DB51 T 2604-2019 茄子绵疫病室内抗性鉴定技术规程.pdf

1、茄子抗绵疫病室内鉴定技术规程 ICS 65.020.01 B 15 DB51 四 川 省 地 方 标 准 DB51/T 26042019 四川省市场监督管理局 发 布 2019 - 08 - 22 发布 2019 - 09 - 01 实施 DB51/T 26042019 I 目 次 前言 . . I 1 范围 . . 1 2 规范性引用文件 . . 1 3 术语和定义 . . 1 4 仪器、用 具、试剂与培养基 . . 1 5 参试茄子 果实的准备 . . 1 6 接种体选 择、制备与保存 . . 2 7 室内抗病性鉴定 . . 2 8 病情调查 与抗病性评价 . . 2 9 记载、鉴定评价

2、. . 3 附录 A （资 料性附录） 茄子绵疫病基本信息 . 4 附录 B （资 料性附录） 茄子绵疫病调查分级标准 . 6 附录 C （资料性附录） 茄子抗绵疫病性室内抗性鉴定原始数据记录及评价表 . 7 II 前 言 本标准依据GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由四川省农业农村厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准起草单位：四川省农业科学院植物保护研究所。 本标准主要起草人：席亚东、吴婕、韩帅、张河庆、乔昕、向运佳。 DB51/T 26042019 1 茄子抗绵疫病室内鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了茄子抗绵疫病性室内鉴定的术语和定义、室内抗病性鉴

3、定与评价等内容。 本标准适用于四川省茄子品种和育种材料（资源）对绵疫病抗性的室内人工接种鉴定及评价。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 NY/T2060.1 辣椒抗病性鉴定技术规程 3 术语和定义 3.1 茄子绵疫病 以辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici为主（其他菌物与 Phytophthora capsici互为姊妹种）的茸鞭 生物界卵菌门疫霉属的菌物所致的茄子病害，以在茄子的果实上呈水浸状或被覆白色菌丝体而得名，但 其病原物仍

4、会侵染茄子植株其他部位（附录A）。 4 仪器、用具、试剂与培养基 4.1 仪器与用具 光照培养箱、恒温生物培养箱、倒置显微镜、量桶、量杯、小型手持喷雾器、移液器、血球计数板、 塑料薄膜、玻棒。 4.2 试剂 75%乙醇、琼脂、碳酸钙、V8汁、灭菌水。 4.3 培养基 V8培养基：V8汁(170mL/L)、碳酸钙（ 3g/L）、琼脂粉(15g/L)。 PDA培养基：马铃薯（200g/L）、葡萄糖（2 0g/L）、琼脂（20g/L）。 5 参试茄子果实的准备 5.1 鉴定圃基本要求 DB51/T 26042019 2 果实和土壤均要求为当季未曾使用过靶标为卵菌门病原菌的杀菌剂，如：烯酰吗啉、丁吡吗

5、啉、嘧 菌酯、氟啶胺、吡唑醚菌酯、双炔酰菌胺、氰霜唑、霜霉威盐酸盐、百菌清、三乙膦酸铝、丙森锌、代 森锰锌、几丁聚糖、甲霜灵、申嗪霉素等单剂或复配。 5.2 播种及采摘果实要求 常规播种。参试的所有源于田间的茄子品种（材料）与对照品种应满足水肥、施药、栽培和管理水 平等条件均匀、一致。采摘参试的果龄相近或一致，均为当季。 6 接种体选择、制备与保存 6.1 接种体的选择 辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici选择毒性最强的生理小种菌株进行接种， Phytophthora capsici 的生理小种鉴定方法依据农业行业标准 NY/T2060.1 辣椒抗病性鉴定技术规程；烟草疫霉 P

6、hytophthora cicotinanae等其他菌暂无生理小种报道，选择源于茄子主产区的强毒性菌株进行接种与 鉴定。 6.2 接种体的繁殖与制备 接种体繁殖方法为：菌丝体接种于V8培养基上，黑暗培养3d后，光照培养34d；产生孢子囊后， 无菌水冲洗平板，将获得的孢子囊悬浮液先后置于4和25中各15min，诱导产生游动孢子后，用血球 计数板计算游动孢子浓度，配成1 10 5 个游动孢子/mL，备用。 6.3 接种体保存 将茄子绵疫病菌接种于V8或PDA斜面培养基上，25 培养3d，斜面上加一层灭菌矿物油，超斜面顶 部1cm，于16保存，每3个月转接、活化。 7 室内抗病性鉴定 7.1 鉴定设

7、计 参鉴品种随机排列或顺序排列，重复3次，每重复至少20个果实，每个果实均来自于不同茄子植株， 且大小均匀一致。 7.2 鉴定对照品种（材料） 设园杂5号茄子为感病对照品种。 7.3 接种方法 将成熟、新鲜茄子果实带回室内，用无菌水洗净，75%的 乙醇表面消毒，超净工作台内吹干茄子表 面水分。用无菌接种针轻轻刺伤（深度约1mm）茄子果实表面，滴加20L孢子悬浮液于茄子果实刺伤处， 孢子悬浮液的浓度为10 5 个游动孢子/mL，于25、相对湿度（RH）70%的条件下，黑暗保湿4d后开始 调查发病情况。 8 病情调查与抗病性评价 DB51/T 26042019 3 8.1 病情调查与数据处理 接种

