HJ 347.2－2018 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法.pdf

1、中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 347.22018 部分代替 HJ/T 3472007 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法 Water qualityDetermination of fecal coliformManifold zymotechnics 2018-12-26发布 2019-06-01实施 生 态 环 境 部 发 布 HJ 347.22018 i 中华人民共和国生态环境部 公 告 2018年 第73号 为贯彻中华人民共和国环境保护法，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作， 现批准水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法等五项标准为国家环境保护标准，并予发布。 标准名称、

2、编号如下。 一、水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法（ HJ 347.12018）； 二、水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法（ HJ 347.22018）； 三、水质 细菌总数的测定 平皿计数法（ HJ 10002018）； 四、水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法（ HJ 10012018）； 五、水质 丁基黄原酸的测定 液相色谱-三重四极杆串联质谱法（ HJ 10022018）。 以上标准自 2019 年 6 月 1 日起实施，由中国环境出版集团出版，标准内容可在生态环境部网站 （ 自以上标准实施之日起，水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）（ HJ/T 347

3、 2007）废止。 特此公告。 生态环境部 2018年12月26日 HJ 347.22018 iii 目 次 前 言.iv 1 适用范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 方法原理.1 5 干扰和消除.1 6 试剂和材料.2 7 仪器和设备.2 8 样品.3 9 分析步骤.3 10 结果计算与表示.5 11 精密度和准确度.5 12 质量保证和质量控制.6 13 废物处理.6 附录A（资料性附录） 最大可能数（MPN）表.7 附录B（资料性附录） 粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式.11 HJ 347.22018 iv 前 言 为贯彻中华人民共和国环境保护法和中华人民共和国水污

4、染防治法，保护生态环境，保障 人体健康，规范水中粪大肠菌群的测定方法，制定本标准。 本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的多管发酵法。 本标准是对水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）（ HJ/T 3472007）多管发 酵法部分的修订。 本标准首次发布于2007年，原起草单位为中国环境监测总站。本次为第一次修订。 本次修订的主要内容如下： 完善了方法原理的表述； 增加了12管法和15管法的检出限； 分析步骤中增加了12管法，完善了样品稀释方法； 增加了规范性引用文件、术语和定义、干扰和消除、仪器和设备、样品采集、样品保存、精密 度和准确度、质量保证和质量

5、控制、废物处理等章节； 将MPN表移至附录中。 自本标准实施之日起，水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）（ HJ/T 3472007） 废止。 本标准的附录A和附录B为资料性附录。 本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。 本标准起草单位：辽宁省环境监测实验中心。 本标准验证单位：大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、锦州市环境监测中心站、辽阳市 环境监测站、沈阳市疾病预防控制中心和辽宁北方环境检测技术有限公司。 本标准生态环境部2018年12月26日批准。 本标准自2019年6月1日起实施。 本标准由生态环境部解释。 HJ 347.22018 1 水质 粪大

6、肠菌群的测定 多管发酵法 1 适用范围 本标准规定了测定水中粪大肠菌群的多管发酵法。 本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。 本方法的检出限：12管法为3 MPN/L；15管法为20 MPN/L。 2 规范性引用文件 本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 14581 水质 湖泊和水库采样技术指导 HJ 494 水质 采样技术指导 HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 粪大肠菌群 fecal coliforms 又称耐热大肠菌群（thermotolera

7、nt coliforms）。 44.5培养24 h，能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼 性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。 3.2 最大可能数 most probable number（MPN） 又称稀释培养计数，是一种基于泊松分布的间接计数法。利用统计学原理，根据一定体积不同稀释 度样品经培养后产生的目标微生物阳性数，查表估算一定体积样品中目标微生物存在的数量（单位体积 存在目标微生物的最大可能数）。 4 方法原理 将样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中，37初发酵富集培养，大肠菌群在培养基中生长繁殖 分解乳糖产酸产气，产生的酸使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色，产生的气体进入倒管中，指示产气。 44.5复发

