LY T 1926-2020 人造板与木（竹）制品抗菌性能检测与分级.pdf

1、ICS 79.080 CCS B 69 中华人民共和国 林业行业 标准 LY/T 1926 2020 代替 LY/T 1926 2010 人造板 与 木（竹） 制品 抗菌性能 检测 与 分级 Test method for evaluating the antibacterial performance of wood (bamboo)-based panels and products 20201229 发布 20210601 实施 国家 林业 和 草原 局 发布 LY LY/T 1926-2020 前 言 本 文件 按照 GB/T 1.1 2020 标准化工作导则 第 1 部分 :标准化文

2、件的结构和起草规则 给出的规则起草。 本 文件 代替 LY/T 1926-2010 抗菌木（竹）质地板 抗菌性能检验方法与抗菌效果 。 与 LY/T 1926-2010相比，除编辑性修改外，主要技术 内容 变化如下： 文件 名称 修改 为 人造板 与 木（ 竹） 制品 抗菌 性能 检测 与 分级 1 修改 了 适用 范围 ； 3 术语 与 定义 部分， 修改 3.1 抗菌 处理 ，明确抗菌范围，专指抗细菌功能 ； 增加 3.2 抗菌率 定义 ； 在 4.1 条款中明确细菌测试方法为贴膜法 ； 增加了“ 4.2 试验条件 ” ， 要求 “细 菌 测试实验室应符合 GB 19489 的 规定 ”；

3、 菌种 ATCC 代码说明： 美国 典型菌种保藏中心 代码； 4.8.1 阴性对照样 （ A） 的操作是不接种细菌仅滴加无菌水的； 样 本数量 从 5 改 为 3（ 重复一次 ，则共有 6 块样本 ） ； 4.10.1 检 测 结果要求条款中增加了对阴性对照的作用要求； 去掉 霉菌相关测试内容 ； 增加了“ 5 抗菌 性能 分级 ” 内容； 增加 6 检 测 报告条款 。 本 文件 由 全国人造板 标准化技术委员 会 （ SAC/TC198） 提出并 归口。 本 文件 修订 单位： 中国林业科学研究院 木材工 业 研 究 所 、 国家人造板与木竹制品质 量 监 督 检验 中心 、 浙江 农林

4、大学 、 德华兔宝宝装饰新材股份有限公司 、 巴洛 克木 业（中山）有限 公司 、 肇庆 市 现代 筑 美 家 居 有限公司 、 瑞通高分子科技（浙江）有限公司 、 圣象集团有限公 司 、 天津 市 盛世德 新 材料 科技 有限公司、 广东 天元 汇邦 新 材料 股份 有限公司、 德尔 未来 科技 控股 集团 股份 有限 公司 、 书香门地集团股份有限公司 、 广州市 巢派木 业有限公司 。 本 文件 主 要 起草 人 ：马 星霞 、 吕斌 、 付跃进 、 孙芳利 、 张斌 ， 张晓伟 、 林 德 英 、 钟耀灿 、 淳华 、 范文明 、 李 振 、 戴炎 梅 、 姚红 鹏 、 卜立 新 、

5、梁发国 。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为 ： 2010 年首次发布为 LY/T 1926-2010； 本次为第一次修订。 LY T 1926 20XX 人造板 与 木 (竹 )制品 抗菌性能 检测 与 分级 1 范围 本 文件 规定了 人造板 与 木 (竹 )制品 的 抗菌 性能检 测 方法 和 分级 的 术语和定义、 抗 菌性能 检 测 方法 和 分级 。 本 文件 适用 于 抗菌 处理 的 人造板 和 各种 抗菌 木 (竹 )制品 的抗 菌性能 检 测 和 分级 。 本 文件 不 涉及 抗菌 产品 的 安全性 评价。 2 规 范 性引 用文件 下列文件的内容通过文中的 规范性引

6、用而构成本文件必 不可少的条款。其中，注日期的 引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所 有的修改单）适用于本文件。 注：对于不注日期的引用文件，如果最新版本为包含所引用的内容，那么包含了所引用 内容的最后版本适用。 GB 4789.2-2016 食品 安全 国家 标准 食品 微生物学检验 菌落总数测定 GB 19489 实验室 生物安全 通用要求 WS/T 650-2019 抗菌 和 抑菌 效果 评价 方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 文件 。 3.1 抗 菌 处理 antibacterial treatment 采用机械 、物理或 化学的

