DB42 T 1786.1-2021 生猪疫病防控技术 第1部分：伪狂犬病监测评估技术规程.pdf

1、 ICS 65.020.30 CCS B 41 DB 42 湖北省地方标准 DB42/T 1786.1 2021 生猪疫病 防控技术 第 1 部分 ： 伪狂犬病 监测评估 技术规程 Prevention and control technology of Swine diseases Part 1: Code of practice for the monitoring and evaluating of porcine pseudorabies 2021 - 12 - 23 发布 2022 - 02 - 23 实施 湖 北 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB42/T 1786.1

2、2021 I 目 次 前言 . III 引言 . V 1 范围 . 1 2 规 范性 引用 文件 . 1 3 术 语和 定义 . 1 4 样 品处 理与 检测 方法 . 2 样品 的采 集与 处理 . 2 检测 方法 . 2 5 疫 苗免 疫监 测与 评估 . 2 免疫 抗体 监测 与评 估 . 2 群体 抗体 水平 监测 与 评估 . 2 6 免 疫净 化监 测与 评估 . 3 病原 学监 测 . 3 血清 学监 测 . 3 结果 判定 . 3 7 非 免疫 净化 效果 监测 与 评估 . 3 检测 项目 . 3 抽样 方法 . 3 结果 判定 . 4 附录A （资 料性 ） 免疫 猪群体

3、抗体 水平 监测 抽样 数量 . 5 附录B （资 料性 ） 本底 调查抽 样数 量 . 6 附录C （资 料性 ） 免疫 净化阶 段 抽 样数 量 . 7 附录D （资 料性 ） 非免 疫净化 阶段 抽样 数量 . 8 DB42/T 1786.1 2021 III 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分： 标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规 定 起草。 本文件 是DB42/T 1786 生 猪疫病 防控 技术 的 第1 部 分。DB42/T 1786 已 经发 布 了以下 部分 ： 第1部分 ： 伪狂 犬病 监 测评估 技术 规程 ； 第2

4、部 分： 传染 病胸 膜 肺炎监 测评 估技 术规 程。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由湖 北省 农业 科学 院提出 。 本文件 由湖 北省 农业 农村 厅归口 。 本文件 起草 单位 ： 湖北 省 农业科 学院 畜牧 兽医 研究 所， 湖北 省动 物疫 病预 防 控制中 心 ， 华 中农 业大 学，武 汉市 动物 疫病 预防 控制中 心， 武汉 市江 夏区 金龙畜 禽有 限责 任公 司。 本文件 主要起 草人 ：田永 祥、段 正赢、 梁 婉 、宋 念 华、吴 斌、 阮 征 、李婷 婷、周 丹娜、 彭 忠、

5、 樊 杰 、金 鑫、 万 云、 黎 巧、 王 军 、刘 李娟 。 本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话：027-87665821 ， 邮 箱 ： ； 对本 标 准的有 关修 改意 见或 建议 ， 请 反馈 至湖 北省 农业 科 学院畜 牧兽 医研 究 所 ， 联 系 电话：027-87156122 ，电 子邮箱 ： 。 DB42/T 1786.1 2021 V 引 言 猪 伪 狂 犬病 和 猪传 染 性胸膜 肺 炎 每年 给 养猪 业 造成巨 大 的 经济 损 失， 严 重制约 我 国 养猪 业 健康 发 展。 结 合前 期丰 富的 临床 工作经 验， 通过 本文 件的 制

6、定， 建立 相关 疫病 检测 、 监测 技术 ， 有 助于 满 足 猪 场对疫 病检 测 、 监 测工 作 的需求 ， 提升 生猪 疫病 防 控水平 。DB42/T 1786 拟 由 以下部 分构 成 ， 具 体如 下 ： 第1 部分 ：伪狂 犬病 监 测评估 技术规 程。 目的在 于对采 用的检 测技 术，监 测群体 的规模 以及 监 测频次 提出 相应 的规 范要 求。 第2 部分 ：传染 性胸 膜 肺炎监 测评估 技术 规程。 目的在 于对猪 传染 性胸膜 肺炎的 检测、 预防 和 治疗提 出相 应的 规范 要求 。 本文件 为系 列文 件 ， 目 的 是针对 猪伪 狂犬 病和 猪传 染

