DB32 T 3762.1-2020 新型冠状病毒检测技术规范 第1部分：生物样本采集、运输和保存.pdf

1、ICS 11.020 C 62 DB32 江苏省 地 方 标 准 DB 32/T 3762.1 2020 新型冠状病毒检测技术规范 第 1 部分：生物样本采集、运输和保存 Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part1: Collection,transportation and preservation of biological samples 2020 - 03 - 02 发布 2020 - 03 - 03 实施 江苏省市场监督管理局 发布 DB32/T 3762.1 2020 I 前 言 DB32/T 3762新型冠状病毒

2、检测技术规范 目前分为以下部分 ： 第 1部分：生物样本采集、运输和保存 ； 第 2部分：病毒分离与鉴定； 第 3部分：核酸荧光 PCR检测程序； 第 4部分：重组酶介导等温扩增程序； 第 5部分：血清 IgM和 IgG抗体酶联免疫吸附检测程序； 第 6部分：血清 IgM和 IgG抗体胶体金免疫层析检测程序； 第 7部分：空气 样本 检测与评估； 第 8部分：物体表面检测与评估； 第 9部分：医务人员职业暴露检测与评估。 本部分为 DB/T 3762 的第 1部分。 本部分按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本部分由江苏省卫生健康委员会提出。 本部分由江苏省卫生标准化技术委员会

3、归口。 本部分起草单位：江苏省疾病预防控制中心、南京医科大学、苏州第五人民医院、苏州大学附二院、 昆山市疾病预防控制中心。 本 部分 主要起草人： 吴涛、 朱宝立、 崔仑标、 葛以跃、朱小娟 、 程军平、徐佳南、钱志远、罗晓明、 沈欢喜。 DB32/T 3762.1 2020 1 新型冠状病毒检测技术规范 第 1 部分 ： 生物 样本 采集、运输和保存 1 范围 本 部分 规定了新型冠状病毒 生物样本的 采集 、 运输 和保存。 本 部分 适用于新型冠状病毒肺炎 疑似 病例、确诊病例和无症状感染者 样本的采集与检测 。 2 规范性引用文件 下列文件对于 本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引

4、用文件，仅 注日期的版本适用于本文件。 凡是 不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 Doc9284-AN/905 危险品航空安全运输技术细则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 3.1 新型冠状病毒 severe acute respiratory syndrome coronavirus 2， SARS-CoV-2 属于 属的冠状病毒，有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，直径 60 nm 140nm。其基因特征与 SARSr-CoV 和 MERSr-CoV有明显区别。 2020年 2月 12日国际病毒命名委员会将该病毒命名为严重急性呼吸综合征冠 状病毒 2（ se

5、vere acute respiratory syndrome coronavirus 2， SARS-CoV-2）。 3.2 新型冠状病毒肺炎 corona virus disease 2019， COVID-19 新型冠状病毒 感染导致的肺炎，简称新冠肺炎， WHO正式命名为 2019冠状病毒病（ corona virus disease 2019, COVID-19） 4 设备与耗材 4.1 设备 纤维支气管镜、 呼吸道抽取物收集器、 高压锅 . 4.2 耗材 4.2.1 个人防护装备： N95 及以上防护口罩、护目镜、 一次性防护面罩 、 医用无纺布帽 、连体防护服、 一次性手术衣 、

6、乳胶手套、 防水靴套 。 4.2.2 一次性压舌板、 拭子、 病毒采样管、 痰杯、 50mL 螺口塑料管、 50mL 注射器 、真空釆血管、无 菌螺旋管 、 生物安全运输箱。 5 样本采集 DB32/T 3762.1 2020 2 5.1 采样人员要求 从事新型冠状病毒检测 样 本采集的技术人员应经过生物安全培训（培训合格）和具备相应的实验技 能。 5.2 采样人员个人防护装备 N95及以上防护口罩、护目镜、 一次性防护面罩 、 医用无纺布帽、 连体防护服、 一次性手术衣、 双 层乳胶手套、 防水靴套。 5.3 采集 方法 5.3.1 咽拭子 ： 被采集人员先用生理盐水漱口，采样人员 用 2

7、根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子 放入无菌 生理盐水中湿润（禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起过敏） 同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后 壁， 擦拭至少 3 次，然后 将拭子头浸入含 3mL 病毒保存液（也可使用 等渗盐溶液、组织培养液或磷酸 盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。 5.3.2 鼻 咽 拭子：将 1 根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退 出。取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上述两根拭子浸入同一含 3mL 采样液的管中 （也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液） ，尾部弃去，旋紧管盖。 5.3.3 鼻咽抽取物或呼吸道抽取

8、物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道 分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并 用 3ml 采样液 冲洗收集器 1 次（亦可用小儿导尿管接在 50mL 注射器上来替代收集器）。 5.3.4 深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于含 3mL 采样液的 50mL 螺口塑料管中。 5.3.5 支气管灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约 30cm 深处），注入 5mL 生理 盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器 1 次（亦可用 小儿导尿管接在 50mL 注射器上来替代

9、收集）。 5.3.6 肺泡灌洗液：局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支管， 将其顶端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌 生理盐水，每次 30mL 50mL，总量 100 mL 250mL，不应超过 300mL。 5.3.7 血液 样本 ： 宜 使用含有 EDTA 抗凝剂的真空釆血管采集血液 样本 5mL，室温静置 30 分钟， 1500rpm 2000rpm 离心 10 分钟，分别收集血浆和血液中细胞于无菌螺口塑料管中。 5.3.8 血清 样本 ：用真空负压采血管采集血液 样本 5ml，室温静置 30 分钟， 1500rpm 2000rpm 离心 10

10、 分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。 5.3.9 粪便 样本 ： 如患者发病早期出现腹泻症状，则留取粪便 样本 3mL 5mL。 5.3.10 肛拭子：用消毒棉拭子轻轻插入肛门 3cm 5cm，再轻轻旋转拔出，立即放入含 3mL 5mL 病 毒采样管中。 5.3.11 眼结膜拭子 样本 ： 眼结膜表面用拭子轻轻擦拭后， 将拭子头进入采样管中 ， 尾部弃去，悬紧 管盖 。 5.3.12 其他材料：依据设计需求规范采集。 6 样本运输 6.1 样本包装 6.1.1 样本采集后在生物安全二级实验室生物安全柜内分装。 DB32/T 3762.1 2020 3 6.1.2 所有 样本 应放在大小合适的带

11、螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里，拧紧。容器外注明样 本编号、种类、姓名及采样日期。 6.1.3 将密闭后的 样本 装入密封袋，每袋限一份 样本 。样本包装要求要符合 Doc9284危险品航空安 全运输技术细则相应的标准。 6.1.4 涉及外部 样本 运输的 ，应根据 样本 类型，按照 A 类感染性物质进行三层包装。 6.2 样本 运送 新型冠状病毒潜在感染性生物材料的运输包装分类属于 A类，对应的联合国编号为 UN2814，包装 应 符合国际民航组织文件 Doc9284危险品航空安全运输技术细则的 PI602分类包装要求。 如需要长 途运输， 宜 采用干冰等制冷方式进行保藏，样本运送期间应避免反复冻融。 7 样本保存 用于 病毒分离和 核酸检测的 样 本应尽快进行检测， 24小时内检测的 样本 可置于 4 保存； 24小时内 无法检测的 样本 应置于 -70 或以下保存（ 若 无 -70 保存条件， 应 于 -20 冰箱暂存）。血清 可在 4 存 放 3天， -20 以下可长期保存。应设立专库或专柜单独保存 样本 。 _