8、酵培养，培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长，最后产气的细菌确定为是粪大肠 菌群。通过查MPN表，得出粪大肠菌群浓度值。 5 干扰和消除 5.1 活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集（8.1）时加入 硫代硫酸钠溶液（6.7）消除干扰。 HJ 347.22018 2 5.2 重金属离子具有细胞毒性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集（8.1） 时加入乙二胺四乙酸二钠溶液（6.8）消除干扰。 6 试剂和材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂，实验用水为蒸馏水或去离 子水。 6.1 乳糖蛋白胨培养基。 蛋白胨

9、10 g 牛肉浸膏 3 g 乳糖 5 g 氯化钠 5 g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1 ml 将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1 000 ml水中，调节pH至7.27.4，再加入1.6% 溴甲酚紫乙醇溶液1 ml，充分混匀，分装于含有倒置小玻璃管的试管中，115高压蒸汽灭菌20 min， 储存于冷暗处备用。也可选用市售成品培养基。 6.2 三倍乳糖蛋白胨培养基：称取三倍的乳糖蛋白胨培养基（6.1）成分的量，溶于1 000 ml水中，配 成三倍乳糖蛋白胨培养基，配制方法同上。 6.3 EC培养基。 胰胨 20 g 乳糖 5 g 胆盐三号 1.5 g 磷酸氢二钾 4 g 磷酸二氢钾 1.

10、5 g 氯化钠 5 g 将上述成分或含有上述成分的市售成品加热溶解于 1 000 ml 水中，然后分装于有玻璃倒管的试管 中，115高压蒸汽灭菌20 min，灭菌后pH应在6.9左右。 注：配制好的培养基（6.16.3）避光、干燥保存，必要时在53冰箱中保存，通常瓶装及试管装培养基不超 过36个月。配制好的培养基要避免杂菌侵入和水分蒸发，当培养基颜色变化，或体积变化明显时废弃不用。 6.4 无菌水：取适量实验用水，经121高压蒸汽灭菌20 min，备用。 6.5 硫代硫酸钠（Na2S2O35H2O）。 6.6 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2O8Na22H2O）。 6.7 硫代硫酸钠溶液：r

11、（Na2S2O3）=0.10 g/ml 称取15.7 g硫代硫酸钠（6.5），溶于适量水中，定容至100 ml，临用现配。 6.8 乙二胺四乙酸二钠溶液：r（C10H14N2O8Na22H2O）=0.15 g/ml 称取15 g乙二胺四乙酸二钠（6.6），溶于适量水中，定容至100 ml，此溶液可保存30 d。 7 仪器和设备 7.1 采样瓶：500 ml带螺旋帽或磨口塞的广口玻璃瓶。 7.2 高压蒸汽灭菌器：115、121可调。 7.3 恒温培养箱或水浴锅：允许温度偏差370.5、440.5。 7.4 pH计：准确到0.1 pH单位。 HJ 347.22018 3 7.5 接种环：直径3 m

12、m。 7.6 试管：300 ml、50 ml、20 ml。 7.7 一般实验室常用仪器和设备。 注：玻璃器皿及采样器具试验前要按无菌操作要求包扎，121高压蒸汽灭菌20 min备用。 8 样品 8.1 样品采集 点位布设及采样频次按照GB/T 14581、HJ/T 494和HJ/T 91的相关规定执行。 采集微生物样品时，采样瓶（7.1）不得用样品洗涤，采集样品于灭菌的采样瓶中。清洁水体的采 样量不低于400 ml，其余水体采样量不低于100 ml。 采集河流、湖库等地表水样品时，可握住瓶子下部直接将带塞采样瓶插入水中，距水面1015 cm 处，瓶口朝水流方向，拔瓶塞，使样品灌入瓶内然后盖上瓶

13、塞，将采样瓶从水中取出。如果没有水 流，可握住瓶子水平往前推。采样量一般为采样瓶容量的80%左右。样品采集完毕后，迅速扎上无 菌包装纸。 从龙头装置采集样品时，不要选用漏水龙头，采水前将龙头打开至最大，放水 35 min，然后将 龙头关闭，用火焰灼烧约3 min灭菌或用70%75%的酒精对龙头进行消毒，开足龙头，再放水1 min， 以充分除去水管中的滞留杂质。采样时控制水流速度，小心接入瓶内。 采集地表水、废水样品及一定深度的样品时，也可使用灭菌过的专用采样装置采样。 在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰。 如果采集的是含有活性氯的样品，需在采样瓶灭菌前加入硫代硫酸钠