7、性胸 膜肺 炎提 出对 应检 测、 监测 技术 要求 。 之 后涉及 不同 病原 的检 测、 监测规 定， 归为 本文 件的 不同部 分。 DB42/T 1786.1 2021 1 生 猪疫病 防控技术 第 1 部分： 伪 狂犬病 监测评估 技术规 程 1 范围 本文件 规定 了猪 伪狂 犬病 监测评 估技 术过 程中 的样 品处理 与检 测方 法、 疫苗 免疫监 测与 评估 、 免 疫 净化监 测与 评估 及非 免疫 净化效 果监 测与 评估 。 本文件 适用 于猪 场伪 狂犬 病的监 测评 估。 2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必

8、 不可 少的 条款 。 其 中 ， 注日 期的 引用 文件 ， 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件； 不注 日期 的引 用文件 ， 其 最新 版本 （包 括所有 的修 改单 ） 适 用 于 本 文件。 GB/T 18641 伪 狂犬 病诊 断方法 GB/T 35911 伪 狂犬 病病 毒荧光PCR 检测 方法 NY/T 678 猪伪 狂犬 病免 疫酶试 验方 法 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。 伪狂犬 病 pseudorabies ，PR 由 伪狂 犬病 病毒 （Pseudorabies Virus ，PRV ） 感 染引 起的多 种家 畜和 野生 动物 共患

9、的 急性 、 热 性 传 染病， 除猪以 外的 其他动 物均呈 致死性 感染 。感染 猪以 繁 殖障碍 、神 经症状 和呼吸 道症状 为主 要特征 。 仔猪可 见明显 脑膜 充血水 肿、脑 脊液明 显增 多，鼻 粘膜和 咽部广 泛充 血，肺 水肿、 出血和 小叶 性肺炎 ， 肺表面 有时 可见 白色 坏死 灶。母 猪返 情， 公猪 精液 质量下 降。 成年 猪眼 观病 变微弱 。 疫苗免 疫 vaccination 采 用人 工方法 将疫 苗 接种至 动物机 体， 使宿主 自身的 免疫系 统产 生对相 关传染 病的特 异性 免疫力 。 伪 狂犬 病病 毒 gB 抗体 PRV gB antibo

10、dy 针对伪 狂犬 病毒 gB 糖蛋 白产生 的抗 体。 使用 gB-ELISA 检测血清 中的 PRV gB 抗 体，可 用于 疫苗 免疫状 况评 估， 也可 用于 非免疫 群体 血清 学诊 断和 疫情监 控。 伪 狂犬 病病 毒 gE 抗体 PRV gE antibody 针对伪 狂犬 病毒 gE 糖 蛋 白产生 的抗 体。 使用 gE-ELISA 检测血清 中的 PRV gE 抗体 ，可 用于 监测 和评估 PRV 感染 状况 。 净化 elimination DB42/T 1786.1 2021 2 以消灭 和清除 传染 源为目 的，在 特定区 域或 场所对 某种或 某些重 点疫 病实

11、施 的有计 划的消 灭过 程 ， 以达到 该范 围内 个体 无感 染状态 和不 发病 状态 。 4 样品处 理与 检测 方法 样品的 采集 与处 理 采用NY/T 678 中 的方 法 ， 采集 、 处 理猪 的扁 桃体 、 脑组织 （ 含三 叉神 经节 ） 、 血 清、 口鼻 拭子 等样 品。 检测方 法 4.2.1 病原检 测 按照GB/T 35911 中的 方法 执行。 4.2.2 抗体检 测 按照GB/T 18641 中的 方法 执行。 5 疫苗免 疫监 测与 评估 免疫抗 体监 测与 评估 5.1.1 检测项 目 检测血 清样 品中 的 伪 狂犬 病病毒gE 、gB 抗体 。 5.1