7、方法 来 干扰、 抑制细菌 的生长 和 繁殖， 减少 其 数量 或 直接 杀灭 细菌 的 过程 。 3.2 抗菌率 antibacterial rate 测试 样品 与 对照 样品 接种 受 试 菌 一定 时间 后 其 平均 回收 菌 数 之 差 与 对照 样 品 平均 回收 菌数 的 百分比 称 该 测试 样品 的 抗菌率 。 4 检 测 方法 4.1 原理 该抗菌测试方法 参照 WS/T 650-2019 标准 中 所 用 贴膜法， 即 通过 将 细菌 接种 于 待测 样 品 表面 ， 然后用塑料薄膜覆盖， 使细菌均匀 并 充分 接 触被检测样品表面，在规定 条件下 经过 一定 时间 培养

8、达到一定细菌数后，按平板活菌计数法计算 被 检样品 细菌 存活 数， 通过 计算 得 出 抗菌率 ， 评价 抗菌 效果 的 方法 。 4.2 试验条件 细菌测试实验室应符合 GB 19489 的 规定 。 4.3 主要仪器和 设备 恒温培养箱 （ 能 保持 温度 在 37 2 ） 冷 藏 箱 （ 能 保持 温度 在 0-5 ） 超净工作台 （ 洁 净 等级 不低 于 100 级） 生物光 学显微镜 （ 200 400 ） 压力蒸汽灭菌器 （ 能 保持 121 的 温度 和 103kpa 的 压力） 电 热 干燥箱 （ 能 保持 温度 在 160-180 ） 接种环 （ 直径 不大于 4mm）

9、4.4 覆 盖 膜 聚乙烯薄膜，尺寸为 40mm 40mm 0.05mm，用 75%乙醇溶液浸泡 1min，再用无菌水或 洗脱 液冲洗，自然干燥后 备用。 4.5 培养基 4.5.1 液体 LB 培养基 酵母提取 物 5.0g 胰 蛋白胨 10.0g 氯化 钠 5.0g 制法： 取上述成分一次加入 1000mL 蒸 馏 水中，加热溶解后，用 0.1mol/L 氢氧化钠溶液 调节 pH 值为 7.0-7.2 之间，分装后置于压力蒸汽 灭 菌 器中 121灭菌 30min。 4.5.2 固 体 LB 培养基 1000mL 液 体 LB 培 养 基 中加入 15g 琼脂，加热熔化，用 0.1mol/

10、L 氢氧化钠溶液调节 pH 值为 7.0-7.2 之间，分装后置于压力蒸汽灭菌器中 121灭菌 30min。 4.6 试剂 4.6.1 消毒 液 75%乙醇 消毒液 。 4.6.2 洗脱液 含 0.85%氯化 钠的 生理 盐水。用 0.1mol/L 氢氧化钠溶液或 0.1mol/L 的盐酸溶液调节 pH 值为 7.0-7.2 之间，分装 后置于压力蒸汽灭菌器中 121灭菌 30min。 4.6.3 培养液 液体 LB 培 养 基 /生 理盐水溶液， 用于大肠杆菌接种液的浓度为 1/500（ 体积比） ，金黄 色葡 萄球菌接 种 液的浓度 为 1/100（ 体积比） 。为 便于细菌分散 可加入

11、0.2%的无菌表面活性 剂（如吐温 80）。用 0.1mol/L 氢氧化钠溶液或 0.1mol/L 的盐酸溶液调节 pH 值 ， 使其在 （ 25 1） 时 为 7.0-7.2 之间， 分装 后置于 压力蒸 汽灭菌器中 121 灭菌 30min。 4.7 检 测 菌种 检 测 菌种 应 符合 表 1 的 规定。 表 1 抗菌 性能检 测 菌种 序号 菌种名 称 对应 美国 典型菌种保藏中心 代码 1 金黄色葡萄球菌（ Staphylococcus aureus） ATCC 6538 2 大肠杆菌（ Escherichia coliform) ATCC 25922 注 ： 根据用户要求，可以增

12、加其他菌种作为检 测 用菌种，但所用菌种需由国家级菌种保藏管 理中心提 供 。 4.8 试件准备和处理 4.8.1 阴性对照 试样 直径 90mm 的灭 菌 培养 平皿， 编号 A。 4.8.2 空 白对照 试样 采用与受检 样品 相同 的材料、相同的加工工艺制成的未经抗菌处理 的 人造板 或 木（竹） 制品 ， 裁制成尺寸为（ 50 1） mm（ 50 1） mm 的试样 ，编号为 B。 4.8.3 抗 菌 处理 人造板 或 木（竹 ） 制品 试样 选取 经过 抗菌 处理 的 各种 人造板 或 木（竹） 制品 ， 裁 制成尺 寸为（ 50 1） mm（ 50 1） mm 的试样，编号为 C。

