【考研类试卷】2009年南京大学（生物化学二）考研真题及答案解析.doc

1、2009 年南京大学（生物化学二）考研真题及答案解析(总分：110.00，做题时间：90 分钟)一、判断题请判断下列各题正误(总题数：20，分数：40.00)1.酶底物的类似物和过渡态的类似物通常都是酶的竞争性抑制剂。（分数：2.00）A.正确B.错误2.如果有一种试剂只能与脱氧的血红蛋白结合，那么在血红蛋白溶液中加入该试剂以后，将会提高血红蛋白释放氧气的能力。（分数：2.00）A.正确B.错误3.同一种激素有时可以产生完全相反的生理作用。（分数：2.00）A.正确B.错误4.限定一种别构酶具有正协同效应，那么此酶正别构效应物的存在将增强它的正协同效应。（分数：2.00）A.正确B.错误5.甘

2、二醇曾被作为牙膏的添加剂，后来发现它对人体有毒，因为它进入体内能够抑制乙醇脱氢酶的活性。（分数：2.00）A.正确B.错误6.所有的丝氨酸蛋白酶都具有相同的催化三元体，所以它们都属于同源蛋白。（分数：2.00）A.正确B.错误7.辅酶、辅酶和 FAD 和 CoA 一样，其分子结构中都含有腺苷酸。（分数：2.00）A.正确B.错误8.构成呼吸链的四种复合体均含有铁硫蛋白。（分数：2.00）A.正确B.错误9.糖酵解途径的所有中间代谢物都是磷酸化的有机分子。（分数：2.00）A.正确B.错误10.如果一个酶促反应的G“ 0 是一个大的负值，那么这个反应在细胞内一定是一个不可逆反应。（分数：2.00

3、）A.正确B.错误11.cAMP、ADP 和 ATP 都是高能磷酸化合物。（分数：2.00）A.正确B.错误12.动物糖异生的前体包括丙酮酸、甘油、丙酸和降植烷酸。（分数：2.00）A.正确B.错误13.P700 和 P680 的化学本质都是特殊的叶绿素 a。（分数：2.00）A.正确B.错误14.肝细胞因为缺乏硫解酶而不能利用酮体。（分数：2.00）A.正确B.错误15.脂溶性维生素和胆固醇的生物合成的前体都是活化的异戊二烯。（分数：2.00）A.正确B.错误16.原核生物和真核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶都是氨甲酰磷酸合成酶。（分数：2.00）A.正确B.错误17.DNA 分子上的 5

4、一甲基胞嘧啶的脱氨基反应比胞嘧啶的脱氨基反应更容易引起突变。（分数：2.00）A.正确B.错误18.内含子在剪接反应中被切除，所以一种蛋白质的基因如果在内含子内发主突变不会影响到这种蛋白质的功能。（分数：2.00）A.正确B.错误19.内含肽被释放后可以作为一种特殊的核酸内切酶，催化自身的 DNA 转移到其他基因内部，导致该基因不能产生有功能的蛋白质产物。（分数：2.00）A.正确B.错误20.指导蛋白质定位与分拣的信号肽序列在蛋白质到达特定位点后一般都会被特定的酶识别并切除。（分数：2.00）A.正确B.错误二、单项选择题(总题数：21，分数：42.00)21.单项选择题下列各题的备选答案中

5、，只有一个是符合题意的。（分数：2.00）_22.能够形成 Schifr 碱参与共价催化的氨基酸残基是( )。（分数：2.00）A.PB.EC.RD.KE.Y23.最容易出现在蛋白质内部的一对氨基酸残基是( )。（分数：2.00）A.Arg：LysB.Ser：GlyC.Arg：AspD.Asp：AspE.TyT：Lys24.Hsp70 具有的酶活性是( )。（分数：2.00）A.激酶B.蛋白酶C.ATP 酶D.异构酶E.没有酶活性25.不可能参与一种酶的催化机制的氨基酸残基是( )。（分数：2.00）A.LysB.GluC.CysD.IleE.Tyr26.在酶活性的各种调节饥制中，调节速度最快

