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DB32 T 3762.7-2020 新型冠状病毒检测技术规范 第7部分:空气样本检测与评估.pdf

1、ICS 11.020 C 62 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB 32/T 3762.7 2020 新型冠状病毒检测技术规范 第 7 部分 : 空气 样本 检测与评估 Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part 7: Air sample detection and evaluation 2020 - 03 - 02 发布 2020 - 03 - 03 实施 江苏省市场监督管理局 发布 DB32/T 3762.7 2020 I 前 言 DB32/T 3762新型冠状病毒检测技术规范 目前 分为以下部分 : 第 1部分:生物

2、样本采集、运输和保存 ; 第 2部分:病毒分离与鉴定; 第 3部分:核酸荧光 PCR检测程序; 第 4部分:重组酶介导等温扩增程序; 第 5部分:血清 IgM和 IgG抗体酶联免疫吸附检测程序; 第 6部分:血清 IgM和 IgG抗体胶体金免疫层析检测程序; 第 7部分:空气 样本 检测与评估; 第 8部分: 物体表面检测与评估 ; 第 9部分:医务人员职业暴露检测与评估。 本部分为 DB32/T 3762 的第 7部分。 本部分按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本部分由江苏省卫生健康委员会提出。 本部分由江苏省卫生标准化技术委员会归口。 本部分起草单位:江苏省疾病预防控制中

3、心、苏州第五人民医院、苏州大学附二院、昆山市疾病预 防控制中心、南京医科大学。 本部分主要起草人:周连、崔仑标、 徐斌、 丁震、程军平、徐佳南、钱志远、罗晓明、沈欢喜、朱 宝立。 DB32/T 3762.7 2020 1 新型冠状病毒检测技术规范 第 7 部分 : 空气样本 检测与评估 1 范围 本 部分 规定了空气中新型冠状病毒的 样本 分类、现场采样、 实验室检测和评估。 本 部分 适用于于新型冠状病毒肺炎流行期间空气中新型冠状病毒的检测,其它呼吸道病毒的空气 样 本 检 测可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引 用文件,仅 注日期的版本适用

4、于本文件。 凡是 不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 WS 395 公共场所集中空调通风系统卫生学评价规范 DB32/T 3762.3-2020新型冠状病毒检测技术规范 第 3部分: 核酸荧光 PCR检测程序 Doc9284-AN/905 危险品航空安全运输技术细则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 呼出气冷凝液 exhaled breath condensate, EBC 一种高度稀释的体液, 含有气道内衬液体及其可挥发成分,是肺内生化、炎症的标记物 。 EBC检测 是一种 无创 检测呼吸道疾病炎症的方法 ,可以评价气道炎症和氧化应激程度,具有

5、安全、可靠、简便、 易行、重复性好等优点。呼吸道冷凝液微生物的检测,可用于鉴别病原菌。 4 样本 分类 4.1 呼出气冷凝液 4.1.1 原理 采用呼出气低温冷凝加撞击的原理,采集呼出气中的生化物质及气溶胶颗粒。 4.1.2 仪器设备 4.1.2.1 呼出气冷凝液采集器:采集效率 150L/min,冷凝温度 -10 0 ,预冷时间 3 min 5min。 4.1.2.2 波纹管:一次性,可伸缩。 4.1.2.3 冷凝盒:一次性 。 4.1.2.4 冻存管: 2mL。 4.2 室内空气、空调送风、空调新风和室外排风 4.2.1 原理 DB32/T 3762.7 2020 2 采用旋风分离式与撞击

6、式相结合,将空气中的颗粒物直接采集到液体中,检测采集 样本 中的病毒。 4.2.2 仪器设备 4.2.2.1 便携式小流量生物气溶胶采样器:流量 14 L/min 20L/min,切割点 0.5m,采集液 3 mL 5mL,时间自设。 4.2.2.2 便携式大流量生物气溶胶采样器:流量 300L/min,切割点 0.5m 0.8m,采集液 3 mL 15mL,时间自设。 4.2.2.3 采样头:一次性,和仪器配套。 4.2.2.4 采样桶 /采样瓶:和仪器配套。 4.2.2.5 采集管:一次性, 3 mL 15 mL。 4.2.2.6 冻存管: 3 mL 15 mL。 4.2.3 气溶胶采集液

7、 病毒咽试纸采集液或者无菌水 。 5 现场采样 5.1 采样人员防护 穿戴工作服、一次性工作帽、一次性手套、防护服、 KN95/N95 及以上颗粒物防护口罩或医用防护 口罩、 防护面屏或护目镜、工作鞋或胶靴、防水靴套等。 5.2 点位分布 发热门诊、 ICU病房 、 普通病房 、 护士站 、 病房走廊 、实验室、 CT室、 集中空调通风系统送风 与 新 风口 、 室外排风口。 5.3 布点原则 5.3.1 集中空调通风系统按照 WS/T395 进行设点;普通病房 100 间,抽取病房数量的 3% 5%进行 布点;普通病房 100 间,抽取病房数量的 1% 3%进行布点。室内面积不足 50m2