12、2 抽样方 法 按照疫 苗免 疫猪 数量 的10% 进行抽 样， 随机 采集 每次 疫苗免 疫后28天 的血 清样 品。 5.1.3 结果判 定 选择gE 抗体 阴性 、gB 抗体 阳性的 样品 用于 免疫 抗体 水平判 定如 下： a) 后备种 猪：gB 抗 体阳 性检 出率 为 100%， 则 为免 疫合 格；gB 抗体 阳性 检出 率100%， 则 免疫 不 合格； b) 生产种 猪 ：gB 抗体 阳性 检 出率90% ，则 为免 疫合 格 ；gB 抗体 阳性 检出 率90% ，则 免疫 不合 格； c) 保育猪 ： gB 抗 体阳 性检 出 率80% ， 则为 免疫 合格 ； gB

13、抗体 阳性 检出 率80% ， 则免疫 不合 格； d) 商品猪 ： gB 抗 体阳 性检 出 率70% ， 则为 免疫 合格 ； gB 抗体 阳性 检出 率70% ， 则免疫 不合 格。 群体抗 体水 平 监 测与 评估 5.2.1 检测项 目 检测猪 血清 中的 伪 狂 犬病 病毒gE 、gB 抗体 。 5.2.2 抽样方 法 根据本 标准附 录A中 规定 的 采样数 量要求 ，随 机采集 不同猪 群 的血 液， 制备血 清。监 测频率 为1次/ 半年。 DB42/T 1786.1 2021 3 5.2.3 结果判 定 选择gE 抗体 阴性 、gB 抗体 阳性的 样品 用于 群体 抗体 水

14、平判 定如 下： a) gB 抗 体阳 性检 出率 80% ，则为 免疫 合格 ； b) gB 抗 体阳 性检 出率 介于 70% 80% 之间 ， 则1 个月 后 再次监 测 ，根 据监 测结 果 确定是 否需 要加 强免疫 ； c) gB 抗 体阳 性检 出率 70% ，则需 加强 免疫 。 6 免疫净 化监 测与 评估 病原学 监测 6.1.1 检测项 目 检测 疑 似病 例的 病原 。 6.1.2 抽样对 象 对所有 疑似 病例 进行 采样 检测。 血清学 监测 6.2.1 检测项 目 检测血 清样 品中 的 伪 狂犬 病病毒gE、gB抗 体。 6.2.2 抽样方 法 本底调 查阶 段

15、 按本 标准 附录B 中规 定的 抽样 数量 要 求，随 机采 集不 同猪 群的 血清样 品。 免疫净 化阶 段： 按本 标准 附录C 中规 定的 抽样 数量 要 求，随 机采 集不 同猪 群的 血清样 品。 净化维 持阶 段： 按本 标准 附录D 中规 定的 抽样 数量 要 求，随 机采 集不 同猪 群的 血清样 品。 结果判 定 当gB抗 体阳 性率 80%时，对gE抗 体水 平进 行判 定如 下： a) 若gE 抗体 为阴 性， 则该 场 不存在 伪狂 犬病 病毒 野毒 感染， 达到 净化 标准 ； b) 若gE 抗体 阳性 检出 率10% ，则 该场 存在 伪狂 犬病 病 毒野毒 感

16、染 ，可 检测 淘汰 阳性猪 ； c) 若gE 抗体 阳性 检出 率10% ，则 该 场 伪狂 犬病 病毒 感 染率较 高， 应加 强免 疫控 制； d) 若病原 检测 结果 为阳 性， 则该场 存在 伪狂 犬病 病毒 感染和 排毒 ，应 对感 染毒 株进行 鉴定 。 7 非免疫 净化 效果 监测 与评 估 检测项 目 检测血 清样 品中 的gE 和gB 抗体及 疑似 病例 的伪 狂犬 病病原 。 抽样方 法 按本标 准附录D中规 定的 采 样数量 要求， 随机 采取不 同猪群 的血清 样品 。监测 频率为1 次/半 年。 随 机采集 母猪 流产 胎儿 组织 、产房 中弱 仔及 疑似 病例 的

17、组织 样品 。 DB42/T 1786.1 2021 4 结果判 定 停止疫 苗免疫24个 月以上 ，无临 床病例 且gB 、gE抗 体均为 阴性， 可判 定该场 达到非 免疫净 化要 求 。 若不满 足以 上任 何1 项， 可 判定为 未达 到非 免疫 净化 要求。 DB42/T 1786.1 2021 5 A A 附录A （资料 性） 免疫猪 群体 抗体 水平 监测 抽样数 量 表A.1 给出 了免 疫猪 群体 抗体水 平监 测抽 样的 数量 。 表A.1 免疫猪 群体 抗体 水平 监测 抽样数 量 群 体 抽样数量（头） 公猪 群体数量50 头，全釆； 群体数量50 头，50% 比例采

