DB23 T 3033-2021 东北百里香组培繁殖技术规程.pdf

1、I C S 6 5 . 0 2 0 . 2 0 C C S B 0 5 DB23 黑 龙 江 省 地 方 标 准 D B 2 3 / T 3 0 3 3 2 0 2 1 东 北 百 里 香 组 培 繁 殖 技 术 规 程 2 0 2 1 - 1 2 - 2 4 发 布 2 0 2 2 - 0 1 - 2 3 实 施 黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布D B 2 3 / T 3 0 3 3 2 0 2 1 前 言 本 文 件 按 照 G B / T 1 . 1 - 2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分 ： 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则

2、的 规 定 起 草 。 请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 。 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任 。 本 文 件 由 黑 龙 江 省 林 业 和 草 原 局 提 出 。 本 文 件 起 草 单 位 ： 东 北 林 业 大 学 、 黑 龙 江 省 电 力 科 学 研 究 院 、 绥 棱 县 应 急 管 理 局 、 绥 棱 县 国 有 林 场 发 展 服 务 中 心 、 海 伦 市 森 林 资 源 保 护 中 心 、 海 伦 市 陈 家 店 林 场 。 本 文 件 主 要 起 草 人 ： 范 丽 娟 、 王 玉 喜 、 赵 玉

3、彬 、 苗 雨 蕾 、 钱 大 勇 、 史 恭 发 、 闫 蕾 、 吕 汝 彤 、 叶 王 斌 、 赵 蕊 阳 、 刘 桂 伶 、 杨 娟 、 付 海 静 、 王 玲 、 王 金 红 。D B 2 3 / T 3 0 3 3 2 0 2 1 1 东 北 百 里 香 组 培 繁 殖 技 术 规 程 1 范 围 本 文 件 规 定 了 东 北 百 里 香 （ T h y m u s m a n d s c h u r i c u s R o n n . ） 组 培 繁 殖 的 环 境 与 设 备 消 毒 、 培 养 基 配 制 、 外 植 体 的 制 备 、 培 养 条 件 、 不 定 芽 诱 导

4、 、 不 定 芽 增 殖 、 生 根 培 养 、 炼 苗 、 温 室 移 栽 及 管 理 和 生 产 档 案 。 本 文 件 适 用 于 东 北 百 里 香 组 培 繁 殖 。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款 。 其 中 ， 注 日 期 的 引 用 性 文 件 ， 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件 ； 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 L Y / T 1

5、 8 8 2 2 0 1 0 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 花 卉 种 苗 组 培 快 繁 技 术 规 程 3 术 语 和 定 义 本 文 件 没 有 需 要 界 定 的 术 语 和 定 义 。 4 环 境 与 设 备 消 毒 4 . 1 接 种 室 消 毒 接 种 室 消 毒 按 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 中 8 . 6 的 规 定 执 行 。 4 . 2 培 养 室 消 毒 培 养 室 消 毒 按 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 中 8 . 7 的 规 定 执 行 。 4 . 3 超 净

6、 工 作 台 消 毒 超 净 工 作 台 消 毒 按 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 中 8 . 5 和 8 . 6 的 规 定 执 行 。 4 . 4 接 种 器 具 消 毒 接 种 器 具 按 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 中 8 . 4 的 规 定 执 行 。 5 培 养 基 配 制 5 . 1 母 液 配 制 培 养 基 母 液 配 制 按 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 中 7 . 3 的 规 定 执 行 。D B 2 3 / T 3 0 3 3 2 0 2 1 2 5 . 2 培 养 基 配 制 5 . 2 . 1 培 养 基 配

7、方 培 养 基 配 制 成 分 如 下 ： a ) 初 代 培 养 基 ： M S 0 . 5 m g / L 6 - B A 3 0 g / L 蔗 糖 固 化 剂 ， 灭 菌 前 培 养 基 p H 值 调 制 为 5 . 8 6 . 0 ； b ) 不 定 芽 增 殖 培 养 基 ： M S 0 . 5 m g / L 6 - B A 0 . 1 m g / L N A A 3 0 g / L 蔗 糖 固 化 剂 ， 灭 菌 前 培 养 基 p H 值 调 制 为 5 . 8 6 . 0 ； c ) 生 根 培 养 基 ： 1 / 2 M S 0 . 5 m g / L I B A 3

8、0 g / L 蔗 糖 固 化 剂 ， 灭 菌 前 培 养 基 p H 值 调 制 为 5 . 8 6 . 0 。 5 . 2 . 2 培 养 基 配 制 方 法 培 养 基 配 制 方 法 按 N Y / T 2 3 0 6 2 0 1 3 中 7 . 4 执 行 。 5 . 3 培 养 基 灭 菌 及 保 存 培 养 基 灭 菌 及 保 存 方 法 按 L Y / T 1 8 8 2 2 0 1 0 中 4 . 2 进 行 。 6 外 植 体 的 制 备 6 . 1 外 植 体 的 选 择 宜 6 月 8 月 ， 从 健 康 植 株 上 选 取 中 上 部 半 木 质 化 的 枝 条 ，