8、的设置 1 个采样点, 50 m2 200m2 的设置 2 个采样点, 200m2 以上的设置 3 5 个采样点。 5.3.2 采样点按均匀布点原则布置;距离地面高度 1.2m 1.5m,距离墙壁不小于 1m;避开通风口、 通风道等;同时考虑离传染源远近。 5.4 样本 运输 新型冠状病毒空气样本运输包装分类属于 B类,对应的联合国编号为 UN3373,包装符合国际民航 组织文件 Doc9284危险品航空安全运输技术细则的 PI650分类包装要求;通过其他交通工具运输的 可参 照以上标准包装。 6 实验室检验 6.1 负压 P2 实验前准备 6.1.1 消毒剂: 75%乙醇、 0.55%含氯消

9、毒剂(需每天新鲜配制):缓冲间有效氯 1 瓶;核心区生安柜 内 75%乙醇、有效氯各 1 瓶,生安柜外 75%乙醇、有效氯 1 瓶。 DB32/T 3762.7 2020 3 6.1.2 进入 P2 实验室,检查垃圾袋、纸巾、 Tip 头、冻存管、冻存盒、 EP 管、封口膜、标签笔、一 次性乳胶手套、核酸提取试剂数量,不足时应及时补充。 6.1.3 在生安柜内铺一次性软吸收垫;在垃圾缸内放置垃圾袋,倒少量含氯消毒剂。 6.2 负压 P2 实验过程中 6.2.1 应在生安柜内两人同时操作。 6.2.2 取出待检样本,在生安柜内打开密封袋,核对送检单,在 样本管上标记,注明采样地点、日期、 样本类

10、型等。若管壁外有不明液体,应用有效氯消毒剂擦拭。 6.2.3 暂不检测样本放转运冻存盒,预留待检测样本放置位置。 6.2.4 对于未分装拭子样本需进行分装,分装于 2 mL 带螺旋盖内有垫圈冻存管。所有样本旋紧管盖 后需用封口膜密封。 6.2.5 废弃 Tip 头打入含氯消毒剂的废液缸中,注意需浸入液体中。 6.2.6 将核酸提取试剂槽样本孔(第一孔)中的裂解液吸出至 1.5mL EP 管中,每管加入 20L 用于病 毒 DNA/RNA 提取的蛋白酶 K 和 200L 样本,在涡旋器上充分振荡混匀后室温孵育 10min。 6.2.7 将 EP 管置于离心机中短 暂离心( 12000rpm10m

11、in),离心完成后将 EP 管中裂解后的样本吸 回至核酸提取试剂槽的样本孔(第一孔)中。 6.2.8 将试剂槽加套管置入全自动核酸提取仪中进行核酸提取。 6.2.9 剩余样本旋紧管盖后需用封口膜密封,放入样本转运盒。 6.2.10 取出提取好的核酸,转入 1.5 mL EP 管,注明采样地点、日期、样本类型等。 6.2.11 将核酸管放入核酸转运盒,连同样本转运盒进行盒内外消毒后转出生安柜。 6.3 负压 P2 实验结束后 6.3.1 生安柜内清场:使用后的核酸提取条 /板放入垃圾袋,包扎垃圾袋,含氯消毒剂喷洒消毒外表面, 将一次性软吸收垫喷洒含氯消毒剂后折叠。手 消毒后将垃圾袋和一次性软吸收

12、垫一起带出生安柜放入核 心区中号垃圾袋。 6.3.2 试管架,试验台面、移液器等喷洒含氯消毒剂消毒后用 75%乙醇擦拭。 6.3.3 关闭生安柜,开启紫外消毒。 6.3.4 消毒反穿衣、脱一次性反穿衣放入中号垃圾袋,包扎垃圾袋。消毒垃圾袋外表面、核酸和样本 转运盒。 6.3.5 退出核心区,将中号垃圾袋放入缓冲区大号垃圾袋内。 6.3.6 每日固定时间对核心区进行过氧化氢终末消毒,消毒前应以塑料袋覆盖机器如核酸提取仪、离 心机等,记录终末消毒记录。 6.3.7 在缓冲区按合理程序脱卸个人防护用品。脱内层手套前开启核心间紫外。 6.3.8 出缓冲区,将垃圾袋放入高压灭菌器 高压,并记录。 6.3.9 开启缓冲区紫外消毒。 6.3.10 将核酸交核酸检测人员。样本转入病毒样本专用专人保管冰箱。 6.4 扩增体系配制 与 扩增 按照 DB32/T 3762.3-2020第 8章的要求 。 6.5 结果判定 按照 DB32/T 3762.3-2020中 9.3的要求 。 DB32/T 3762.7 2020 4 7 评估 只要出现 2个靶标和单靶标阳性样本,均视为空气环境有新冠病毒污染,应 进行 合理通风与消毒等 措施 , 并对医疗机构的卫生状况进行评估,提出改进措施。 _

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