GA T 1789-2021 法庭科学 疑似易制毒化学品中羟亚胺检验 液相色谱-质谱、气相色谱-质谱和液相色谱法.pdf

1、 ICS 13.310 CCS A 92 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA GA/T 法庭科学 疑似易制毒化学品中羟亚胺 检验 液相色谱 -质谱、气相色谱 -质谱 和液相色谱法 Forensic sciences Examination methods for hydroxylimine in suspected precursors LC-MS,GC-MS and HPLC - -发布 - -实施 中华人民共和国公安部 发 布 GA/T I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起 草 。 请

2、注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本 文件 由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC 179/SC 1） 提出并 归口。 本 文件 起草单位：广西壮族自治区公安厅刑事侦查总队、公安部禁毒情报技术中心、南宁市公安局 刑事侦查支队。 本 文件 主要 起草人：黄克建、刘晓锋、乔文涛、杨宁、杨兰、李璐、刘培培、何国标、莫旖。 GA/T 1 法 庭科学 疑似易制毒化学品中羟亚胺检验 液相色谱 -质谱、气相色谱 -质谱和液相色谱法 1 范围 本 文件 规定了法庭科学领域疑似易制毒化品中羟亚胺的液相色谱 -三重四极 杆 质谱（ LC-TQ/M

3、S）、 液相色谱 -离子阱 质谱 （ LC-IT/MS） 、液相色谱 -离子阱 飞行时间 质谱（ LC-IT/TOF）、气相色谱 -质谱 （ GC-MS）结合液相色谱（ LC）定性检验方法和 LC 定量检验方法。 本 文件 适用于法庭科学领域疑似易制毒化品中羟亚胺的定性分析和定量分析。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不 可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件 。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 27418 测量不确定度评定与表示 G

4、A/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 、缩略语 3.1 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 3.2 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 LC-TQ/MS：液相色谱 -三重四极杆质谱（ liquid chromatography - triple quadrupole tandem mass spectrometry ） LC-IT/MS：液相色谱 -离子阱质谱（ liquid chromatography - ion trap mass spectrometry） LC-IT/TOF：液相色谱 -离子阱飞行时间质谱 （ Liquid chromatograp

5、hy - ion trap time - of - flight mass spectrometry） GC-MS： 气相色谱 -质谱（ gas chromatography - mass spectrography） LC： 液相色谱（ liquid chromatography） 4 原理 对疑似羟亚胺 （ 化合物 基本信息参见附录 A） 可疑样品进行提取。采用 LC-TQ/MS 多反应监测 （ MRM）、 LC-IT/MS 全扫描、 LC-IT/TOF 全扫描模式检测，以色谱保留时间、质谱特征离子和离子对 丰度比作为定性判断依据；或采用 GC-MS 结合 LC 检测，其中 GC-MS 以

6、保留时间、特征离子和离子 丰度比作为初步定性判断依据，再结合 LC 色谱保留时间和光谱图进行确认；采用 LC 检测，以色谱峰 面积作为定量依据，用外标 标 准曲线法进行定量 分析。 5 试剂 和 材料 GA/T 2 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682中规定的一级水，除 非 另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯，试 剂包括： a） 甲醇； b） 2.0 mol/L 醋酸铵溶液：称取 77g 醋酸铵，用水溶解，转移至 500mL 容量瓶中，用水稀释至刻 度，摇匀，得到 2.0 mol/L 醋酸铵溶液，冷藏保存，有效期 3 个月； c） 流动相 A： 0.01mol/L（ 0.1%甲

7、酸， v/v）醋酸铵溶液：量取 2.0 mol/L 醋酸铵溶液 5mL、甲酸 1.0mL 于 1000mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀后使用； d） 流动相 B： 0.1%甲酸 甲醇溶液 （ v/v） ； e） 初始流动相： 0.01mol/L（ 0.1%甲酸， v/v）醋酸铵溶液 /0.1%甲酸 甲醇溶液 （ v/v） =8/2（ v/v）； f） 标准溶液： 1）羟亚胺标准物质储备液：根据标准物质的纯度和盐型换算后，各称取适量，用甲醇配制成 1.0mg/mL羟亚胺标准物质储备溶液，密封， -18以下保存，有效期 3个月。或采用市售标 准溶液； 2）羟亚胺标准物质工作溶液： GC-MS定