14、溶液（6.7），以除去活性氯对 细菌的抑制作用（每125 ml容积加入0.1 ml的硫代硫酸钠溶液）；如果采集的是重金属离子含量较高的 样品，则在采样瓶灭菌前加入乙二胺四乙酸二钠溶液（6.8）， 以消除干扰（每 125 ml 容积加入 0.3 ml 的乙二胺四乙酸二钠溶液）。 注：15.7 mg硫代硫酸钠（6.5）可去除样品中1.5 mg活性氯，硫代硫酸钠用量可根据样品实际活性氯量调整。 8.2 样品保存 采样后应在2 h内检测，否则，应10以下冷藏但不得超过6 h。实验室接样后，不能立即开展检 测的，将样品于4以下冷藏并在2 h内检测。 9 分析步骤 9.1 样品稀释及接种 9.1.1 15

15、管法 将样品充分混匀后，在5支装有已灭菌的5 ml三倍乳糖蛋白胨培养基（6.2）的试管中（内有倒管）， 按无菌操作要求各加入样品10 ml，在5支装有已灭菌的10 ml单倍乳糖蛋白胨培养基（6.1）的试管中 （内有倒管），按无菌操作要求各加入样品1 ml，在5支装有已灭菌的10 ml单倍乳糖蛋白胨培养基（ 6.1） 的试管中（内有倒管），按无菌操作要求各加入样品0.1 ml。 对于受到污染的样品，先将样品稀释后再按照上述操作接种，以生活污水为例，先将样品稀释104 倍，然后按照上述操作步骤分别接种10 ml、1 ml和0.1 ml。15管法样品接种量参考表见表1。 当样品接种量小于 1 ml

16、时，应将样品制成稀释样品后使用。按无菌操作要求方式吸取 10 ml 充分 HJ 347.22018 4 混匀的样品，注入盛有 90 ml 无菌水（6.4）的三角烧瓶中，混匀成 110 稀释样品。吸取 110 的稀 释样品 10 ml 注入盛有 90 ml 无菌水的三角烧瓶中，混匀成 1100 稀释样品。其他接种量的稀释样品 依次类推。 注：吸取不同浓度的稀释液时，每次必须更换移液管。 生活饮用水等清洁水体也可使用12管法。 表1 15管法样品接种量参考表 接种量/ml 样品类型 10 1 0.1 102 103 104 105 水源水 湖泊（水库） 地表水 河流 生活污水 处理前 废水 工业废

17、水 处理后 地下水 9.1.2 12管法 将样品充分混匀后，在 2 支装有已灭菌的 50 ml 三倍乳糖蛋白胨培养基（6.2）的大试管中（内有 倒管），按无菌操作要求各加入样品100 ml，在10支装有已灭菌的5 ml三倍乳糖蛋白胨培养基（6.2） 的试管中（内有倒管），按无菌操作要求各加入样品10 ml。 9.2 初发酵试验 将接种（9.1）后的试管，在370.5下培养24 h2 h。 发酵试管颜色变黄为产酸，小玻璃倒管内有气泡为产气。产酸和产气的试管表明试验阳性。如在倒 管内产气不明显，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性。 9.3 复发酵试验 轻微振荡在初发酵试验（9.2）中显示为阳性或疑似

18、阳性（只产酸未产气）的试管，用经火焰灼烧 灭菌并冷却后的接种环（7.5）将培养物分别转接到装有EC培养基（6.3）的试管中。在44.50.5 下培养24 h2 h。转接后所有试管必须在30 min内放进恒温培养箱或水浴锅（7.3）中。培养后立即观 察，倒管中产气证实为粪大肠菌群阳性。 9.4 对照试验 9.4.1 空白对照 每次试验都要用无菌水（6.4）按照步骤9.19.3进行实验室空白测定。 9.4.2 阳性及阴性对照 将粪大肠菌群的阳性菌株（如大肠埃希氏菌Escherichia coli）和阴性菌株（如产气肠杆菌Enterobacter aerogenes）制成浓度为3003000 MPN

