1、 ICS 11 220 CCS B 41 4117 驻马店市地方标准 DB 4117/T 169.26 2022 代替 DB4117/T 169.26-2018 动物疫病 流行病学 调查技术 规范 第26 部分:鸡马立 克氏病 2022-07-26 发布 2022-8-26 实施 驻马店市 市场监 督 管理局 发 布 DB 4117/T 169.26 2022 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分:标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。本文件 是DB4117/T 169 动物疫 病流 行病 学调 查技 术规范 的 第26 部分。本文件
2、代替DB4117/T 169.26-2018 动物 疫病 流行 病 学调查 技术 规范 第26 部分 鸡 马 立克 氏 病,与DB4117/T 169.26-2018 相比,除编 辑性 修改 外,主要技 术变 化如 下:补充和 修改 了规 范性 引用 文件(见 第 2 章);细化和 完善 了紧 急流 行病 学调查 技术 要求(见 第 7 章的 7.1、7.2、7.3、7.4、7.5);修改了 规范 性附 录(见附 录 A、附录B、附录C);修改了 病毒 分离 鉴定(见 第 5 章的 5.4.3.1);修改了 病理 变化(见 第 5 章的5.3);删除了 病理 组织 学诊 断(见 2018 版的
3、 4.4.2);修改了 鸡马 立克 氏病 诊断 结果判 定(见 第5 章的 5.5);增加了 生物 安全 个人 防护 内容(见 第 4 章的 4.1、4.2);增加了 荧光 定 量PCR 检测 方法(见 第5 章的 5.4.3.3);本文件 由驻 马店 市农 业农 村局提 出。本文件 由驻 马店 市畜 牧兽 医标准 化技术 委 员会 归口。本文件 起草 单位:驻马 店 市动物 疫病 预防 控制 中心、确 山县 留庄 镇农 业农 村 服务中 心、西 平县 农业综合行 政执 法大 队、温县 动物疫 病 预 防控 制中 心、鲁山县 农业 农村 局、泌阳 县动物 卫生 监督 所、焦 作 市动物卫 生监
4、 督所、正阳 县 动物疫 病预 防控 制中 心、泌阳县 动物 疫病 预防 控制 中心、确 山县 农业 综合 行 政执法大 队、确 山县 公共 检 验检测 中心、鹿邑 县谷 阳 街道办 事处 社区 建设 服务 中心、西 平县 动物 疫病 预 防控制中 心、许 昌市 动物疫 病预防 控制中 心、周口市 川汇区 动物检 疫站、汝南 县畜牧 兽医技 术服 务中 心、沁阳市 农业 综合 行政 执法 大队、商丘 市畜 产品 质量 监测检 验中 心、汝南 县畜 牧改良 站。本文件 主要起 草人:李永 彬、刘 霞、刘 国强、王梦 艳、王 国超、吴明 丽、白 金、马 萌萌、武长 水、王倩、黄旭、曹华、周 雪 梅
5、、葛 会杰、王云 丽、节琴、李艳 艳、郭勇、谢 萌、陈东 坤、刘强。本文件 的历 次版 本发 布情 况为:DB4117/T 169.26-2018。DB 4117/T 169.26 2022 2 动 物疫病 流行病学 调查技 术规范 第 26 部分:鸡马立 克氏病 1 范围 本文件 规定了 鸡马 立克氏 病 术语 和定义、现 场调查 生物安 全防护、诊 断指标、常规 流行病 学调 查、紧急流 行病 学调 查等 技术 要求。本文件 适用 于 鸡 马立 克氏 病 的流 行病 学调 查。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。