6、的是( )。（分数：2.00）A.酶的合成B.酶的水解C.别构调节D.共价修饰E.水解激活27.构成蛋白顺的氨基酸残基中哪一种具有内在的荧光?( )（分数：2.00）A.PheB.TyrC.TrpD.ProE.His28.按照氨基酸侧链疏水性递增的顺序，下列六种氨基酸残基的正确排序应该是( )。（分数：2.00）A.REMFVIB.REMIVFC.IVFMERD.ERFMVIE.FEMVIR29.cAMP 受体蛋白(CRP)的一种突变使其失去了与 DNA 结合的能力，该突变菌株( )。（分数：2.00）A.只有在高葡萄糖浓度下，lacZ 才能高水平表达B.只有在低葡萄糖浓度下，lac7 才能高

7、水平表达C.只有在高乳糖、低葡萄糖的情况下，lacZ 才能高水平表达D.即使在高乳糖、低葡萄糖的情况下，lacZ 也不能高水平表达30.组蛋白的乙酰化修饰对真核细胞的基因表达具有非常大的影响，受乙酰化修饰的氨基酸残基通常是( )。（分数：2.00）A.ArgB.CysC.SerD.ThrE.Lys31.细菌细胞内的质粒 DNA 的存在形式是( )。（分数：2.00）A.共价闭环负超螺旋B.共价闭环正超螺旋C.共价闭环松弛型D.线性负超螺旋E.线性互迢螺旋32.最可能形成 z-DNA 的序列是( )。（分数：2.00）A.5-ATATATATATATATATATAT-3 3“一 TATATATA

8、TATATATATATA-5B.5-AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-3 3“-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-5C.5-GCGCG(2GCGCGCCGCGCGCG 一 3 3“-CGCGCGCGCGCGCGCGCGCG-5D.5-GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG 一 3 3“-CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC 一 533.序列特异性 DNA 结合蛋白与 DNA 结合的主要作用力是( )。（分数：2.00）A.离子键B.氢键C.疏水键D.范德华力E.配位键34.以下是五种由不同序列构成的 DNA 双螺旋，在相同的条件下进行热变性，然后再通过缓慢冷却进行复性。

9、你认为复性最快的序列是( )。（分数：2.00）A.ATATATATB.AATATTATC.AAAATTTAD.AAAATTTTE.ATAAATTA35.植物细胞有、动物细胞没有的酶是( )。（分数：2.00）A.柠檬酸合酶B.顺乌头酸酶C.异柠檬酸裂解酶D.异柠檬酸脱氢酶E.苹果酸脱氢酶36.从葡萄糖合成糖原需要消耗的 NTP 是( )。（分数：2.00）A.UTPB.ATPC.CFPD.GTPE.ATP 和 UTP37.葡萄糖的完全氧比大概只有 40的能量被用来合成 ATP，其余 60的能量的去处是( )。（分数：2.00）A.被还原成 NADHB.变成了脂肪C.变成了氨基酸D.转变成其他

10、有机化合物E.变成了热38.如果大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的 5-外切核酸酶的活性丧失，那么大肠杆菌将( )。（分数：2.00）A.更容易发生突变B.一切正常C.不能生存D.能够生存，但复制出来的 DNA 分子含有共阶相连的 RNAE.对紫外线的照射特别敏感39.RNA 聚合酶 II 最大亚基的 CTD 富含( )。（分数：2.00）A.碱性氨基酸B.酸性氨基酸C.疏水氨基酸D.羟基氨基酸E.GIy40.一种抑制剂能够与核塘体的 E 部位结合，如果将这种抑制剂加到无细胞翻译系统中，那么导致( )。（分数：2.00）A.翻译不能起始B.氨酰-tRNA 不能进入 A 部位C.肽键不能形成D.只