19、/L的菌悬液，分别取相应体积的菌悬液按接种（9.1）的要求接 种于试管中，然后按初发酵试验（9.2）和复发酵试验（9.3）要求培养，阳性菌株应呈现阳性反应，阴 性菌株应呈现阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。 HJ 347.22018 5 10 结果计算与表示 10.1 结果计算 接种12份样品时，查附录A中表A.1可得每升粪大肠菌群MPN值。 接种15份样品时，查附录A中表A.2得到MPN值，再按照式（1）换算样品中粪大肠菌群数（ MPN/L）： MPN100C f = 值 （1） 式中：C样品中粪大肠菌群数，MPN/L； MPN值每100 ml样品中粪大肠菌群数，M

20、PN/100 ml； 100为 1010 ml，其中，10 将MPN值的单位MPN/100 ml 转换为 MPN/L，10 ml 为 MPN 表中最大接种量； f实际样品最大接种量，ml。 10.2 结果表示 测定结果保留至整数位，最多保留两位有效数字，当测定结果100 MPN/L 时，以科学计数法表 示；当测定结果低于检出限时，12 管法以“未检出”或“3 MPN/L”表示；15 管法以“未检出”或 “20 MPN/L”表示。粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式参见附录B。 11 精密度和准确度 11.1 精密度 6个实验室对低浓度（地下水，浓度均值为54 MPN/L）、中浓度（地表水，浓度均值

21、为2.7104 MPN/L） 和高浓度（生活污水，浓度均值为2.8107 MPN/L）三个不同浓度粪大肠菌群的实际样品和有证标准样 品（浓度为3 670 MPN/L，可接受范围为3307 710 MPN/L）进行了6次重复测定：实验室内相对标 准偏差范围分别为2.3%3.8%、2.0%11%、1.1%5.4%和5.1%17%；实验室间相对标准偏差分别 为3.4%、11%、1.6%和5.4%；实验室间95%置信区间见表2。 表2 实验室间95%置信区间 低浓度/（MPN/L） 中浓度/（MPN/L） 高浓度/（MPN/L） 有证标准样品/（MPN/L） 均值 95%置信区间 均值 95%置信区间

22、 均值 95%置信区间 均值 95%置信区间 54 4762 2.7104 9.61037.9104 2.8107 2.210 7 3.6107 3 725 2 4135 751 11.2 准确度 6个实验室对含粪大肠菌群浓度为3 670 MPN/L（可接受范围为3307 710 MPN/L）的标准样品进 行了6次重复测定：相对误差范围为6.2%8.4%；相对误差最终值为1.7%10.6%。 注：微生物检测数据为偏态分布，其测定结果全部经以10为底对数转换后进行计算。 HJ 347.22018 6 12 质量保证和质量控制 12.1 培养基检验 更换不同批次培养基时要进行阳性和阴性菌株检验，将

23、粪大肠菌群的阳性菌株（如大肠埃希氏菌 Escherichia coli）和阴性菌株（如产气肠杆菌 Enterobacter aerogenes）制成浓度为 3003 000 MPN/L 的菌悬液。若使用的是定性标准菌株，配制方法为先进行预实验，摸清浓度后按目标为 300 3 000 MPN/L稀释；若使用的是定量标准菌株，则可按照给定值直接稀释。稀释后分别取相应水量的菌 悬液按接种（9.1）的要求接种于试管中，然后按初发酵试验（9.2）和复发酵试验（9.3）要求培养，阳 性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现阴性反应。 12.2 对照试验 12.2.1 空白对照 每次试验都要用无菌水做实验室空白

24、测定（9.4.1），培养后的试管中不得有任何变色反应。否则， 该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。 12.2.2 阳性及阴性对照 定期按照9.4.2进行阳性及阴性对照试验，阳性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现阴性反应， 否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。 13 废物处理 使用后的废物及器皿须经 121高压蒸汽灭菌 30 min 或使用液体消毒剂（自制或市售）灭菌。灭 菌后，器皿方可清洗，废物作为一般废物处置。 HJ 347.22018 7 附 录 A （资料性附录） 最大可能数（MPN）表 表A.1 12管法最大可能数（MPN）表 100 ml样品量的阳性瓶数 0 1