8、性用标准工作溶液：移取羟亚胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，配制成 50g/mL的羟亚胺标准工作溶液。 04冷藏保存，有 效期 1个月； GC-MS定性质控标准工作溶液：移取羟亚胺标准物质储备液适量，用甲醇稀释，分别 配制成 2g/mL（适用于不分流进样） 、 10g/mL（适用于分流进样） 的羟亚胺 质控 标准 工作溶液 。 04冷藏保存，有效期 1个月； LC-MS定性标准工作溶液：临用时移取羟亚胺标准物质储备液适量，用初始流动相稀 释，分别配制成 100ng/mL（适用于 LC-TQ/MS）、 1.0g/mL（适用于 LC-IT/MS和 LC-IT/TOF）的羟亚胺标准工作溶液； LC-

9、MS定性质控标准工作溶液：临用时移取羟亚胺标准 物质储备液适量，用 初始流动 相 稀释，分别配制成 10ng/mL（适用于 LC-TQ/MS）、 200ng/mL（ 适用于 LC-IT/MS和 LC -IT/TOF）的羟亚胺质控标准工作溶液； 外标 标准曲线法 定量用标准工作溶液：移取 羟亚胺 标准物质储备液适量， 用 甲醇 稀释 ， 配 制 成浓度为 0.01mg/mL、 0.05mg/mL、 0.1mg/mL、 0.5 mg/mL 1.0mg/mL的 羟亚胺 标准 工作溶液 。 04冷藏保存，有效期 1个月 。 5.2 材料 材料包括： a） 具盖 离心管 ； b） 容量瓶； c） 玻璃进

10、样瓶； d） 有机 系微孔 滤膜 ： 0.22m 。 6 仪器 和设备 仪器和设备包括： a） 液相色谱 -三重四极 杆质谱仪 ： 配 电喷雾离子 源（ ESI） ，具备多反应 监 测 （ MRM） 模式 ； b） 液相色谱 -线性 离子阱 质谱仪 ： 配 电喷雾离子 源（ ESI） ，具备多级质谱（ MS3以上）检测模式； c） 液相色谱 -离子阱 飞行时间质谱仪：配 电喷雾离子 源（ ESI），具备多级质谱（ MS3以上）检测 模式； GA/T 3 d） 气相色谱 -质谱仪：配电子轰击源； e） 液相色谱仪：配二极管阵列或紫外检测器； f） 电子天平： 定性检验实际 分度值 d0.1mg，

11、定量检验实际分度值 d0.01mg； g） 离心机； h） 涡旋振荡器； i） 氮吹仪 ； j） 移液 器或移液管。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品制备 7.1.1.1 LC-MS 及 LC 法 固体样品制备 将样品研磨均匀 ，称取约 5mg10mg置于 具盖离心管 中，用 5mL甲醇 溶解，混匀 ，待稀释后分析 ： a) 移 取 适量 ，用初始流动相 稀释 10000倍 ，过 0.22m滤膜 ， 滤液作为样品溶液，供 LC-TQ/MS分析 ； b) 移取适量，用初始流动相 稀释 1000倍 ，过 0.22m滤膜 ，滤液作为样品溶液，供 LC-IT/MS、 LC-IT/TOF

