DB14 T 2332-2021 绵羊腹腔镜输精技术规程.pdf

1、I C S 6 5 . 0 2 0 . 3 0 C C S B 4 3 14 山 西 省 地 方 标 准 D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2 1 绵 羊 腹 腔 镜 输 精 技 术 规 程 T e c h n i c a l o p e r a t i o n c o d e f o r s h e e p l a p a r o s c o p i c i n s e m i n a t i o n 2 0 2 1 - 1 1 - 2 2 发 布 2 0 2 2 - 0 1 - 2 2 实 施 山 西 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布D B 1 4 / T 2 3 3

2、2 2 0 2 1 I 目 次 前 言 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

3、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . I I 1 范 围 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 2 规 范 性 引 用 文 件 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

5、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 3 术 语 和 定 义 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 4 输 精 场 所 及 人 员 要 求 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

7、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 5 输 精 准 备 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 6 输 精 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

9、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 7 输 精 档 案 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

10、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 附 录 A （ 资 料 性 ） 腹 腔 镜 输 精 常 用 器 械 （ 以 1 0 0 只 母 羊 标 准 ） . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

11、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 附 录 B （ 规 范 性 ） 输 精 器 械 、 用 具 的 洗 涤 与 消 毒 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 附 录 C （

12、规 范 性 ） 稀 释 液 的 配 置 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2 1 I I 前 言 本 文 件 按

13、 照 G B / T 1 . 1 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分 ： 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起 草 。 本 文 件 由 山 西 省 农 村 农 业 厅 提 出 并 监 督 实 施 。 本 文 件 由 山 西 省 农 业 标 准 化 技 术 委 员 会 归 口 。 本 文 件 起 草 单 位 ： 山 西 农 业 大 学 本 文 件 主 要 起 草 人 ： 石 磊 、 乔 利 英 、 刘 巧 霞 、 张 婷 、 侯 东 来 、 任 有 蛇 、 张 春 香 、 姚 继 广 、 杨 子 森 、 张 建 新 、 刘 建 华 、 郭 建

14、 文 、 王 军 伟 、 焦 忠 欣 、 张 记 芳 ， 王 海 瑞 。D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2 1 1 绵 羊 腹 腔 镜 输 精 技 术 规 程 1 范 围 本 文 件 规 定 了 绵 羊 腹 腔 镜 输 精 技 术 的 术 语 和 定 义 、 输 精 场 所 及 人 员 要 求 、 输 精 准 备 、 输 精 、 输 精 档 案 的 具 体 方 法 和 操 作 程 序 。 本 文 件 适 用 于 绵 羊 种 羊 场 、 繁 殖 场 和 规 模 养 羊 户 的 配 种 员 对 绵 羊 进 行 腹 腔 镜 输 精 的 技 术 操 作 。 2 规 范 性 引 用 文

15、件 下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 G B 2 0 5 5 7 山 羊 冷 冻 精 液 Y Y 0 6 2 7 . 1 内 镜 器 械 N Y / T 3 1 8 6 羊 冷 冻 精 液 生 产 技 术 规 程 3 术 语 和 定 义 G B 2 0 5 5 7

16、和 N Y / T 3 1 8 6 界 定 的 以 及 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。 腹 腔 镜 输 精 l a p a r o s c o p i c i n s e m i n a t i o n 借 助 腹 腔 镜 和 专 用 输 精 枪 将 精 液 直 接 输 入 到 发 情 的 母 羊 子 宫 角 使 其 妊 娠 的 一 种 人 工 授 精 技 术 。 4 输 精 场 所 及 人 员 要 求 场 所 选 择 应 选 择 与 配 母 羊 数 量 多 且 相 对 集 中 的 地 方 建 设 人 工 授 精 站 （ 点 ） ， 输 精 改 良 范 围 以 距 人

17、工 授 精 站 （ 点 ） 半 径 距 离 不 超 过 2 0 k m 为 宜 。 场 所 应 具 备 的 条 件 4 . 2 . 1 精 液 处 理 室 面 积 8 m 2 1 0 m 2 ， 要 求 屋 顶 、 墙 壁 、 地 面 平 整 ， 并 安 装 紫 外 线 灯 ， 室 温 应 保 持 在 2 0 左 右 。 4 . 2 . 2 输 精 室 地 面 用 0 . 1 % 的 新 洁 尔 灭 溶 液 或 3 % 5 % 煤 酚 皂 溶 液 喷 洒 消 毒 ， 打 开 紫 外 线 灯 消 毒 3 0 m i n 6 0 m i n 。 4 . 2 . 3 待 配 母 羊 棚 （ 圈 ）