25、 2 10 ml样品量的阳性管数 1 L样品中粪大肠菌群数 1 L样品中粪大肠菌群数 1 L样品中粪大肠菌群数 0 3 4 11 1 3 8 18 2 7 13 27 3 11 18 38 4 14 24 52 5 18 30 70 6 22 36 92 7 27 43 120 8 31 51 161 9 36 60 230 10 40 69 230 注：接种2份100 ml样品，10份10 ml样品，总量300 ml。 表A.2 15管法最大可能数（MPN）表 各接种量阳性份数 95%置信限 各接种量阳性份数 95%置信限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限

26、 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 0 0 0 2 3 0 0 8 1 19 0 0 1 2 0.5 7 3 0 1 11 2 25 0 0 2 4 0.5 7 3 0 2 13 3 31 0 0 3 5 3 0 3 16 0 0 4 7 3 0 4 20 0 0 5 9 3 0 5 23 0 1 0 2 0.5 7 3 1 0 11 2 25 0 1 1 4 0.5 11 3 1 1 14 4 34 0 1 2 6 0.5 15 3 1 2 17 5 46 0 1 3 7 3 1 3 20 6 60 0 1 4 9 3 1 4 23 0 1 5 11 3

27、1 5 27 0 2 0 4 0.5 11 3 2 0 14 4 34 0 2 1 6 0.5 15 3 2 1 17 5 46 0 2 2 7 3 2 2 20 6 60 0 2 3 9 3 2 3 24 0 2 4 11 3 2 4 27 HJ 347.22018 8 续表 各接种量阳性份数 95%置信限 各接种量阳性份数 95%置信限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 0 2 5 13 3 2 5 31 0 3 0 6 0.5 15 3 3 0 17 5 46 0 3 1 7 3 3

28、 1 21 7 63 0 3 2 9 3 3 2 24 0 3 3 11 3 3 3 28 0 3 4 13 3 3 4 32 0 3 5 15 3 3 5 36 0 4 0 8 3 4 0 21 7 63 0 4 1 9 3 4 1 24 8 72 0 4 2 11 3 4 2 28 0 4 3 13 3 4 3 32 0 4 4 15 3 4 4 36 0 4 5 17 3 4 5 40 0 5 0 9 3 5 0 25 8 75 0 5 1 11 3 5 1 29 0 5 2 13 3 5 2 32 0 5 3 15 3 5 3 37 0 5 4 17 3 5 4 41 0 5 5 19

29、 3 5 5 45 1 0 0 2 0.5 7 4 0 0 13 3 31 1 0 1 4 0.5 11 4 0 1 17 5 46 1 0 2 6 0.5 15 4 0 2 21 7 63 1 0 3 8 1 19 4 0 3 25 8 75 1 0 4 10 4 0 4 30 1 0 5 12 4 0 5 36 1 1 0 4 0.5 11 4 1 0 17 5 46 1 1 1 6 0.5 15 4 1 1 21 7 63 1 1 2 8 1 19 4 1 2 26 9 78 1 1 3 10 4 1 3 31 1 1 4 12 4 1 4 36 1 1 5 14 4 1 5 42 1

30、2 0 6 0.5 15 4 2 0 22 7 67 1 2 1 8 1 19 4 2 1 26 9 78 1 2 2 10 2 23 4 2 2 32 11 91 1 2 3 12 4 2 3 38 1 2 4 15 4 2 4 44 1 2 5 17 4 2 5 50 1 3 0 8 1 19 4 3 0 27 9 80 1 3 1 10 2 23 4 3 1 33 11 93 1 3 2 12 4 3 2 39 13 110 1 3 3 15 4 3 3 45 1 3 4 17 4 3 4 52 1 3 5 19 4 3 5 59 HJ 347.22018 9 续表 各接种量阳性份数 9

