DB15 T 2687—2022 天然青干草中挥发性成分的测定 顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用法.pdf

1、 ICS 65.020.01 CCS B04 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 2687 2022 天然青干 草中挥发 性成分的 测定 顶空固相 微萃取-气 相色谱质 谱联用法 Determination of volatile components in native hay grass headspace solid-phase microextraction gas chromatography mass spectrometry 2022-07-15 发布 2022-08-15 实施 内蒙古自 治区市 场 监督管理 局 发 布 DB15/T 2687 2022 I 前 言 本文

2、件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规 定起草。本文件 由内 蒙古 农业 大学 提出。本文件 由内 蒙古 自治 区畜 牧业标 准化 技术 委员 会（SAM/TC 19）归口。本文件 起草 单位：内 蒙古 农业大 学、内蒙 古自 治区 农牧业 科学 院、中国 农业 科学院 草原 研究 所、巴林左旗 林业 和草 原局、呼 伦贝尔 学院。本文件 主要起 草人：贾玉 山、李 宇宇、格根 图、王 志军、孙林、特日 格乐、袁宁、马千鹏、常 春、降晓伟、都 帅、王伟、丁 霞、包 健、司强、刘 明健。DB15/T 2687 2022

3、1 天然青干 草中挥 发性成分 的测定 顶空固相 微萃取-气相色谱 质谱联 用法 1 范围 本 文 件 规定 了 天然 青 干草中 挥 发 性成 的 测定 顶 空固相 微 萃 取 气 相色 谱 质谱联 用 法 的仪 器 设备、试样制 备和 保存、分 析步 骤、结 果分 析与 计算 和精 密度。本文件 适用 于典 型草 原天 然青干 草中 醛、酮、醇类 等挥发 性成 分的 测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其

4、最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB/T 20195 动 物饲 料试 样的制 备 NY/T 2129 饲 草产 品抽 样 技术规 程 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。天然青 干草 native hay grass 天然草 地生 长的 经适 时刈 割、自 然晾 晒或 人工 干燥 的牧草。4 仪器设 备 固相微 萃取 装置，配 DVB/CAR/PDMS 纤维 萃取 头。气相色 谱 质谱 联用 仪。磁力搅 拌器（60 RPM 1150 RPM、5 550）。温度计（0 150）。分析天 平感 量0.01 g。5 试样制 备和 保存 抽样 DB15/T

5、2687 2022 2 按 照NY/T 2129 执行。分析样 品制 备 按照GB/T 20195 执行。试样保 存 置于-20 冰箱 中，24 h 内 完成分 析。6 分析步骤 萃取纤 维头 的老 化 6.1.1 DVB/CAR/PDMS 纤维 萃取 头 进行老 化。6.1.2 老化条 件：温 度 250，时间20 min，载气 流速1 mL/min。固相微 萃取（SPME）参 考 分析条 件 6.2.1 称取2 g 样 品置 于 20 mL 专用顶 空瓶 中，立 即密 封，置 加热 磁力 搅拌 器上70 预 热 5 min，然后将老 化后 的纤 维萃 取头 插入顶 空瓶 中进 行萃 取，不

6、要让 萃取 头接 触样 品。6.2.2 萃取条 件：温 度 70，萃取时间 60 min，解吸 时 间3 min。气相色 谱（GC）参考 分析 条件 6.3.1 气相色 谱柱：5%苯基 甲基 聚硅氧 烷石 英毛 细管 柱（30 m 0.25 mm 0.25 m），或 等效 色谱柱；6.3.2 色谱柱 升温 程序：起 始温 度 50，保留4 min，以5/min 上升 到200，保留 5 min 再以15/min，程 序升 温至250，保 持4 min。6.3.3 色谱条 件：进样 口温 度 250，载 气为 高纯 氦气 纯度 99.999%，载气 流速1 mL/min，进样 方式为手 动进 样

7、不分 流进 样模式。质谱（MS）参考 分析 条件 电离方 式EI，电 离电 压70 eV，离 子源 温度230，传输线 温度280，采集 方式为 全扫 描方 式，质量扫 描范 围40 m/z 550 m/z。7 结果分 析与 计算 使用NIST 数据 库定 性。质 谱图的 相似 度不 小 于 80%色谱峰，见 附 录 A。用峰面 积归 一化 法计 算各 挥发性 成分 的相 对含 量。按如下 公式 计算：（1）DB15/T 2687 2022 3 式中：Ci 试样 中挥 发性 成分i 的峰面 积分 数，以百 分数 表示（%）；Ai 试样 中挥 发性 成分i 的峰面 积；试 样中 各挥 发性 成

8、分 的峰面 积之 和。8 精密度 在重复 性条件 下获 得的2 次 独立测 定结果 的绝 对差值 不得超 过算术 平均 值10%，结果保 留小数 点后2位数字。DB15/T 2687 2022 4 A A 附录A（资料 性）典型草 原天 然青 干草 挥发 性成分 总离 子流 图 A.1 典型草 原天 然青 干草 挥发 性成分 总离 子流 图（TIC）见图 A.1，典型 草原 天然 牧 草干草 主要 挥发 性成分质 谱鉴 定结 果见 表 A.1。图A.1 典型 草原 天然 青干 草挥 发 性成分 总离 子流 图（TIC）表A.1 典型 草原 天然 青干 草主 要 挥发性 成分 质谱 鉴定 结果

9、序号 保留时间（min）化合物 英文名称 CAS 号 1 15.428 十九碳三烯 Nonadeca-3,6,9-triene 89353-62-8 2 21.34 丁香酚 Eugenol 97-53-0 3 22.631 甲基丁香酚 Methyleugenol 93-15-2 4 23.016-石竹烯-Caryophyllene 87-44-5 5 23.74 香叶基丙酮 Geranyl acetone 3796-70-1 6 24.543-姜黄烯-curcumene 644-30-4 7 24.702-紫罗兰酮-ionone 79-77-6 8 25.182 2,5-乙烯4.2.2 丙基-3,7,9-三烯 2,5-Etheno4.2.2propella-3,7,9-triene 92-52-4 9 25.679 芳姜黄酮 ar-tumerone 38142-58-4 10 26.096 二氢猕猴桃内酯 Dihydroactinidiolide 15356-74-8 11 27.102 桉油烯醇 Spathalenol 77171-55-2 12 28.896 氧化石竹烯 Caryophyllene oxide 1139-30-6 13 32.643 6,10,14-三甲基-2-十五烷酮 6,10,14-Trimethyl-2-pentadecanone 205-69-2