12、分析 ； c) 移取适量， 用初始流动相稀释 10倍，过 0.22m滤膜， 滤液作为样品溶液， 供 LC分析。 7.1.1.2 LC-MS 及 LC 法 液体样品制备 将液体样品混合均匀，移取 50L置于 具盖离心管 中， 称重， 常温下氮气吹干，用 5mL甲醇溶解 ，混 匀 ，待稀释后分析 ： a) 移取适量，用初始流动相 稀释 10000倍 ，过 0.22m滤膜 ，滤液作为样品溶液，供 LC-TQ/MS分析 ； b) 移取适量，用初始流动相 稀释 1000倍 ，过 0.22m滤膜 ，滤液作为样品溶液，供 LC-IT/MS、 LC-IT/TOF分析 ； c) 移取适量，用初始流动相稀释 10

13、倍，过 0.22m滤膜， 滤液作为样 品溶液，供 LC分析。 7.1.1.3 GC-MS 法固体样品制备 将样品研磨均匀 ，称取约 5mg10mg置于 具盖离心管 中，用 5mL甲醇溶解，混匀；再用 甲醇稀释 10 倍，取上清液作为样品溶液。 7.1.1.4 GC-MS 法液体样品制备 将液体样品混合均匀，移取 50L置于 具盖离心管 中，称重，常温下氮气吹干，用 5mL甲醇溶解，混 匀；再 用甲醇稀释 10倍，取上清液作为样品溶液。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 LC-TQ/MS 参考 条件 ： a) 色谱柱： Poroshell 120 EC-C18 色谱柱（ 2.1 mm 50

14、mm， 2.7m）或其他等效柱 ； 注： Poroshell 120 EC-C18 色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并 不 是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 柱温 ： 40 ； c) 流 动相： A： 0.01mol/L 醋酸铵溶液，含 0.1%甲酸（ v/v） ， B： 0.1%甲酸甲醇溶液（ v/v） ； d) 梯度洗脱条件 ： 见表 1； GA/T 4 e) 离子化模式： ESI+； f) 鞘气温度： 250； g) 干燥气温度： 300； h) 鞘气流量：氮气， 12mL/min； i

15、) 干 燥气流量：氮气， 6mL/min； j) 雾化 气 压力： 35psi； k) 毛细管电压： 3500V； l) 喷嘴电压： 500V； m) 扫描类型：多反应监测（ MRM） ； n) 羟亚胺、氯胺酮的参考质谱参数 和 主要特征碎片离子见表 2，参考 MRM 色谱图 参 见附录 B 中 图 B.1。 表 1 LC-TQ/MS 流动相及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 流动相 A 流动相 B 0 0.2 80% 20% 5 0.2 10% 90% 7 0.2 10% 90% 7.5 0.2 80% 20% 12 0.2 80% 20% 表 2 羟亚胺、氯 胺酮的 LC-T

16、Q/MS 主要质谱参数 和 主要特征碎片离子 名称 参考保留时间 min 母离子 m/z 碎裂电压 V 子离子 m/z 碰撞能量 eV 羟亚胺 2.41 238.1 80 125.1 * 41 128.1 49 氯胺酮 2.10 238.1 95 125.1 * 45 89.1 81 注： *为基峰离子 。 7.1.2.2 LC-IT/MS 参考 条件 ： a) 色谱柱： Poroshell 120 EC-C18 色谱柱（ 2.1 mm 100 mm， 2.7m）或其他等效柱 ； 注： Poroshell 120 EC-C18 色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方

17、便本标准的使用者，并 不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 柱 温： 40 ； c) 流动相： A： 0.01mol/L 醋酸铵溶液，含 0.1%甲酸（ v/v）， B： 0.1%甲酸甲醇溶液（ v/v）； d) 进样： 1L； e) 梯度洗脱条件 ： 见表 3； f) 离子化模式： ESI+； g) 离子源温度为 300 ； h) 毛细管温度为 350 ； i) 鞘气：氮气， 40arb； j) 辅助气：氮气， 10arb； k) 碰撞气：氦气 ； GA/T 5 l) 喷雾 电压： 4000V； m) 棱镜电压： 85V； n) 隔离窗口： 2

