GA T 1964-2021 法庭科学 家猪STR复合扩增检验 毛细管电泳荧光检测法.pdf

1、 _-_ ICS 13.310 CCS A 92 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA GA/T XXXX XXXX 法庭科学 家猪STR 复合扩增 检验 毛细 管 电泳荧光 检测法 Forensic science - STR multiplex amplification examination methods for Sus scrofa f. domestica -Capillary electrophoresis and fluorescence method - - 发布 - - 实施 中华人民 共和国 公安部 发 布 GA/T XXXX XXXX I

2、前 言 GB/T 1.1-2020 GB/T 1.1 2020 1 SAC/TC 179 GA/T XXXX XXXX 2 法庭科学 家猪STR 复合扩增检 验 毛细管电泳 荧光 检测法 1 范围 DNA STR 2 规范 性引 用文 件 GA/T 382-2014 DNA GA/T 383-2014 DNA GA/T 1161-2014 DNA 3 术语 和定 义 3.1 短串联 重复 序列 （STR ） short tandem repeats 2 6 5 60 DNA 400bp DNA 3.2 聚合酶 链式 反应 polymerase chain reaction, PCR DNA D

3、NA 3.3 引物 primer PCR 3.4 阳性对 照 positive control DNA DNA 3.5 阴性对 照 negative control DNA GA/T XXXX XXXX 3 4 原理 STR STR 5 主要 仪器 设备 a) b) c) d) e) f) g) 6 主要 试剂 a) b) PCR buffer c) Taq DNA d) MgCl2 e) dNTPs f) PCR 1 表1 家 猪STR 检 验基 因座 名称和 引物 信息 - bp SW240 2p AGAAATTAGTGCCTCAAATTGG AAACCATTAAGTCCCTAGCAAA

4、14 23 88 106 PigSTR13E 13p GTTAGTTTCAGGTAAACAGCAGAGTG AATCCAAACTTCGTGTGCTGTC 13 18.3 125 148 PigSTR15A 15p TGGTGTTGGTTTGATCCTCA TCGGATTCTTTTCCCACCTA 11 20 185 221 S0655 7p GTTGCTGTGTTGTAGGCTGGCAG TGGGGATGGGAGGGAGAGAATT 5 22 263 331 PigSTR11B 11q CCATAGTTACTTCAACCCTAG CCACATTGGTTATCTAGATGG 5 17 83 13

5、1 PigSTR14A 14p TGTTGCTGCTATGGGAATTG AAACCCTGCTTCTTTGGAGACAG 8 14 166 190 387A12F 12p TTACAGATGCCCAAGGTGAG GTATACCTGAATCGCTTTGCTG 9 21 208 256 PigSTR4C 4p GCCTCATGTAGCCTTATAAAATCC GATCTAGCACACTCGGGTTCTT 4 9 104 124 PigSTR17A 17p TAAACTCATCATTAAATCCCCTGT GTAGTTTGTGAAAAGAGGCAGG 5 9 151 167 GA/T XXXX X

6、XXX 4 - bp PigSTR5C 5p GGTGGTTGGAGAGACCAGAA GAGCAGTGCCAGGAAGGTAG 5 14 237 273 PigSTR7B 7q TGCGGTTCCTGTTAACCCCA CGTGCTTGCTCCATTAGTATCT 4 12 87 119 S0386 11q AACAGTATTTGCATAGTCAGGC ATGGTTCCTAAGTGGATTCGTT 14 25 188 210 Amel X,Y GCAGGATCGGTCTGTTTTTC ATGCAAGCCCTCCGAGAA 232 234 g) h) i) DNA 7 实 验室 环境 要求 G

7、A/T 382-2014 5 8 操 作步 骤 8.1 家猪STR 基因 座的 选 择 12 STR 1 STR PCR STR a b c 8.2 扩增 反应 8.2.1 DNA GA/T 383-2014 5.8 5.11 8.2.2 DNA GA/T383-2014 6.1 6.3 8.2.3 8.2.4 8.2.5 PCR 2 PCR 表 2 PCR 体系 中各 参数 用 量 dNTPs 0.2mmol/L MgCl2 1.6mmol/L PCR 0.07 GA/T XXXX XXXX 5 Taq DNA DNA 注： DNA DNA 0.1ng 1.0ng 8.2.6 PCR 3 表3 PCR 反应 条件 95 11min 1 94 1min 28 61 1min 72 1min 60 60min 1 25 - 8.2.7 4 8.3 检测 分析 8.3.1 1.5mL 95 5 min 3min 96 Q 0.95 8.3.2 8.3.3 10 8.3.4 8.3.5 9 结 果的 应用 和评 估 9.1 个体 识别 STR SW240 12 STR GA/T XXXX XXXX 6 STR 1 9.2 亲子 鉴定 STR SW240 12 STR 1 2 STR 3 STR 10 注 意事 项 a) b) c)