13、 4.8.4 试样数量 以上 阴性、 空白 对照 、 抗菌 处理 的 每一类 试样数量均应不少于 6 个。检 测 前应进行 表面 消毒，用 75%乙醇溶 液擦拭样品表面， 1min 后用 无 菌 水冲洗 ，自然晾干备用。 4.9 检 测 步骤 4.9.1 菌种保藏 菌株 接种于营养培养基斜面上，在 37 2下培养 24h，在 0-5下 保藏（不超过 1 个 月），作为斜面保存菌。 4.9.2 菌种活化 将斜 面保藏菌种转接到平板培养基上，在 37 2下培养 24h， 每天转 接 一次，不 超过 2 周。试验时应 采用 24h 内转接的新 鲜细菌培养 物。 4.9.3 菌 悬液的制 备 用 接种

14、 环从 4.9.2 培养基上取少量 (刮 1 2 环 )新鲜 细菌加入接种液中，培养 24 h 后， 依次做 10 倍递增稀释液，选择菌 液浓度为 5.0 105 CFU mL 10.0 105 CFU mL 的稀释液 作为检 测 菌液，按 GB T 4789.2-2016 规定的方 法操作。 4.9.4 样品试 验 分别取 0.2 mL 检 测 菌液 4.9.3 滴加在空白对照样 （ B） 和抗 菌 处理 人造板 或 木 (竹 )制品 试样 （ C） 上， 同时取 0.2 mL 无菌水滴加在阴性对照样（ A） 上。 用灭 菌镊子夹起灭菌覆盖 膜分别覆盖在样 A、样 B 和样 C 上 ， 一

15、定要铺平，使菌均 匀接触样 品；置灭菌 平皿中，在 37 2 、相对湿度 90条件下培养 24 h。每个样品做 3 个平行。 取出培养 24 h 的样品，每片分 别加入 20 mL 洗 脱 液 ，反复洗样 A、样 B、 样 C 及覆盖膜 (最好用镊子夹起 薄膜冲洗 )，充 分摇匀后，取 0.5 mL 该洗液于灭菌平皿 内，倾注 入 15 mL 20 mL 冷至 45 2 的 固体 培养基 里 ，摇匀 凝固 后，在 37 2下培养 24 48 h 后 计 活 菌 数， 按 GB T 4789.2-2016 规定的方法操作。 以上试验重复 一次。 4.10 检 测 结果 要求 与计算 4.10.1

16、 检 测 结果要 求 将以上测定的 活菌数结 果根据稀释倍 数分别计算出样品 A、 B 和 C 培养 24h 后的实际回 收活菌数值，数值分别记为 Na、 Nb、 Nc，保证 试验结果同时满 足 以 下要求 ，否则试验无效。 （ a） 阴 性对 照应无菌生长 （ Na 为 0） ； （ b） 对照样本的 三个平 行活菌 数值要符合以下要求： （最高值 -最低值） /平均数 0.3； （ c） 对照样本不应有明显的抗菌作用，实际回收菌 落 数值 Nb 应不 小 于 1.0 104CFU/片 。 4.10.2 抗菌率计算 抗菌率计算见式（ 1）。 (1) 式 中 ： R： 抗菌率 ， %； Nb：

17、 空白 对照 样 平均回收菌数， CFU/片； Nc： 抗菌 处理 人造板 或 木 (竹 )制品 平均回收菌数， CFU/片 。 5 抗菌 性能 分级 5.1 两个 菌种 测试 计算 出来 试 样 的 抗菌率 不一致 的 情 况 下 ， 以 低 的 为 判定 标准。 5.2 抗菌 性能 分级 标准 抗菌 性能 分 级 标准 按 表 2 规定 进行 。 表 2 抗菌 性能 分级 抗菌 性能 指标 抗菌等级 抗 菌率 99% I 级 强抗菌 级 抗 菌率 90% II 级 抗菌 级 抗菌率 90% 不 抗菌 6 检 测 报告 检 测 报告 至少应给出以下几个方面的内容： 试验菌种、细菌保藏号、接种菌液浓度； 试样和对照 样情况； 依据 的标准 ； 结果 ： 抗 菌率及抗菌 性能 分级 ； 与基本 步骤的差异、观察到的 异常 现 象记载； 试验单位、试验人 ； 试验日期。 _