18、amu； o) 扫描类型： MS2 MS4 全扫描模式 ； p) MS2 MS4 归一化碰撞能： 35%； q) 羟亚胺、氯胺酮的多级主要特征碎片离子见表 4， MS2 MS4 全扫描总离子流图及质谱图参见附 录 B 中图 B.2图 B.3。 表 3 LC-IT/MS 流动相及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 流动相 A 流动相 B 0 0.2 80% 20% 5 0.2 10% 90% 7 0.2 10% 90% 7.5 0.2 80% 20% 12 0.2 80% 20% 表 4 羟亚胺和氯胺酮的 LC-IT/MS 参考保留时间和多级特征碎片离子 名称 参考保留时间 min

19、二级主要特征碎 片离子 m/z 三级主要特征碎片离子 m/z 四级主要特征碎片离子 m/z 羟亚胺 7.84 238.1220* 238.1207 238.1220162.9* 238.1220191.0 238.1220162.9127.9* 238.1220162.9145 氯胺酮 6.65 238.1220* 238.1207 238.1220162.9* 238.1220191.0 238.1220162.9127.9* 238.1220162.9145 注： *为基峰离子 。 7.1.2.3 LC-IT/TOF 参考 条件 ： a) 色谱柱： Poroshell 120 EC-C18

20、 色谱柱（ 2.1mm 50mm， 2.7m）或其他等效柱 ； 注： Poroshell 120 EC-C18 色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不 是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 柱温： 40 ； c) 流动相： A： 0.01mol/L 醋酸铵溶液，含 0.1%甲酸（ v/v）， B： 0.1%甲酸甲醇溶液（ v/v）； d) 梯度洗脱条件 ： 见表 5； 表 5 LC-IT/TOF 流动相及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 流动相 A 流动相 B 0 0.2 80% 20

21、% 5 0.2 10% 90% 7 0.2 10% 90% 7.5 0.2 80% 20% 12 0.2 80% 20% GA/T 6 e) 进样： 1L； f) 离子化模式： ESI+； g) 加热块温度： 200； h) CDL 温度： 200； i) 雾化 气流速： 1.5L/min； j) 干燥 气： 100kPa； k) 扫描范围 ： MS1： m/z 60300； MS2： m/z 60300， MS3： m/z 60300； l) 离子源 电压：正离子 +4.5kV，负离子 -3.5kV； m) 检测器 电压： 1.56kV； n) 质量数校准方法：自动调谐优化电压，外标法校准质

22、量数 ； o) 离子累积时间： MS1 MS3 均为 50ms； p) 归一化 碰撞能： MS2 MS3 均 15%； q) 羟 亚胺 、氯胺酮的 LC-IT/TOF 多级主要特征碎片离子见表 6， MS1 MS3 全扫描 提取离子流图 及 质谱图参见附录 B 中图 B.4图 B.5。 表 6 羟亚胺和氯 胺酮的 LC-IT/TOF 参考保留时间和多级特征碎片离子 名称 参考保留时间 min 一级主要特征 碎片离子 m/z 二级主要特征碎片离子 m/z 三级主要特征碎片离子 m/z 羟亚胺 5.25 238.0988 238.0988220.0893* 238.0988207.0582 238

23、.0988220.0893163.0316* 238.0988220.0893128.0616 氯胺酮 3.31 238.0989 238.0989220.0892* 238.0989207.0581 238.0989220.0892163.0308* 238.0989220.0882128.0626 注： *为基峰离子 。 7.1.2.4 GC-MS 参考 条件 ： a） 色谱柱： DB-5 MS 石英玻璃毛细柱（ 0.25mm30m， 0.25m）或其他等效柱 ； 注： DB-5MS毛细色谱柱是 Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对 该产品的

24、认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b） 柱温：初始温度 80C，保持 1min，以 25C /min 升温至 280C 保持 10 min； c） 进样口温度： 280； d） 进样模式：分流进样模式，分流比： 10:1；不分流进样模式：不分流时间 0.5min， 0.5min 后分 流比 10:1； e） 载气：高纯氦气（ He） ； f） 柱流量（恒流）： 1.43mL/min 或线速度为 44cm/Sec； g） 隔垫吹扫： 3mL/min； h） 进样 量： 1L； i） 离子源温度： 200C； j） 传输线温度： 250C； k） 质量范围： 40amu