11、能合成二肽E.翻译不受影响41.HaraldZurHausen、FrancoiseBarreSinoussi 和 LucMontagnier 获得了 2008 年诺贝尔医学、生理学的奖。他们的主要贡献是( )。（分数：2.00）A.发现了导致宫颈癌的 HPV 和导致乙肝的 HBVB.发现了导致疯牛病的朊病毒和导致艾滋病的 HIVC.发现了导致疯牛病的朊病毒和导致宫颈癌的 HPVD.发现了导致宫颈癌的 HPV 和导致艾滋病的 HIVE.发现了导致疯牛病的朊病毒和导致乙肝的 HBV三、填空题(总题数：6，分数：12.00)42.填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。（分数：2.00）_

12、43.蛋白质一般在_nm 有最大光吸收，核酸在_nm 有最大光吸收，小肽在_nm 有最大光吸收。（分数：2.00）_44.根据蛋白质相对分子质量大小分离分析蛋白质的方法主要有_和_。（分数：2.00）_45.催化糖酵解途径中三步不可逆反应的酶分别是_、_和_。（分数：2.00）_46.细胞合成 ATP 的三种手段分别是_、_和_。（分数：2.00）_47.在蛋白质翻译过程中有多种蛋白质因子参与，其中属于 G 蛋白的蛋白质因子有_、_、_和_。（分数：2.00）_四、简答题(总题数：8，分数：16.00)48.蛋白质的正确折叠受哪些因素的影响?哪些性质可以帮助我们判断蛋白质是否正确折叠?（分数：

13、2.00）_49.AMP-PNP(结构式见图附录 6-1)是 ATP 的结构类似物。AMP-PNP 可以抑制很多以 ATP 为底物的激酶的活性，却是 RNA 聚合酶的正常底物，请解释原因。判断 AMP-PNP 属于什么类型的抑制剂并说明理由。用AMP-PNP 代替 ATP 参与 RNA 聚合酶催化的转录，对转录结果会有什么影响? （分数：2.00）_50.用两组实验大鼠进行试验：第一组每天喂食正庚酸(7：0)作为唯一碳源；第二组喂食正辛酸(8：0)。一个月之后，第一组大鼠表现得很健康，体重还有增加；第二组无力，因肌肉萎缩而体重减轻。试解释导致这两组大鼠出现这些差异的原因。（分数：2.00）_5

14、1.大肠杆菌的 Dam 甲基化酶活性过高或丧失活性都可以导致大肠杆菌突变率提高，为什么?哪一种情形引起的突变率更高，为什么?（分数：2.00）_52.人 GM-CSF 是由 127 个氨基酸组成的生长因子，能够调节成熟的粒细胞和巨噬细胞的生物功能，GM-CSF能够治疗髓性再生障碍、粒白细胞低下、化学治疗或放射治疗引起的骨髓造血抑制等疾病治疗药物。人GM-CSFcDNA 编码序列中 GC 含量为 815。本实验室拟用大肠杆菌为表达体系，构建重组人 GM-CSF 高效表达菌株，以实现 GM-CSF 的基因工程生产。请你设计实验流程，实现人 GM-CSF 的高效表达和验证，并请简要注明各关建流程环节

15、的目的或依据。（分数：2.00）_53.在哺乳动物，许多基因是呈时空特异性表达的，如 Lck 基因在 T 细胞发育的特定时期表达。每一个细胞都含有一个生物体完整的一套基因，为什么这些基因不是在所有的时间在所有的组织细胞中都转录表达，而呈时空特异性转录表达?你认为有哪些主要因素发挥作用。（分数：2.00）_54.进行蛋白质分子 SDS-PAGE 电泳分析的目的是什么?进行蛋白质分子 SDS-PAGE 电泳分析时，上样缓冲液中有哪些主要成分?如果分别缺少这些成分，电泳行为会怎样?请予说明。（分数：2.00）_55.凝胶过滤层析可以用以判断蛋白质分子的大小。本实验室用凝胶过滤分析了三种相对分子质量标

