲狋犪犽犲狀犳狉狅犿犪犾犾狊犪犿狆犾犲狊，狋犺犲狀犿犻狓犲犱狋狅狆狉狅犱狌犮犲犺狅犿狅犵犲狀狅狌狊狊犪犿狆犾犲狊，犪狀犱狆狌狋犻狀犪犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犛犖犜犅犲犲狆狉狅犱狌犮狋狊（犺狅狀犲狔犪狀犱狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔）犃犫狅狌狋犵狉犲狆狉犲狊犲狀狋犪狋犻狏犲狊犪犿狆犾犲狊狊犺狅狌犾犱犫犲狋犪犽犲狀犳狉狅犿犪犾犾狊犪犿狆犾犲狊，狊狋犻狉狉犲犱狌狀犻犳狅狉犿犾狔犜犺犲狀犱犻狏犻犱犲狋犺犲犿犻犾犽狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆狅狉狋犻狅狀狊犈犪

25、犮犺狆狅狉狋犻狅狀犻狊狆狌狋犻狀犪犮犾犲犪狀犮狅狀狋犪犻狀犲狉狑犺犻犮犺犻狊狊犲犪犾犲犱犪狀犱犾犪犫犲犾犲犱犛狋狅狉犪犵犲狅犳狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊狅犳犿犻犽犪狀犱犲犵犵狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊狅犳狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔，犪狀犻犿犪犾狋犻狊狊狌犲，狋犺犲狏犻狊犮犲狉犪犪狀犱犪狇狌犪狋犻犮狆狉狅犱狌犮狋（犳犻狊犺狋犻狊狊狌犲）狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犫犲犾狅狑犜犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊狅犳犺狅狀犲狔狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱犻狀狉狅狅犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲犐狀狋犺犲犮狅狌狉狊犲狅犳狊犪犿狆犾犻狀犵犪狀犱狊犪犿狆犾犲狆狉犲

26、狆犪狉犪狋犻狅狀，狆狉犲犮犪狌狋犻狅狀犿狌狊狋犫犲狋犪犽犲狀狋狅犪狏狅犻犱犮狅狀狋犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅狉犪狀狔犳犪犮狋狅狉狊狑犺犻犮犺犿犪狔犮犪狌狊犲狋犺犲犮犺犪狀犵犲狅犳狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋犘狉狅犮犲犱狌狉犲犈狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪狀犻犿犪犾狋犻狊狊狌犲，狏犻狊犮犲狉犪犪狀犱犪狇狌犪狋犻犮狆狉狅犱狌犮狋（犳犻狊犺狋犻狊狊狌犲）犠犲犻犵犺犵（犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅犵）狅犳狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅犿犔犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲狊，犪犱犱犵犃狀犺狔犱狉狅狌狊狊狅犱犻狌犿狊狌犾犳犪狋犲（），狊狋犻狉狉犲犱狌狀犻犳狅狉犿犾狔，狋犺犲狀犪犱犱犿犔犜狉犻犲狋犺狔犾犪犿犻狀犲犪犮犲狋狅狀犻狋

27、狉犻犾犲（犞犞）犿犻狓犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀（），犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲（狉犿犻狀）犳狅狉犿犻狀犃犳狋犲狉犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犱犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀，狋狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅犪犿犔狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽犜犺犲狉犲狊犻犱狌犲狑犪狊犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犱犪狀犱犲狓狋狉犪犮狋犲犱狑犻狋犺犿犔犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀犃犳狋犲狉犮犲狀狋狉犻犳狌犵犻狀犵，犮狅犿犫犻狀犲狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狋狅狋犺犲狏狅犾狌犿犲狋狉犻犮犳犾犪狊犽，犿犻狓犲犱狊狌犳犳犻犮犻犲狀狋犾狔犪狀犱犱犻犾狌狋犲狋狅犿犪狉犽狑犻狋犺狑犪狋犲狉犜犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀犻狊狉

28、犲犪犱狔犳狅狉狆狌狉犻犳犻犮犪狋犻狅狀犕犻犾犽，犺狅狀犲狔犪狀犱狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犠犲犻犵犺犵（犪犮犮狌狉犪狋犲狋狅犵）狅犳狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅犿犔犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲狋狌犫犲狊，犳狅狉犿犻犾犽犪狀犱犺狅狀犲狔犪犱犱犿犔犜狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲（犞犞）犿犻狓犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀（），犳狅狉狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犪犱犱犿犔犜狉犻犮犺犾狅狉狅犪犮犲狋犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀（），犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犳狅狉犿犻狀犃犳狋犲狉犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犱犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀，狋狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋

29、狋犺狉狅狌犵犺犳犻犾狋犲狉狆犪狆犲狉犜犺犲狊狌狆犲狉狀犪狋犪狀狋狑犪狊狉犲犪犱狔犳狅狉犛犘犈犮犾犲犪狀狌狆犛犘犈犆犾犲犪狀狌狆犃狀犻犿犪犾狋犻狊狊狌犲，狏犻狊犮犲狉犪犪狀犱犪狇狌犪狋犻犮狆狉狅犱狌犮狋（犳犻狊犺狋犻狊狊狌犲）犜狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋狊狅犾狌狋犻狅狀（）犿犔犪狀犱犲狏犪狆狅狉犪狋犲狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀狋狅犱狉狔狀犲狊狊狅狀犖犈狏犪狆犫犲犾狅狑犜犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狊犱犻狊狊狅犾狏犲犱狑犻狋犺犿犔狅犳犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀（）犪狀犱犿犔狀犺犲狓犪狀犲（）犞狅狉狋犲狓犿犻狀犪狀犱犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犪狋狉犿犻狀犳狅狉犿犻狀犉犻犾狋犲

30、狉狋犺犲狀犲狋犺犲狉犾犪狔犲狉犛犖犜狋犺狉狅狌犵犺犪犿犿犲犿犫狉犪狀犲犻狀狋狅犎犘犔犆狏犻犪犾狊犜犺犲狊狅犾狌狋犻狅狀犻狊狉犲犪犱狔犳狅狉犔犆犕犛犕犛犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犕犻犾犽，犺狅狀犲狔犪狀犱狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犜狉犪狀狊犳犲狉狋犺犲犲狓狋狉犪犮狋狊狅犾狌狋犻狅狀（）犿犔狋狅犛犘犈犮狅犾狌犿狀（），犪狀犱狑犪狊犺狑犻狋犺犿犔狑犪狋犲狉犪狀犱犿犔犿犲狋犺犪狀狅犾，狏犪犮狌犪狋犻狅狀犈犾狌狋犲犱犫狔犿犔犪犿犿狅狀犻犪犿犲狋犺犪狀狅犾狊狅犾狌狋犻狅狀（），犲狏犪狆狅狉犪狋犲狋犺犲犲犾狌狋犻狅狀狊狅犾狌狋犻狅狀狋狅犱狉狔狀犲狊狊狅狀犖犈狏犪狆犫犲犾狅狑犜犺犲狀，犱犲犪犾狑犻狋犺狋犺犲狊犪犿狆

31、犾犲犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲狊狋犲狆狅犳“犜犺犲狉犲狊犻犱狌犲犻狊犱犻狊狊狅犾狏犲犱狑犻狋犺犿犔狅犳犪犮犲狋狅狀犻狋狉犻犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀”犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犔犆犕犛犕犛狅狆犲狉犪狋犻狅狀犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊犪）犆狅犾狌犿狀：犃犮狇狌犻狋狔犝犘犔犆犜犕犅犈犎犆犮狅犾狌犿狀（犻犱）犿犿，犿狅狉犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋；犫）犆狅犾狌犿狀狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲：；犮）犕狅犫犻犾犲狆犺犪狊犲：犿犲狋犺犪狀狅犾犉狅狉犿犻犮犪犮犻犱狊狅犾狌狋犻狅狀，狋犺犲犲犾狌狋犻狅狀犵狉犪犱犻犲狀狋犻狊犾犻狊狋犲犱犻狀犪狀狀犲狓犃犱）犉犾狅狑狉犪狋犲：犿犔犿犻狀；犲）犐狀犼犲犮狋狅狉狏狅犾狌犿犲：犔；犳）犐狅

32、狀狊狅狌狉犮犲：犈犛犐；犵）犛犮犪狀狀犻狀犵犿狅犱犲犾：狆狅狊犻狋犻狏犲犻狅狀；犺）犕狅狀犻狋狅狉犻狀犵犿狅犱犲犾：犿狌犾狋犻狆犾犲狉犲犪犮狋犻狅狀犿狅狀犻狋狅狉犻狀犵（犕犚犕）；犻）犕犛犕犛狉犲犳犲狉犲狀犮犲犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊犾犻狊狋犲犱犻狀犪狀狀犲狓犅犔犆犕犛犕犛犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱犮狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀犃犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狋犺犲犿犲狋犺狅犱狅犳，犱犲狋犲犮狋狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲狊狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀犪狀犱狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀犜犺犲狉犲狊狆狅狀狊犲狅