18、面 积 3 0 m 2 4 0 m 2 ， 与 输 精 室 相 连 通 。 人 员 要 求D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2 1 2 输 精 员 为 体 检 合 格 并 能 熟 练 操 作 腹 腔 镜 的 技 术 人 员 。 输 精 前 手 臂 清 洁 、 消 毒 ， 更 换 消 毒 后 的 工 作 服 并 佩 戴 口 罩 和 无 菌 乳 胶 手 套 。 5 输 精 准 备 5 . 1 . 1 精 液 种 类 新 鲜 精 液 、 低 温 保 存 精 液 和 冷 冻 精 液 。 5 . 1 . 2 输 精 器 械 输 精 器 械 参 见 附 录 A ， 应 符 合 Y Y 0 6

19、 2 7 . 1 标 准 的 相 关 规 定 。 输 精 器 械 、 用 具 的 洗 涤 和 消 毒 参 见 附 录 B 。 5 . 1 . 3 精 液 准 备 符 合 要 求 的 新 鲜 精 液 稀 释 后 可 直 接 输 精 ， 稀 释 液 配 方 参 见 附 录 C ， 低 温 保 存 的 精 液 需 复 温 至 3 7 ， 细 管 冷 冻 精 液 浸 入 3 8 4 0 的 水 浴 中 解 冻 1 5 s 2 0 s 后 立 即 取 出 ， 将 精 液 置 于 1 0 m L 的 小 试 管 中 混 匀 。 5 . 1 . 4 精 液 检 测 新 鲜 精 液 的 精 子 活 率 0 .

20、 7 ， 低 温 保 存 精 液 精 子 活 率 0 . 5 ， 冷 冻 精 液 精 子 活 率 0 . 3 。 保 持 有 效 精 子 数 在 5 0 0 0 万 个 / m L 以 上 。 5 . 1 . 5 发 情 鉴 定 用 试 情 法 进 行 发 情 鉴 定 。 每 天 早 晨 和 傍 晚 各 进 行 一 次 ， 每 次 3 0 m i n 。 按 试 情 公 羊 与 母 羊 的 比 例 以 1 : 2 0 为 宜 。 试 情 公 羊 进 入 母 羊 群 后 ， 发 现 主 动 接 近 公 羊 并 接 受 公 羊 爬 跨 的 母 羊 ， 鉴 定 为 发 情 母 羊 并 标 记 。 5

21、 . 1 . 6 输 精 母 羊 的 准 备 母 羊 在 输 精 前 2 4 h 断 水 断 料 。 手 术 前 将 待 输 精 母 羊 保 定 于 手 术 架 上 ， 使 用 兽 用 麻 醉 药 静 松 灵 或 鹿 眠 宝 等 按 推 荐 剂 量 注 射 进 行 麻 醉 ， 然 后 将 母 羊 乳 房 前 的 被 毛 剃 光 ， 用 5 % 的 碘 伏 消 毒 后 用 一 次 性 的 消 毒 纸 巾 擦 拭 干 净 ； 推 进 输 精 室 并 将 保 定 架 抬 起 至 4 5 - 6 0 。 6 输 精 输 精 时 间 鉴 定 发 情 的 母 羊 在 1 2 h 2 4 h 输 精 。 输

22、 精 流 程 6 . 2 . 1 切 口 用 手 术 刀 尖 在 母 羊 腹 中 线 两 侧 乳 房 基 部 的 2 c m 5 c m 处 纵 切 两 个 0 . 5 c m 左 右 的 切 口 ， 切 口 部 位 位 于 母 羊 乳 头 前 方 8 c m 1 0 c m ， 刺 破 皮 肤 即 可 ， 注 意 避 开 可 见 血 管 。 6 . 2 . 2 穿 刺 用 食 指 和 拇 指 握 住 穿 刺 针 与 套 管 针 的 前 段 ， 露 出 针 尖 约 2 c m 左 右 ， 从 切 口 处 分 别 从 两 侧 斜 向 刺 入 穿 刺 针 与 套 管 针 。D B 1 4 / T