16、准蛋白质，其保留体积分别为 5154ml、646ml、787ml，相对分子质量分别为：ZZ：22KD、Cvto-chromeC：12KD、：BSA：666KD。请问这三种蛋白质的保留体积分别为多少?在上述基础上，我们又用凝胶过滤分析了 x 蛋白质及其突变体 X-F25Y(简称 X)。请问如图附录 6-2 层析图中 X 蛋白相对分子质量大约为多少?x的相对分子质量大约是多少?为什么对于 x蛋白质，一个氨基酸突变会使得 X 蛋白质相对分子质量发生如此大的变化?你能给一个合理的解释吗? （分数：2.00）_2009 年南京大学（生物化学二）考研真题答案解析(总分：110.00，做题时间：90 分钟)

17、一、判断题请判断下列各题正误(总题数：20，分数：40.00)1.酶底物的类似物和过渡态的类似物通常都是酶的竞争性抑制剂。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：2.如果有一种试剂只能与脱氧的血红蛋白结合，那么在血红蛋白溶液中加入该试剂以后，将会提高血红蛋白释放氧气的能力。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：3.同一种激素有时可以产生完全相反的生理作用。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：同一种激素不可以产生完全相反的生理作用，有拮抗作用的激素可以产生完全相反昀生理作用。4.限定一种别构酶具有正协同效应，那么此酶正别构效应物的存在将增强它的正协同效应。（分数：2.00）A.

18、正确B.错误 解析：解析：一分子配体与酶结合后促进另一分子配体与酶结合为正协同效应。所以若限定一种别构酶具有正协同效应，那么此酶正别构效应物的存在将减弱它的正协同效应。相反，此酶的正别构抑制物的存在将增强它的正协同效应。5.甘二醇曾被作为牙膏的添加剂，后来发现它对人体有毒，因为它进入体内能够抑制乙醇脱氢酶的活性。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：甘二醇曾被作为牙膏的添加剂，后来发现它对人体有毒，因为它的毒性来自人体摄入后，会代谢为肾毒性极强的草酸，导致急性肾衰竭症状。6.所有的丝氨酸蛋白酶都具有相同的催化三元体，所以它们都属于同源蛋白。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解

19、析：同源蛋白是指在不同生物体内行使相同或相似功能的蛋白质。虽然所有的丝氨酸蛋白酶都具有相同的催化三元体，但是它们各自可以在同一生物体内具有不同的作用。7.辅酶、辅酶和 FAD 和 CoA 一样，其分子结构中都含有腺苷酸。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：8.构成呼吸链的四种复合体均含有铁硫蛋白。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：构成呼吸链的四种复合物中只有复合物、含有铁硫蛋白，复合物不含有铁硫蛋白。9.糖酵解途径的所有中间代谢物都是磷酸化的有机分子。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：10.如果一个酶促反应的G“ 0 是一个大的负值，那么这个反应在细胞内一定是一个不

20、可逆反应。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：G“ 0 是标准自由能变化，即在标准条件：25(298K)、1 atm(一个大气压)、反应物和产物的浓度都是 10 molL，所得到的自由能变化。但细胞内不满足这个条件，所以如果一个酶促反应的G“ 0 是一个大的负值，那么这个反应在细胞内也不一定是一个不可逆反应。11.cAMP、ADP 和 ATP 都是高能磷酸化合物。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：12.动物糖异生的前体包括丙酮酸、甘油、丙酸和降植烷酸。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：13.P700 和 P680 的化学本质都是特殊的叶绿素 a。（分数：2.00）A

21、.正确 B.错误解析：14.肝细胞因为缺乏硫解酶而不能利用酮体。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：肝细胞是因为缺少将乙酰乙酸转化为乙酰乙酰-CoA 的酰基化酶而不能利用酮体，而不是因为缺乏硫解酶。15.脂溶性维生素和胆固醇的生物合成的前体都是活化的异戊二烯。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：16.原核生物和真核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶都是氨甲酰磷酸合成酶。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：原核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶是天冬氨酸转氨甲酰酶；而真核生物嘧啶核苷酸从头合成的限速酶是氨甲酰磷酸合成酶 II。17.DNA 分子上的 5 一甲基胞嘧啶的脱氨基