33、犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狆狅狋犲狀狋犻犪狋狅狉狊犺狅狌犾犱犫犲犻狀狋犺犲犾犻狀犲犪狉狉犪狀犵犲狅犳狋犺犲犻狀狊狋狉狌犿犲狀狋犪犾犱犲狋犲犮狋犻狅狀犐犳狋犺犲狉犲狊狆狅狀狊犲犻狊狅狌狋狅犳狋犺犲犾犻狀犲犪狉狉犪狀犵犲，狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾犱犫犲犱犻犾狌狋犲犱狑犻狋犺狋犺犲犫犾犪狀犽犿犪狋狉犻狓犲狓狋狉犪犮狋狊狅犾狌狋犻狅狀（）狋狅狊狌犻狋犪犫犾犲犮狅狀犮犲狉狋狉犪狋犻狅狀犝狀犱犲狉狋犺犲犪犫狅狏犲犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊，狋犺犲狉犲犳犲狉犲狀犮犲狉犲狋犲狀狋犻狅狀狋犻犿犲狅犳犇犻犪狏犲狉犻犱犻狀犲，犜狉犻犿犲狋犺狅狆狉犻犿，犗狉犿犲狋狅狆狉犻犿犪狉犲犪犫狅狌狋犿犻

34、狀，犿犻狀，犿犻狀，狉犲狊狆犲犮狋犻狏犲犾狔犚犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱犻狅狀犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪犿狅犳狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀犻狊犾犻狊狋犲犱犻狀犪狀狀犲狓犆犝狀犱犲狉狋犺犲狊犪犿犲犮狅狀犱犻狋犻狅狀狊狅犳犲狓狆犲狉犻犿犲狀狋，狋犺犲狉犲狋犲狀狋犻狅狀狋犻犿犲狅犳狋犺犲狌狀犽狀狅狑狀狊犪犿狆犾犲犻狊狋犺犲狊犪犿犲犪狊狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀；狋犺犲狇狌犪犾犻犳犻犮犪狋犻狅狀犻狅狀狊犳狅狉犲狏犲狉狔犮狅犿狆狅狌狀犱犿狌狊狋犫犲犳狅狌狀犱犉狅狉狋犺犲狊犪犿犲犪狀犪犾狔狊犻狊犫犪狋犮犺犪狀犱狋犺犲狊犪犿犲犮狅犿狆狅狌狀犱，狋犺犲狏犪狉犻犪狋犻狅狀狉

35、犪狀犵犲狅犳狋犺犲犻狅狀狉犪狋犻狅犫犲狋狑犲犲狀狋犺犲狋狑狅犱犪狌犵犺狋犲狉犻狅狀狊犳狅狉狋犺犲狌狀犽狀狅狑狀狊犪犿狆犾犲犛犖犜犪狀犱狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狑狅狉犽犻狀犵狊狅犾狌狋犻狅狀犪狋狋犺犲狊犻犿犻犾犪狉犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犮犪狀狀狅狋犫犲狅狌狋狅犳狉犪狀犵犲狅犳犜犪犫犾犲犜犪犫犾犲犕犪狓犻犿狌犿狆犲狉犿犻狋狋犲犱狋狅犾犲狉犪狀犮犲狊犳狅狉狉犲犾犪狋犻狏犲犻狅狀犻狀狋犲狀狊犻狋犻犲狊狑犺犻犾犲犮狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀犚犲犾犪狋犻狏犲犻狀狋犲狀狊犻狋狔犘犲狉犿犻狋狋犲犱狋狅犾犲狉犪狀犮犲狊犆犪犾犮狌犾犪狋犻狅狀犪狀犱犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳狋犺犲狉犲狊狌犾狋犆犪犾犮狌犾犪狋犲狋犺犲犮狅狀狋犲狀狋狅犳犇犻犿犲狋犺狅犿狅狉狆犺，狉犲狊犻犱狌犲犻狀狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犫狔犌犆犕犛犇犱犪狋犪狆狉狅犮犲狊狊狅狉狅狉狌狊犻狀犵狋犺犲犳狅犾犾狅狑犲犱犳狅狉犿狌犾犪犡犻（犮犻犮犻，）犞犿（）犠犺犲狉犲犡犻狋犺犲狉犲狊犻犱狌犲犮狅狀狋犲狀狋狅犳狋犪狉犵犲狋犪狀犪犾狔狋犲犻狀狋犺犲狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲，犵犽犵；犮犻狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犪狉犵犲狋犪狀犪犾狔狋犲犳狅狉狋犲狊狋狊犪犿狆犾犲犮犪犾犮狌犾犪狋犲犱犫狔犮犪犾犻犫狉犪狋犻狅狀犮狌狉