25、 500amu； l） 采集方式：全扫描（ Scan）； m） 溶剂延时： 4min； n） 倍增器电压：参考调谐状况； o） 羟亚胺、氯胺酮的特征碎片离子见表 7，总离子流图、 EI 质谱图 参 见附录 B 中图 B.6图 B.9。 GA/T 7 表 7 羟亚胺和氯胺酮的 GC-MS 参考保留时间和特征碎片离子 名称 参考保留时间 min 特征碎片离子 m/z 羟亚胺 7.423 152*、 154、 138、 180 氯胺酮 8.013 180*、 182、 209、 152 注： *为基峰离子 。 7.1.2.5 LC 参考条件： a） 色谱柱： Eclipse XDB-C18（ 4.6

26、mm150mm， 5m）色谱柱或其他等效柱 ； 注： Eclipse XDB-C18 色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称 ，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表 示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b） 柱温： 40 ； c） 流 动相 ： A： 0.01mol/L 醋酸铵溶液，含 0.1%甲酸（ v/v） ， B： 0.1%甲酸甲醇溶液（ v/v） ； d） 进样 量 ： 10L； e） 流动相及梯度洗脱条件见表 8； f） 采集波长范围： 210nm 400nm； g） 检测波长： 259nm； h） 羟亚胺、氯胺酮的色谱图及光谱图

27、参见附录 B 中图 B.10图 B.12。 表 8 LC 流动相及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 流动相 A 流动相 B 0 1.0 80% 20% 4 1.0 10% 90% 8 1.0 10% 90% 9 1.0 80% 20% 14 1.0 80% 20% 7.1.3 进样 7.1.3.1 LC-TQ/MS、 LC-IT/MS、 LC-IT/TOF 和 LC 进样 分别吸取 初始流动相 、样品溶液、 甲醇 、定性 用 标准工作溶液，按照 7.1.2.17.1.2.3、 7.1.2.5 条件 进样分析 。 根据实际需要，再分别吸取甲醇和定性质控标准工作溶液， 按照 7.1.

28、2.17.1.2.3、 7.1.2.5 条 件进样分析 。 7.1.3.2 GC-MS 进样 分别吸取 甲醇、 样品溶液 、甲醇、 定性质控标准工作溶液 和定性用标准工作溶液 顺序进样 ，按照 7.1.2.4 条件进样分析 。 根据实际需要，再分别吸取甲醇和定性质控标准工作溶液， 按照 7.1.2.4 条件进 样分析 。 7.2 定量分析 GA/T 8 7.2.1 标准工作曲线绘制 临用时分别移取 5.1中配制的外标标准曲线法定量用标准工作溶液 适量 ，加 初始流动相 稀释 10倍 ， 混匀，进样， 绘制成线性范围为 0.01mg/mL 1.0mg/mL的 羟亚胺 标准工作曲线。 7.2.2

29、样品 制备 7.2.2.1 固体样品制备 将样品研磨均匀 ，平行称取 2份 （ 需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取 6份 ） 样品， 每份约 5mg 10mg， 置于 具盖 离心管 中，用 5mL甲醇溶解，混匀 ；移取适量， 用初始流动相稀释 10倍， 过 0.22m滤膜， 滤 液作为样品溶液。 样品 溶液 中目标物的含量应在 标 准 工作 曲线的线性范围内。 注 ：样品取样量和稀释倍数可根据实际情况调整。 7.2.2.2 液体样品制备 将液体样品混合均匀，分别移取 2份（ 需要对定量结果进行不确定度评定时，至少平行称取 6份 ） 样 品，每份 50L，置于 具盖离心管 中，称重，