22、反应比胞嘧啶的脱氨基反应更容易引起突变。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：18.内含子在剪接反应中被切除，所以一种蛋白质的基因如果在内含子内发主突变不会影响到这种蛋白质的功能。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：在 mRNA 剪切过程中，如内含子中分支点或内含子与外显子拼接处发生碱基的改变，往往会造成剪切点改变，从而导致编码的蛋白质功能异常。19.内含肽被释放后可以作为一种特殊的核酸内切酶，催化自身的 DNA 转移到其他基因内部，导致该基因不能产生有功能的蛋白质产物。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：内含肽被释放后可以作为归巢核酸内切酶，可以介导其编码序列归巢

23、到不含该序列的等位基因中，但该基因还是可以产生有功能的蛋白质产物。20.指导蛋白质定位与分拣的信号肽序列在蛋白质到达特定位点后一般都会被特定的酶识别并切除。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：二、单项选择题(总题数：21，分数：42.00)21.单项选择题下列各题的备选答案中，只有一个是符合题意的。（分数：2.00）_解析：22.能够形成 Schifr 碱参与共价催化的氨基酸残基是( )。（分数：2.00）A.PB.EC.RD.K E.Y解析：23.最容易出现在蛋白质内部的一对氨基酸残基是( )。（分数：2.00）A.Arg：LysB.Ser：GlyC.Arg：Asp D.Asp：Asp

24、E.TyT：Lys解析：24.Hsp70 具有的酶活性是( )。（分数：2.00）A.激酶B.蛋白酶C.ATP 酶 D.异构酶E.没有酶活性解析：25.不可能参与一种酶的催化机制的氨基酸残基是( )。（分数：2.00）A.LysB.GluC.CysD.Ile E.Tyr解析：26.在酶活性的各种调节饥制中，调节速度最快的是( )。（分数：2.00）A.酶的合成B.酶的水解C.别构调节 D.共价修饰E.水解激活解析：27.构成蛋白顺的氨基酸残基中哪一种具有内在的荧光?( )（分数：2.00）A.PheB.TyrC.Trp D.ProE.His解析：28.按照氨基酸侧链疏水性递增的顺序，下列六种氨

25、基酸残基的正确排序应该是( )。（分数：2.00）A.REMFVI B.REMIVFC.IVFMERD.ERFMVIE.FEMVIR解析：29.cAMP 受体蛋白(CRP)的一种突变使其失去了与 DNA 结合的能力，该突变菌株( )。（分数：2.00）A.只有在高葡萄糖浓度下，lacZ 才能高水平表达B.只有在低葡萄糖浓度下，lac7 才能高水平表达C.只有在高乳糖、低葡萄糖的情况下，lacZ 才能高水平表达D.即使在高乳糖、低葡萄糖的情况下，lacZ 也不能高水平表达 解析：30.组蛋白的乙酰化修饰对真核细胞的基因表达具有非常大的影响，受乙酰化修饰的氨基酸残基通常是( )。（分数：2.00）

26、A.ArgB.CysC.SerD.ThrE.Lys 解析：31.细菌细胞内的质粒 DNA 的存在形式是( )。（分数：2.00）A.共价闭环负超螺旋 B.共价闭环正超螺旋C.共价闭环松弛型D.线性负超螺旋E.线性互迢螺旋解析：32.最可能形成 z-DNA 的序列是( )。（分数：2.00）A.5-ATATATATATATATATATAT-3 3“一 TATATATATATATATATATA-5B.5-AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-3 3“-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-5C.5-GCGCG(2GCGCGCCGCGCGCG 一 3 3“-CGCGCGCGCGCGCGCGC