18、样 后备种猪 30 妊娠中期母猪 30 妊娠后期母猪 30 哺乳母猪 30 保育猪（30 日龄 40 日龄） 30 育肥前期（70 日龄80 日龄） 30 育肥中期（100 日龄110 日龄 ） 30 育肥后期（140 日龄150 日龄 ） 30 DB42/T 1786.1 2021 6 B B 附录B （资料 性） 本底调 查抽 样数 量 表B.1 给出 了本 底调 查阶 段 群体抽 样的 数量。 表B.1 本底调 查抽 样数 量 群体数量（头） 本底调查阶段（头） 50 38 100 61 200 86 300 101 400 110 500 116 750 126 1000 131 20

19、00 140 3500 144 5000 146 7500 148 10000 148 148 注： 本底调查阶段为最大限度了解养殖场各种疫病的流行状况， 采用估计流行率策略， 设定预期流行率为50%，检 测方法置信区间为95% ， 可接受 误差为8% 。 养殖场可根据实际 情况， 选取其中一种方法抽样： 方法一 ， 根据群 体总数量计算出总样品量， 按照公猪、 后备种猪、 妊娠中期母猪、 妊娠后期母猪、 哺乳母猪、 保育猪 （30 日 龄 40日龄） 、 育肥前期 （70 日龄80日龄） 、 育肥中期 （100日龄110 日龄） 、 育肥后期 （140日龄150 日龄） 在总群体中占比不同分

20、配不同阶段的抽样数量， 采取简单随机或系统随机方法采集样品； 方法二， 按 照不同阶段猪群的群体数量，分别计算不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品。 DB42/T 1786.1 2021 7 C C 附录C （资料 性） 免疫净 化阶 段抽 样数 量 表C.1 给出 了免 疫净 化检 测 阶段群 体抽 样的 数量 表C.1 免疫净 化阶 段抽 样数 量 群体数量（头） 免疫净化监测阶段（头） 50 23 100 26 200 28 300 28 400 29 500 29 750 29 1000 29 2000 29 3500 29 5000 29 7500 30 10000

21、 30 31 注1 ：净化进程监测阶段 为定期监测 动物疫病免疫水平 和感染状态 ，采用证明无疫策 略，设定预 期流行率为10%， 检测方法置信区间为95% ，敏感 性为98%。 注2 ：公猪全采， 其他群体按照后备种猪、 妊娠中期母猪、 妊娠后 期母猪、 哺乳母猪、 保育猪 （30 日龄40日龄） 、 育肥前期 （70日龄80 日龄） 、 育肥中期 （100日龄110 日 龄） 、 育肥后期 （140日龄150 日龄） 猪群的群 体数量，分别计算不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品。 DB42/T 1786.1 2021 8 D D 附录D （资料 性） 非免疫 净化 阶段

22、 抽样 数量 表D.1 给出 了非 免疫 净化 阶段群 体的 抽样 数量 。 表D.1 非免疫 净化 阶段 抽样 数量 群体数量（头） 非免疫净化阶段（头） 50 44 100 64 200 80 300 86 400 89 500 92 750 95 1000 96 2000 98 3500 99 5000 100 7500 100 10000 100 101 注1 ： 净化维持阶段为评估净化病种的无疫状态， 采用证明无疫 策略， 设定预期流行率为3%， 检测 方法置信区间 为95%，敏感性为98% 。 注2 ： 公 猪 全采 ， 其他 群 体按 照后 备种 猪 、妊 娠 中期 母 猪、 妊娠 后期 母 猪、 哺 乳母 猪 、保 育猪 （30 日龄 40 日 龄） 、 育肥前期 （70 日龄 80 日龄） 、 育肥中期 （100 日龄 110日龄 ） 、 育肥后期 （140 日龄 150日龄） 猪群的群体数量，分别计算不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品。