30、常温下用氮气吹干，用 5mL甲醇 溶解 ， 混匀 ；移取适量， 用 初始流动相稀释 10倍， 过 0.22m滤膜， 滤 液作为样品溶液 。 样品 溶液 中目标物的含量应在 标 准 工作 曲 线的线性范围内。 注 ：样品取样量和稀释倍数可根据实际情况调整。 7.2.3 仪器检测 7.2.3.1 LC条件 同 7.1.2.1.5。 7.2.3.2 进样分析 分别吸取 初始流动相 、样品溶液、 初始流动相、 标准工作曲线系列浓度 顺序进样，按照 7.1.2.1.5条 件进样分析 。 7.2.4 含量计算 根据羟亚胺标准工作曲线 、 称样量 和 定容体积 按照公式（ 1） 计算样品含量。 100%Y

31、- b V= am （ ） （ 1） 式中： 样品中目标物的百分含量，用百分比（ %）表示； V 样品溶液的定容体积，单位为毫升（ mL）； m 样品重量，单位为 毫克（ mg） ； Y 样品溶液中目标物峰面积； a 工作曲线斜率； b 工作曲线截距。 当样品 溶液中 目标物浓度超过 标准 工作曲线最高浓度 时 ， 应 稀释后 按 7.2.3条件进样分析 ； 当 样品 溶液中目标物 浓度低于 标准 工作曲线最低浓度 时 ， 应 加大称样量或减少溶剂 （甲醇） 体积后重新分析。 8 结 果 评价 GA/T 9 8.1 定性结果评价 8.1.1 LC-TQ/MS 法 阳性结果评价： 在相同条件下进

32、行测定时，样品溶液中目标物与浓度接近的定性用标准工作溶液中 的目标物相比，色谱峰保留时间一致（相对误差在 2.5%之内）、定性离子对（至少两对）一致，且离 子对丰度比相对偏差不超过表 9 规定的范围，样品空白无干扰，则可判断样品中检出目标物 。 表 9 离子对丰度比的最大允许相对偏差范围 离子 对 丰度比 50% 20% 50% 10% 20% 10% 最大允许相对偏差 20% 25% 30% 50% 阴性 结果评价：样品溶液中未检出目标物特征离子对，定性质控标准工作溶液中检出目标物特征离 子对，标准溶液空白无干扰，则可判断样品中未检出目标物。 8.1.2 LC-IT/MS 法 阳性结果评价：

33、在相同条件下进行测定时，样品溶液中目标物与浓度接近的定性用标准工作溶液中 的目标物相比，色谱峰保留时间一致（相对误差在 2.5%之内）、定性离子对（至少两对） 一致， 且离 子对丰度比相对偏差不超过表 9 规定的范围，或三级质谱至少检出一对离子对，样品空白无干扰， 则可 判断样品中检出目标物。 阴性结果评价：样品溶液中未检出目标物特征离子对 ，定性质控标准工作溶液中检出目标物特征离 子对，标准溶液空白无干扰，则可判断样品中未检出目标物。 8.1.3 LC-IT/TOF 法 阳性结果评价：在相同条件下进行测定时，样品溶液中目标物与浓度接近的定性用标准工作溶液中 的目标物相比，色谱峰保留时间一致（

34、相对误差在 2.5%之内） ，且样品中羟亚胺前体离子的质荷比与 理论质荷比一致 （ 质量精度 小于等于 510-6） ， 同时至少有 1 个二级（或以上）质谱特征离子检出， 其 质量数与标准物质相比一致（ 质荷比 大于等于 200 时 ， 质量精度 小于等于 510-6； 质荷比 小于 200 时， 质量 精度 小于 1mDa） ，样品 空白 无干扰，则可判断样品中检出羟亚胺。 阴性结果评价： 样品 溶液中 未 检出目标物特征离子，定性质控标准工作溶液中检出目标物特征离子， 标准溶液空白无干扰，则可判断样品中未检出目标物。 8.1.4 GC-MS 法 阳性结果评价：在相同条件下进行样品测定时，