27、GCG-5 D.5-GGGGGGGGGGGGGGGGGGGG 一 3 3“-CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC 一 5解析：33.序列特异性 DNA 结合蛋白与 DNA 结合的主要作用力是( )。（分数：2.00）A.离子键B.氢键 C.疏水键D.范德华力E.配位键解析：34.以下是五种由不同序列构成的 DNA 双螺旋，在相同的条件下进行热变性，然后再通过缓慢冷却进行复性。你认为复性最快的序列是( )。（分数：2.00）A.ATATATAT B.AATATTATC.AAAATTTAD.AAAATTTTE.ATAAATTA解析：35.植物细胞有、动物细胞没有的酶是( )。（分数：2.00

28、）A.柠檬酸合酶B.顺乌头酸酶C.异柠檬酸裂解酶 D.异柠檬酸脱氢酶E.苹果酸脱氢酶解析：36.从葡萄糖合成糖原需要消耗的 NTP 是( )。（分数：2.00）A.UTPB.ATPC.CFPD.GTPE.ATP 和 UTP 解析：37.葡萄糖的完全氧比大概只有 40的能量被用来合成 ATP，其余 60的能量的去处是( )。（分数：2.00）A.被还原成 NADHB.变成了脂肪C.变成了氨基酸D.转变成其他有机化合物E.变成了热 解析：38.如果大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的 5-外切核酸酶的活性丧失，那么大肠杆菌将( )。（分数：2.00）A.更容易发生突变B.一切正常C.不能生存 D.能够

29、生存，但复制出来的 DNA 分子含有共阶相连的 RNAE.对紫外线的照射特别敏感解析：39.RNA 聚合酶 II 最大亚基的 CTD 富含( )。（分数：2.00）A.碱性氨基酸B.酸性氨基酸C.疏水氨基酸D.羟基氨基酸 E.GIy解析：40.一种抑制剂能够与核塘体的 E 部位结合，如果将这种抑制剂加到无细胞翻译系统中，那么导致( )。（分数：2.00）A.翻译不能起始B.氨酰-tRNA 不能进入 A 部位C.肽键不能形成D.只能合成二肽 E.翻译不受影响解析：41.HaraldZurHausen、FrancoiseBarreSinoussi 和 LucMontagnier 获得了 2008

30、年诺贝尔医学、生理学的奖。他们的主要贡献是( )。（分数：2.00）A.发现了导致宫颈癌的 HPV 和导致乙肝的 HBVB.发现了导致疯牛病的朊病毒和导致艾滋病的 HIVC.发现了导致疯牛病的朊病毒和导致宫颈癌的 HPVD.发现了导致宫颈癌的 HPV 和导致艾滋病的 HIV E.发现了导致疯牛病的朊病毒和导致乙肝的 HBV解析：三、填空题(总题数：6，分数：12.00)42.填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。（分数：2.00）_解析：43.蛋白质一般在_nm 有最大光吸收，核酸在_nm 有最大光吸收，小肽在_nm 有最大光吸收。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：280

31、260 230)解析：44.根据蛋白质相对分子质量大小分离分析蛋白质的方法主要有_和_。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：SDSPAGE 凝胶过滤层析)解析：45.催化糖酵解途径中三步不可逆反应的酶分别是_、_和_。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：己糖激酶 磷酸果糖激酶 丙酮酸激酶)解析：46.细胞合成 ATP 的三种手段分别是_、_和_。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：底物水平磷酸化 氧化磷酸化 光合磷酸化)解析：47.在蛋白质翻译过程中有多种蛋白质因子参与，其中属于 G 蛋白的蛋白质因子有_、_、_和_。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：IF-2 EF-