23、2 3 3 2 2 0 2 1 3 6 . 2 . 3 观 察 子 宫 和 卵 巢 取 出 穿 刺 针 ， 将 输 精 枪 和 内 窥 镜 分 别 插 入 套 管 ， 向 腹 腔 内 充 气 5 s 8 s ， 使 腹 腔 壁 与 内 脏 分 离 。 打 开 光 源 ， 利 用 内 窥 镜 观 察 母 羊 子 宫 ， 如 果 观 察 不 到 子 宫 ， 可 借 助 输 精 管 拨 动 羊 腹 腔 内 的 器 官 和 脂 肪 ， 保 证 子 宫 能 够 在 光 源 范 围 内 暴 露 。 找 到 子 宫 后 先 观 察 子 宫 角 及 卵 巢 上 的 排 卵 点 ， 有 新 鲜 排 卵 点 的

24、母 羊 立 即 输 精 。 6 . 2 . 4 注 入 精 液 将 装 好 精 液 的 输 精 枪 针 头 以 点 式 快 速 刺 入 的 手 法 刺 入 子 宫 角 上 1 / 3 处 ， 慢 慢 输 入 精 液 0 . 1 m L 0 . 1 5 m L ， 随 后 拔 出 针 头 ， 找 到 另 一 侧 子 宫 角 ， 以 同 样 的 方 法 输 入 精 液 ， 每 只 母 羊 输 入 精 液 0 . 2 m L 0 . 3 m L ， 如 果 发 情 母 羊 没 有 排 卵 点 则 放 弃 输 精 。 术 后 护 理 输 精 完 成 后 将 母 羊 放 平 ， 按 照 3 万 4 万

25、单 位 / k g 体 重 肌 注 长 效 青 霉 素 后 ， 在 手 术 部 位 喷 伤 口 愈 合 喷 剂 ， 用 固 定 卡 固 定 伤 口 ； 输 精 后 即 可 归 群 ， 2 4 h 内 不 可 采 食 过 多 。 未 输 精 的 母 羊 也 需 要 进 行 术 后 护 理 。 7 输 精 档 案 输 精 的 羊 群 要 建 立 输 精 档 案 ， 内 容 包 括 母 羊 编 号 、 发 情 状 况 、 精 液 信 息 、 输 精 时 间 、 妊 娠 情 况 和 输 精 员 信 息 等 内 容 ， 保 存 时 间 3 年 以 上 。D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2

26、 1 4 A A 附 录 A （ 资 料 性 ） 腹 腔 镜 输 精 常 用 器 械 （ 以 1 0 0 只 母 羊 标 准 ） 名 称 数 量 名 称 数 量 6 - 7 m m 穿 刺 套 管 1 套 1 0 m L 注 射 器 3 0 支 5 - 6 m m 内 窥 镜 1 套 医 用 手 术 推 车 1 0 台 腹 腔 镜 专 用 输 精 枪 1 套 电 冰 箱 1 台 带 压 力 阀 小 型 气 泵 1 台 开 膣 器 5 个 6 0 0 0 K 以 上 冷 光 源 1 台 载 玻 片 2 盒 电 动 剪 毛 剪 2 把 盖 玻 片 2 盒 带 恒 温 台 显 微 镜 1 台 中 性

27、 洗 涤 剂 2 瓶 显 微 镜 专 用 擦 镜 纸 1 本 工 作 服 1 0 套 医 用 凡 士 林 1 瓶 记 号 笔 3 支 1 0 0 温 度 计 2 支 试 情 布 5 条 5 0 m L 量 筒 3 个 软 毛 刷 1 把 1 0 0 m L 量 筒 3 个 毛 巾 5 条 7 5 % 酒 精 2 瓶 肥 皂 2 块 9 5 % 酒 精 2 瓶 玻 璃 棒 2 根 无 菌 口 罩 3 包 恒 温 箱 1 台 无 菌 手 套 3 包 干 燥 箱 1 台 消 毒 纸 巾 2 包 搪 瓷 盘 2 个 鞋 套 2 包 镊 子 2 把 羊 用 保 定 架 1 0 台 水 浴 锅 1 台 长