35、样品中目标物的色谱峰保留时间与标准物质工作溶 液一致（相对误差在 1%之内），质谱特征离子（不少于 3 个）一致， 且各离子丰度比 相对偏差不超过 表 10 规定的范围，样品 空白 无干扰，则可判断样品中可能检出目标物。 当用 GC-MS 分析检出羟亚胺时，至少需 要选择 LC、 LC-TQ/MS、 LC-IT/MS、 LC-IT/TOF 中的一 种方法进行确认。 表 10 特征离 子丰度比的最大允许相对偏差范围 特征离子丰度比 50% 20% 50% 10% 20% 10% 最大允许相对偏差 10 15 20% 50% 阴性结果评价：扣除背景后， 10.0mg/mL 样品溶液中未出现与定性质

36、控标准工作溶液中目标物一致 的特征离子，标准溶液空白无干扰，则可判断样品中未检出目标物。 GA/T 10 8.1.5 LC 法 当 GC-MS定性结果检出羟亚胺时， 可结合 LC法进行确认。 当 样 品中羟亚胺的色谱峰保留时间与 标 准物质工作溶液 一致（相对误差在 2.5%之内），可判断样品中检出羟亚胺，否则为阴性。 8.2 定量结果评价 8.2.1 相对相差检验 平行称取 2份样品时，测定数据按照公式（ 2）计算相对相差（ RD）。 12 100%-RD = （ 2） 式中： RD 相对相差， 用百分比（ %）表示 ； 1、 2 两份样品平行定量测定的含量数值； 两份样品平行定量测定的含量

37、平均值。 当 RD10%时，数据有效；当 RD 10%时，需要重新检验。 8.2.2 异常值检验 平行称取 6 份样品时，测定数据按照公式（ 3）进行 Grubbs 可疑值判别。 i0 i -G= s （ 3） 式中： i 可疑值； 0 6 个 （ 5 个 ）数据的平均值； s 6 个 （ 5 个 ）数据的单次测定标准差； Gi Grubbs 统计值。 当测定次数 n=6时 ， G6（ 95） =1.822；当测定次数 n=5时， G5（ 95） =1.672。 Gi 2 2 2 . 0 羟亚胺 氯胺酮 I n ten s ity MS 4 2 3 8 . 1 2 2 2 . 0 1 6 2

38、. 9 羟亚胺 氯胺酮 I n ten s ity t / mi n 图 B.2 羟亚胺、氯胺酮 的 LC-IT/MS的 MS2、 MS3、 MS4全扫描总离子流图 GA/T 13 氯胺酮 氯胺酮 羟亚胺 氯胺酮 MS 4 MS 3 MS 2 50 100 150 200 m/ z 0 50 100 1 2 7 . 9 0 1 4 4 . 9 4 1 0 2 . 8 7 1 5 4 . 7 87 6 . 8 6 1 7 2 . 1 4 100 150 200 250 m/ z 0 50 100 1 6 2 . 9 2 1 9 0 . 9 7 1 5 1 . 9 1 1 2 4 . 9 3 2

39、2 0 . 0 5 9 4 . 8 7 100 150 200 250 m/ z 0 50 100 2 2 0 . 0 3 2 0 7 . 0 1 1 5 1 . 9 4 1 2 4 . 9 0 2 2 3 . 3 88 4 . 9 4 50 100 150 200 m/ z 0 50 100 1 2 7 . 8 9 1 4 4 . 9 5 1 0 2 . 9 0 1 5 4 . 8 67 6 . 7 6 100 150 200 250 m/ z 0 50 100 1 6 2 . 9 1 1 9 0 . 9 6 1 5 1 . 9 0 1 2 4 . 9 0 2 2 0 . 0 89 4 .