32、G EF-Tu RF-3)解析：四、简答题(总题数：8，分数：16.00)48.蛋白质的正确折叠受哪些因素的影响?哪些性质可以帮助我们判断蛋白质是否正确折叠?（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)影响蛋白质的正确折叠因素有蛋白质本身的一级结构、分子伴侣、二硫键异构酶和脯氨酰顺反异构酶。 蛋白质的基本单位为氨基酸，而蛋白质的一级结构指的就是其氨基酸序列，蛋白质会由所含氨基酸残基的亲水性、疏水性、带正电、带负电等等特性通过残基问的相互作用而折叠成立体的三级结构。 蛋白质在合成时，分子伴侣可逆地与未折叠肽段的疏水部分结合随后松开，如此重复进行可防止错误的聚集发生，使肽链正确折叠。分子伴侣也

33、可与错误聚集的肽段结合，使之解聚后，再诱导其正确折叠。分子伴侣对蛋白质分子中二硫键的正确形成，起到重要作用。 蛋白质分子中的二硫键与新生肽段的折叠密切相关，对维系蛋白质分子的结构稳定性和功能发挥也有重要作用。二硫键异构酶可以催化二硫键的形成。而脯氨酰顺反异构酶催化正确脯氨酸异构体的形成可以加速蛋白质的折叠。 (2)没有正确折叠的蛋白质一般溶解度低、容易发生聚集、活性降低或者完全丧失，也可以通过荧光光谱、圆二色性等物理手段检测。)解析：49.AMP-PNP(结构式见图附录 6-1)是 ATP 的结构类似物。AMP-PNP 可以抑制很多以 ATP 为底物的激酶的活性，却是 RNA 聚合酶的正常底物

34、，请解释原因。判断 AMP-PNP 属于什么类型的抑制剂并说明理由。用AMP-PNP 代替 ATP 参与 RNA 聚合酶催化的转录，对转录结果会有什么影响? （分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)在以 ATP 为底物的激酶催化反应中，被转移的磷酸基团是 磷酸根，即 ATP中受到亲核进攻的是磷酸根，ADP 为离去基团。AMP-PNP 是 ATP 的结构相似物。AMP-PNP 中 和 磷酸基团之间换成了难以断裂的 P-N 键，使得 ADP 成为一个极差的离去基团，导致反应受到抑制。故 AMP-PNP可以抑制很多以 ATP 为底物的激酶的活性。 与激酶不同的是，RNA 聚合酶催化的反应中受

35、到亲核进攻的是 磷酸基团，则即使 AMP-PNP 中 和 磷酸基团之间的 PN 键不同于 AMP，也不会影响到反应，所以 AMP-PNP 是 RNA 聚合酶的正常底物。 (2)由于在正常的情况下 RNA 聚合酶以 ATP 为底物，释放出的焦磷酸根很容易在焦磷酸酶的催化下发生水解，释放出大量的自由能，使 RNA 合成成为不可逆反应。如果 RNA聚合酶以 AMP-PNP 为底物，释放出来的是 PNP，则很难水解，从而不利于 RNA 的合成。用 AMPPNP 代替ATP 参与 RNA 聚合酶催化的转录将影响 RNA 的合成。)解析：50.用两组实验大鼠进行试验：第一组每天喂食正庚酸(7：0)作为唯一

36、碳源；第二组喂食正辛酸(8：0)。一个月之后，第一组大鼠表现得很健康，体重还有增加；第二组无力，因肌肉萎缩而体重减轻。试解释导致这两组大鼠出现这些差异的原因。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：正庚酸是奇数脂肪酸，而正辛酸是偶数脂肪酸。奇数脂肪酸通过 一氧化产生乙酰一 CoA 和丙二酸单酰-CoA，而偶数脂肪酸通过 一氧化只能产生乙酰-CoA。与乙酰-CoA 不同的是，丙二酸单酰一 CoA 可以转变成糖异生和氨基酸合成的前体草酰乙酸，维持了体内血糖的稳定，使 ATP 的产生正常进行，所以喂食正庚酸的大鼠表现得正常。 而喂食正辛酸的大鼠，正辛酸只能通过 -氧化产生乙酰-CoA，然后被彻底氧