8、后2d后开始显症，接种96h后调查病情指数。 按附录A描述的茄子症状调查。调查全部果实，记载总果实、各病果病级，根据各品种果实病级数 计算各品种的病情指数（DI）。病情指数（DI）按公式（I）计算。果实病级划分标准依据附录B进行。 式中： DI病情指数； s各病情级别代表数值； n各病情级别病果数； N调查总果数； S最高病情级别代表值。 8.2 抗病性评价 8.2.1 有效性判别 当感病对照品种园杂5号的病情指数（DI）80.0，该批次抗绵疫病性鉴定视为有效。 8.2.2 抗性评价 依据鉴定品种（材料）3次重复的病情指数（DI）的平均值确定其对绵疫病的抗性水平，划分标准 见表1。初次评价为中

9、抗以上的品种，需重复鉴定3次，以确定其抗病性水平。 表1 茄子抗绵疫病性评价及分级标准 病情指数（DI） 抗性评价 0.00DI5.00 高抗（HR） 5.00DI10.00 抗病（R） 10.00DI20.00 中抗（MR） 20.00DI30.00 中感（MS） 30.00DI50.00 感病（S） DI50.00 高感（HS） 9 记载、鉴定评价 茄子抗绵疫病性鉴定原始数据记载及抗病性评价表格见附录C。 DB51/T 26042019 4 A A 附 录 A （资料性附录） 茄子绵疫病基本信息 A.1 茄子绵疫病菌描述 茄子绵疫病病原菌描述：由隶属于茸鞭生物界卵菌门疫霉属的菌物所致，辣椒

10、疫霉菌 Phytophthora capsici为主要病原菌，其他病原菌如 Phytophthora nicotianae烟草疫霉菌与辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici亲缘关系较近，互为姊妹种。 辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici菌丝无色、无隔膜，不规则分支，孢子囊球形、卵形、椭圆形等， 大小不等（约50m40m90m140m）（图A1-1）。 烟草疫霉菌 Phytophthora nicotianae的孢子囊形状与辣椒疫霉菌的孢子囊类似，大小（约26.38 m 45.77m26.36m 34.2m）小于辣椒疫霉菌 Phytophthora capsici（

11、图A1-2）。 图 A1-1 茄子绵疫病菌辣椒疫霉 Phytophthora capsici 孢子囊显微照片（40m） 图 A1-2 茄子绵疫病菌烟草疫霉菌 Phytophthora nicotianae 孢子囊显微照片（40m） DB51/T 26042019 5 A.2 茄子绵疫病菌侵染茄子果实症状 绵疫病在茄子的整个生育期均可致病，茎、叶、花、果实等部位都可表现症状，尤以在果实上的症 状最为明显，受害后呈水浸状变色，从局部向整果实发展，整果最终呈水浸状，湿度大时个别品种果实 上覆满白色菌丝体，失去食用价值，成为进一步的传染源（图A2-1、A2-2、A2-3）。 A2-1 A2-2 A2-

12、3 A2-1：整株症状； A2-2：果实上产生菌丝体； A2-3：发病的离体果实 图A2 茄子绵疫病在果实上的典型症状 A.3 茄子绵疫病菌侵染循环及危害情况 主要以卵孢子随病残组织在土壤中越冬，随雨水飞溅至果实，形成初侵染；发病后病斑上产生大量 孢子囊，萌发形成游动孢子，借流水、雨水传播，也可随农具或农事操作传播，引起再侵染；秋后在病 组织中形成卵孢子越冬。 茄子绵疫病常不但危害田间生长中的茄子，造成产量锐减，而且在茄子运输、贮藏乃至销售过程中 潜育隐症，条件适宜后显症引起大批果实腐烂，经济损失惨重。 DB51/T 26042019 6 B B 附 录 B （资料性附录） 茄子绵疫病调查分级

13、标准 B.1 茄子绵疫病病情严重度调查分级标准 每个果实按病斑占整果面积的百分比做为分级标准： 0级：无病斑； 1级：病斑面积占整个果面积的1/32以下； 3级：病斑面积占整个果面积的1/321/16； 5级：病斑面积占整个果面积的1/161/8； 7级：病斑面积占整个果面积的1/81/4； 9级：病斑面积占整个果面积的1/4以上。 DB51/T 26042019 7 C C 附 录 C （资料性附录） 茄子抗绵疫病性室内抗性鉴定原始数据记录及评价表 C.1 茄子品种（材料）抗绵疫病性鉴定原始数据记载表 试验地点： 播种时间： 防治病虫害药剂种类及时间： 果实采样所处生育期及时间： 接种病原菌种类及生理小种类型： 病原菌活化日期： 病原菌接种日期： 绵疫病病情调查日期： 调查人： 记载人： 病情分级 品种编号 重复 果实编号 0 1 3 5 7 9 第1果 第2果 I 第1果 第2果 II 第1果 第2果 III C.2 茄子品种（材料）抗绵疫病性室内鉴定评价表 品种 编号 品种 名称 来源 茄子类别及描述 病原菌种及 生理小种类型 病情指数 抗性评价 鉴定人（签名）： 审核人（签名）： 鉴定单位（盖章）： 年 月 日 _ DB51/T 26042019