40、9 2 100 150 200 250 m/ z 0 50 100 2 2 0 . 0 0 2 0 7 . 0 4 1 7 9 . 0 1 1 5 1 . 9 7 1 2 4 . 8 5 2 2 4 . 3 4 MS 2 羟亚胺MS 3 羟亚胺MS 4 图 B.3 羟亚胺、氯胺酮 LC-IT/MS的 MS2、 MS3、 MS4全扫描质谱图 B.3 羟 亚胺 、氯胺酮 LC-IT/TOF 的 MS1 MS3 提取离子流色谱 图及质谱图见图 B.4 和 图 B.5。 0 500000 1000000 1500000 2000000 2500000 0 100000 200000 300000 40

41、0000 500000 0 2 4 6 8 10 -2000 0 0 20000 40000 60000 80000 100000 120000 140000 I n ten s ity MS 2 2 2 0 . 0 8 9 3 I n ten s ity MS 3 1 6 3 . 0 3 1 6 MS 1 2 3 8 . 0 9 8 8 羟亚胺 羟亚胺 羟亚胺 氯胺酮 氯胺酮 氯胺酮 I n ten s ity t / mi n 图 B.4 羟亚胺、氯胺酮 LC-IT/TOF的 MS1、 MS2、 MS3提取离子 流 色谱图 GA/T 14 MS 2 氯胺酮 MS 3 氯胺酮 MS 3 羟亚

42、胺 MS 2 羟亚胺 MS 1 氯胺酮 MS 1 羟亚胺 图 B.5 羟亚胺、氯胺酮 LC-IT/TOF的 MS1、 MS2、 MS3全扫描质谱图 B.4 羟亚胺、氯胺酮 GC-MS 的总离子流图 （不分流 30s 进样） 、质谱图见图 B.6图 B.9。 图 B.6 羟亚胺 GC-MS总离子流图 图 B.7 氯胺酮 GC-MS总离子流图 GA/T 15 5 0 . 0 7 5 . 0 1 0 0 . 0 1 2 5 . 0 1 5 0 . 0 1 7 5 . 0 2 0 0 . 0 2 2 5 . 0 2 5 0 . 0 2 7 5 . 0 0 25 50 75 1 0 0 % 1 5 2

43、1 3 8 1 8 01 0 2 7542 1 4 01 2 567 8955 1 9 6 2 0 91 7 4 2 3 7 2 2 2 2 8 1 图 B.8 羟亚胺 GC-MS质谱图 50 1 0 0 1 5 0 2 0 0 2 5 0 3 0 0 3 5 0 4 0 0 0 25 50 75 1 0 % 1 8 0 2 0 9 1 5 21 0 2 42 75 2 3 7 2 8 1 3 5 5 4 2 9 图 B.9 氯胺酮 GC-MS质谱图 B.5 羟亚胺、氯胺酮的 LC 色谱图及光谱图 见 图 B.10图 B.12。 图 B.10 羟亚胺、氯胺酮的 LC色谱图 min 2.5 5

44、7.5 羟亚胺 0 20 40 60 80 100 氯胺酮 GA/T 16 图 B.11 氯胺酮的 LC-DAD光谱图 图 B.12 羟亚胺的 LC-DAD光谱图 nm 220 240 260 280 300 320 340 360 380 mAU 0 100 200 300 400 500 氯胺酮 DAD 光谱图 nm 220 240 260 280 300 320 340 360 380 mAU 0 100 200 300 400 500 600 700 羟亚胺 DAD 光谱图 GA/T 17 附录 C （资料性） 羟亚胺和氯胺酮的检出限 C.1 LC-TQ/MS 法 检出限 ： 0.5ng/mL。 C.2 LC-IT/MS 法： 二级、三级、四级全扫描模式下均为 50ng/mL。 C.3 LC-IT/TOF 法： 一级、二级、三级全扫描模式下，一级为 10ng/mL， 二级为 20ng/mL，三级为 50ng/mL。 C.4 GC-MS 法：分流进样模式，检出限 2.0g/mL；不分流进样模式，检出限 0.2g/ mL。 C.5 LC-DAD 法： 2g/mL。