9、剪 成 5 c m 长 的 茎 段 。 6 . 2 消 毒 将 外 植 体 在 洗 衣 粉 水 中 浸 泡 1 5 m i n ， 自 来 水 冲 洗 1 h 2 h 后 ， 置 于 超 净 工 作 台 上 ， 用 7 5 % 的 酒 精 浸 泡 1 0 s 3 0 s ， 无 菌 水 冲 洗 4 遍 6 遍 ， 加 入 2 % 的 次 氯 酸 钠 溶 液 搅 拌 杀 菌 1 5 m i n 或 0 . 1 % 的 升 汞 杀 菌 8 m i n 1 0 m i n ， 无 菌 水 冲 洗 4 遍 6 遍 ， 用 无 菌 滤 纸 吸 干 材 料 表 面 水 分 ， 切 割 成 1 c m 1

10、 5 c m 长 的 带 腋 芽 的 茎 段 。 7 培 养 条 件 培 养 条 件 为 2 4 2 8 ， 光 周 期 为 1 4 h / d ， 光 照 强 度 3 0 0 0 L u x ， 空 气 相 对 湿 度 6 0 % 8 0 % 。 8 不 定 芽 诱 导 将 带 有 腋 芽 的 茎 段 接 种 到 诱 导 不 定 芽 的 初 代 培 养 基 上 ， 培 养 1 5 d 2 0 d ， 获 取 不 定 芽 备 用 。 9 不 定 芽 增 殖 切 下 不 定 芽 ， 垂 直 插 入 不 定 芽 增 殖 培 养 基 中 ， 插 入 深 度 0 . 5 c m 左 右 ， 培 养

11、3 0 d 。 待 分 化 的 不 定 芽 形 成 芽 丛 后 ， 分 割 新 长 出 的 不 定 芽 。 可 按 需 求 重 复 继 代 。 1 0 生 根 培 养 选 取 培 养 瓶 中 长 度 2 c m 3 c m 生 长 健 壮 的 不 定 芽 转 接 至 生 根 培 养 基 中 ， 插 入 深 度 为 0 . 5 c m ， 培 养 2 0 d 。D B 2 3 / T 3 0 3 3 2 0 2 1 3 1 1 炼 苗 、 温 室 移 栽 及 管 理 1 1 . 1 炼 苗 在 组 培 苗 根 长 至 2 c m 3 c m 时 ， 在 培 养 室 中 半 开 封 口 膜 放 置

12、 1 d ， 再 去 掉 封 口 膜 放 置 1 d ， 用 镊 子 取 出 组 培 苗 ， 用 自 来 水 冲 洗 附 着 在 根 上 的 培 养 基 ， 放 入 底 部 装 有 自 来 水 的 三 角 瓶 中 水 培 ， 水 的 深 度 以 没 到 组 培 苗 根 颈 部 为 宜 ， 2 d 后 移 栽 。 1 1 . 2 温 室 移 栽 及 管 理 1 1 . 2 . 1 移 栽 准 备 将 蛭 石 在 1 2 1 高 压 灭 菌 锅 中 灭 菌 2 0 m i n ， 放 凉 后 装 入 规 格 为 1 0 c m 1 1 c m 8 . 5 c m 的 花 盆 中 ， 装 至 花 盆

13、 高 度 的 2 / 3 ， 压 实 。 1 1 . 2 . 2 移 栽 取 出 组 培 苗 ， 在 散 射 光 下 移 栽 至 花 盆 的 蛭 石 中 ， 使 根 尽 量 伸 展 开 ， 压 实 ， 浸 透 水 ， 放 入 人 工 气 候 箱 内 缓 苗 ， 培 养 条 件 为 2 4 2 8 ， 光 周 期 为 1 4 h / d ， 光 照 强 度 3 0 0 0 L u x ， 空 气 相 对 湿 度 6 0 % 8 0 % 。 1 5 d 后 移 至 温 室 。 1 1 . 2 . 3 移 栽 后 管 理 移 栽 初 期 ， 保 持 空 气 湿 度 6 0 % ， 适 时 浇 水 ， 保 持 基 质 湿 润 ， 温 度 控 制 在 1 8 2 5 。 生 长 期 见 干 见 湿 。 定 期 除 草 。 1 2 生 产 档 案 应 建 立 生 产 档 案 ， 内 容 包 括 ： 环 境 与 设 备 消 毒 、 培 养 基 配 制 、 外 植 体 的 制 备 、 培 养 条 件 、 不 定 芽 诱 导 、 不 定 芽 增 殖 、 生 根 培 养 、 炼 苗 、 温 室 移 栽 及 管 理 等 。 _