37、化分解，不能从乙酰一 CoA 净合成碳水化合物和氨基酸从辛酸合成葡萄糖，为了维持血糖浓度的稳定，肌肉蛋白被分解提高生糖氨基酸怍为糖异生的原料，从而导致肌肉萎缩，体重减轻。因此，导致这两组大鼠出现这些筹异。)解析：51.大肠杆菌的 Dam 甲基化酶活性过高或丧失活性都可以导致大肠杆菌突变率提高，为什么?哪一种情形引起的突变率更高，为什么?（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)Dam 甲基化酶可以使 DNA 的 GATC 序列中腺嘌呤 N6 位甲基化，形成 N6-甲基嘌呤。新合成的子代 DNA 分子中，亲代是甲基化的，新合成的链则还没来得及甲基化。根据甲基化程度的不同，错配修复系统就能识

38、别出亲代链和子代链，而当子代链发生错配时，能被识别出来并进行修复。 若Dam 甲基化酶活性过高，会使新合成的子链立刻发生甲基化修饰，由于错配修复系统不能识别甲基化的链，子链上错配的碱基难以被错配修复系统修复而导致大肠杆菌突变率提高。 而如果 Dam 甲基化酶没有活性，DNA 复制过程中的亲代链和子代链都不会发生甲基化，于是错配修复系统只能随机地选择一条链进行错配修复的对象而另一条作为修复的模板，若错配系统错误识别了亲代链，以错配的子代链为模板修复亲代链，则大肠杆菌就会发生突变。 (2)显然如果 Dam 甲基化酶没有活性时，只要错配修复系统正确识别了子代链，就有可能会被正确修复，而如果 Dam

39、甲基化酶活性过高，则一定不能被正确修复，故 Dam 甲基化酶活性过高引起的突变率更高。)解析：52.人 GM-CSF 是由 127 个氨基酸组成的生长因子，能够调节成熟的粒细胞和巨噬细胞的生物功能，GM-CSF能够治疗髓性再生障碍、粒白细胞低下、化学治疗或放射治疗引起的骨髓造血抑制等疾病治疗药物。人GM-CSFcDNA 编码序列中 GC 含量为 815。本实验室拟用大肠杆菌为表达体系，构建重组人 GM-CSF 高效表达菌株，以实现 GM-CSF 的基因工程生产。请你设计实验流程，实现人 GM-CSF 的高效表达和验证，并请简要注明各关建流程环节的目的或依据。（分数：2.00）_正确答案：(正确

40、答案：(1)天然人 GM-CSF 成熟基因 5端的碱基含量较高，且编码前几个氨基酸的密码子在大肠杆菌中表达很低。可以在编码成熟蛋白的基因序列前引入 EcoR I 酶切位点和启始密码子 ATG，并在不改变蛋白氨基酸顺序的前提下，将核苷酸中的一些 G 和 C 改成 A 和 T，降低了基因 5端的 GC 含量，又使改变后的密码子为大肠杆菌偏爱。以人外周血单核细胞获得的总 RNA 为模板，选择合适的特异性引物，进行 PCR 扩增反应得到修饰完整的人 GM-CSF 成熟肽基因序列。 (2)将扩增的 PCR 产物回收纯化，将人GM-CSF 片段插入 pMD18T 克隆载体的 EcoR 1/Pst I 酶切位点，转化大肠杆菌 XL 10gold 后提取质粒。用 PCR 反应鉴定含有插入片段的克隆，并挑取含有插入片段的克隆。经 EcoRLPstI 双酶切鉴定后，进行序列分析。 (3)将 PCR 扩增并经测序鉴定成熟肽的人 GM-CSF 基因插入温度诱导型表达质粒 pDH，得到表达载体 pDHrhGM-CSF，将 pDHrhGM-CSF 转化入大肠杆菌。 (4)挑选克隆，接种培养并回收菌体，进行SDS-PAGE 凝胶电泳分析。 (5)Western blot 分析或活性测定。)解析：53.在哺乳动物，许多基因是呈时空特异性表达的，如 Lck 基因在 T 细胞发育的特定时期表达。每