31、5%置信限 各接种量阳性份数 95%置信限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 1 4 0 11 2 25 4 4 0 34 12 93 1 4 1 13 4 4 1 40 14 110 1 4 2 15 4 4 2 47 1 4 3 17 4 4 3 54 1 4 4 19 4 4 4 62 1 4 5 22 4 4 5 69 1 5 0 13 4 5 0 41 16 120 1 5 1 15 4 5 1 48 1 5 2 17 4 5 2 56 1 5 3 19 4 5 3 64 1 5

32、 4 22 4 5 4 72 1 5 5 24 4 5 5 81 2 0 0 5 0.5 13 5 0 0 23 7 70 2 0 1 7 1 17 5 0 1 31 11 89 2 0 2 9 2 21 5 0 2 43 15 110 2 0 3 12 3 28 5 0 3 58 19 140 2 0 4 14 5 0 4 76 24 180 2 0 5 16 5 0 5 95 2 1 0 7 1 17 5 1 0 33 11 93 2 1 1 9 2 21 5 1 1 46 16 120 2 1 2 12 3 28 5 1 2 63 21 150 2 1 3 14 5 1 3 84 26

33、200 2 1 4 17 5 1 4 110 2 1 5 19 5 1 5 130 2 2 0 9 2 21 5 2 0 49 17 130 2 2 1 12 3 28 5 2 1 70 23 170 2 2 2 14 4 34 5 2 2 94 28 220 2 2 3 17 5 2 3 120 33 280 2 2 4 19 5 2 4 150 38 370 2 2 5 22 5 2 5 180 44 520 2 3 0 12 3 28 5 3 0 79 25 190 2 3 1 14 4 34 5 3 1 110 31 250 2 3 2 17 5 3 2 140 37 340 2 3

34、3 20 5 3 3 180 44 500 2 3 4 22 5 3 4 210 53 670 2 3 5 25 5 3 5 250 77 790 2 4 0 15 4 37 5 4 0 130 35 300 2 4 1 17 5 4 1 170 43 490 2 4 2 20 5 4 2 220 57 700 2 4 3 23 5 4 3 280 90 850 2 4 4 25 5 4 4 350 120 1 000 2 4 5 28 5 4 5 430 150 1 200 2 5 0 17 5 5 0 240 68 750 HJ 347.22018 10 续表 各接种量阳性份数 95%置信

35、限 各接种量阳性份数 95%置信限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 10 ml 1 ml 0.1 ml MPN/100 ml 下限 上限 2 5 1 20 5 5 1 350 120 1 000 2 5 2 23 5 5 2 540 180 1 400 2 5 3 26 5 5 3 920 300 3 200 2 5 4 29 5 5 4 1 600 640 5 800 2 5 5 32 5 5 5 2 400 800 注1：接种5份10 ml样品、5份1 ml样品、5份0.1 ml样品。 注2：如果有超过三个的稀释度用于检验，在一系列的十进稀释当中，计算

36、 MPN时，只需要用其中依次三个的稀释度， 取其阳性组合。选择的标准是：先选出5支试管全部为阳性的最大稀释（小于它的稀释度也全部为阳性试管）， 然后再加上依次相连的两个更高的稀释。用这三个稀释度的结果数据来计算MPN值。 HJ 347.22018 11 附 录 B （资料性附录） 粪大肠菌群检验记录及报告推荐格式 表B.1 粪大肠菌群测定检验记录 项目名称： 检验日期： 年 月 日 检验方法 方法依据 灭菌锅型号 出厂编号 培养箱型号 出厂编号 培养基灭菌温度/ 培养温度/ 样品编号： 查表结果：粪大肠菌群数 MPN/100 ml 稀释度： 结果： MPN/L 标本接种/ml 初发酵 复发酵 阳性管数/个 检验者： 校对： 审核： 注1：初发酵和复发酵后面的表格里，产酸产气的用“+”表示，否则用“”表示。 注2：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述信息。 表B.2 粪大肠菌群测定数据报告 样品来源 采/送样日期 分析日期 样品数量 样品状态 监测点位 样品编号 监测频次 标准方法名称 标准方法编号 测定值： 监测结果： 备注 注：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述信息。