28、 效 青 霉 素 3 盒 电 暖 气 2 台 碘 伏 2 瓶 记 录 本 2 本 兽 用 麻 醉 剂 3 盒 电 子 天 平 1 台 生 理 盐 水 5 瓶 5 m L 移 液 器 2 支 2 2 - 2 3 号 手 术 刀 片 5 包 灭 菌 纱 布 1 包 1 0 m L 试 管 3 包 蒸 馏 水 2 瓶 2 m L 离 心 管 2 包 保 温 瓶 1 个D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2 1 5 B B 附 录 B （ 规 范 性 ） 输 精 器 械 、 用 具 的 洗 涤 与 消 毒 B . 1 器 具 洗 涤 B . 1 . 1 玻 璃 器 皿 玻 璃 器 皿 使

29、用 前 先 用 自 来 水 清 洗 ， 然 后 在 洗 涤 剂 水 中 用 毛 刷 刷 洗 或 在 超 声 波 清 洗 仪 中 用 洗 涤 剂 水 洗 涤 3 0 m i n 以 上 。 B . 2 金 属 器 械 金 属 器 械 在 洗 涤 剂 水 中 刷 洗 干 净 。 所 用 器 械 在 每 次 使 用 后 ， 将 采 精 、 输 精 及 与 精 液 接 触 的 所 有 器 械 都 要 求 用 洗 涤 剂 彻 底 清 洗 干 净 ， 再 用 清 水 冲 洗 2 3 次 ， 最 后 用 蒸 馏 水 冲 洗 一 次 ， 并 保 持 清 洁 、 干 燥 ， 存 放 于 清 洁 的 柜 内 。

30、B . 3 器 具 消 毒 B . 3 . 1 玻 璃 器 皿 的 消 毒 玻 璃 器 皿 可 包 装 好 后 放 入 高 压 灭 菌 器 内 1 0 0 灭 菌 1 5 2 0 m i n 。 B . 3 . 2 腹 腔 镜 的 消 毒 腹 腔 镜 输 精 枪 和 穿 刺 套 管 经 高 压 蒸 汽 消 毒 ， 要 求 消 毒 温 度 达 到 1 1 5 ， 维 持 3 0 m i n 。 当 连 续 为 数 只 母 羊 输 精 时 ， 每 使 用 完 一 次 ， 输 精 器 的 前 端 插 入 到 碘 伏 溶 液 中 浸 泡 ， 取 出 后 可 直 接 为 另 一 只 母 羊 输 精 。

31、使 用 后 的 开 膣 器 需 洗 涤 干 净 消 毒 后 ， 再 用 灭 菌 生 理 盐 水 棉 球 冲 洗 两 次 。D B 1 4 / T 2 3 3 2 2 0 2 1 6 C C 附 录 C （ 规 范 性 ） 稀 释 液 的 配 置 C . 1 奶 类 稀 释 液 将 健 康 母 牛 或 母 羊 的 新 鲜 乳 汁 用 多 层 纱 布 过 滤 ， 将 过 滤 后 的 乳 汁 经 水 浴 （ 9 0 9 5 ） 加 热 1 0 m i n 1 5 m i n ， 冷 却 至 至 室 温 ， 除 去 奶 皮 ， 也 可 直 接 购 买 脱 脂 纯 牛 奶 ， 加 入 青 霉 素 1 0

32、 万 2 0 万 国 际 单 位 / 1 0 0 m L ， 充 分 摇 匀 后 即 可 应 用 ， 暂 时 不 用 可 放 置 4 保 存 待 用 ， 。 C . 2 柠 檬 酸 钠 葡 萄 糖 卵 黄 稀 释 液 取 葡 萄 糖 3 g 、 柠 檬 酸 钠 1 . 4 g ， E D T A 0 . 1 g 加 蒸 馏 水 充 分 溶 解 后 定 容 至 1 0 0 m L ， 高 温 （ 1 0 0 ） 高 压 （ 0 . 1 M p a ） 灭 菌 1 5 m i n 2 0 m i n 后 ， 冷 却 至 室 温 ， 再 加 入 取 上 液 8 0 m L ， 加 新 鲜 卵 黄 2 0 m L ， 青 霉 素 1 0 万 国 际 单 位 ， 漩 涡 混 匀 3 0 m i n 以 上 ， 4 保 存 备 用 。 C . 3 生 理 盐 水 稀 释 液 0 . 9 % 医 用 生 理 盐 水 可 以 作 为 稀 释 液 使 用