6、其 中,注日 期的 引用 文件,仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件;不注 日期 的引 用文件,其 最新 版本(包 括所有 的修 改单)适 用 于 本文件。GB/T 18643-2021 鸡 马立 克氏病 诊断 技术 NY/T 541 动物 疫病 实验 室 检验采 样方 法 DB4117/T 169.1 动 物疫 病 流行病 学调 查技 术规 范 第1部分 总则 DB4117/T 217.1 动 物疫 病 紧急流 行病 学调 查技 术指 南 第1 部分 总则 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 鸡 马立 克氏 病 马立克 氏病,是 由马 立克 氏病病 毒引 起
7、的,以 危害 淋巴系 统和 神经 系统,引 起外周 神经、性 腺、虹膜、各 种内 脏器 官、肌肉 和皮肤 的单 个或 多个 组织 器官发 生肿 瘤为 特征。3.2 动物 疫情 测报 网络 简称测 报网 络,是 由市、县 动物疫 病预 防控 制机 构为 监测主 体,以 部分 养殖 企 业为监 测网 点所 组成的动物 疫情 测报 系统。全 市测报 网络 分为 市级 和县 级。3.3 市、县级 测报 网络 分别指 市级 动物 疫病 预防 控制机 构、县级 动物 疫病 预防控 制机 构负 责的 测报 网络。3.4 市、县级 动物 疫情 测报 网 络监测 网点(简 称市、县 级监测 网点)分别指 由市
8、级动 物疫 病预 防控制 机构、县 级动 物疫 病预防 控制 机构 负责 监测 的样品 采集 点。DB 4117/T 169.26 2022 3 4 现场调 查生 物安 全防 护 调查采 样人 员防 护 4.1 4.1.1 个人防 护穿戴 顺序。依次 是口罩、工作 帽、防护服、防护 眼睛、防护 靴、双 层手套,将手 套 套在防护 服袖 口外 面。4.1.2 个人防 护脱掉 顺序。依次 是脱第 一层手 套、摘下防 护眼睛、脱防 护服、脱防 护靴、摘帽子、脱一只手 套、摘口 罩、脱掉 另一只 手套。安全防 护要 求 4.2 4.2.1 严格遵 守生物 安全 操作的 相关规 定,严 防人 畜共患 病
9、感染,同时 做好 环境消 毒及动 物活组 织 的无害化 处理。4.2.2 调查 采样 人员 在开 展流 行 病学调 查过 程中 不得 造成 流行病 学调 查点 之间 交叉 感染。5 诊断指 标 流行特 点 5.1 鸡是主 要的 自然 宿主。2 周 龄以内 的雏 鸡最 易感。6 周 龄以上 的鸡 可出 现临 床症 状,12 24 周 龄最为严重。病鸡 和带 毒鸡 是 最主要 的传 染源。呼吸 道 是主要 的感 染途 径,羽 毛 囊上皮 细胞 中成 熟型 病毒 可随着羽 毛和 脱落 皮屑 散毒。病毒 对外 界抵 抗力 很强,在室 温下 传染 性可 保 持48 个月。临床症 状 5.2 5.2.1
10、神经 型 最早症 状为 运动 障碍。常 见腿和 翅膀 完全 或不 完全 麻痹,表现 为“劈 叉”式、翅膀下 垂;嗉囊 因麻痹而扩 大。5.2.2 内脏型 常表现 极度 沉郁,有 时不 表 现任何 症状 而突 然死 亡。有 的病鸡 表现 厌食、消 瘦和 昏 迷,最 后衰 竭而 死。5.2.3 眼型 视力减 退或 消失。虹 膜失 去正常 色素,呈 同心 环状 或斑点 状。瞳孔 边缘 不整,严重 阶段 瞳孔 只 剩 下 一个针尖 大小 的孔。5.2.4 皮肤型 全身皮 肤毛 囊肿 大,以大 腿 外侧、翅膀、腹 部尤 为明 显。病理变 化 5.3 5.3.1 内脏型 该类型 病理变 化为 在肝、性腺、
11、脾、肾、肺、前胃 以及心 脏出现 广泛 的弥漫 性肿瘤。青年 鸡的 肝 脏一般中 度肿 大,但成 年鸡 肝脏严 重肿 大。DB 4117/T 169.26 2022 4 5.3.2 神经型 该类型 病理 变化 为外 周神 经肿胀,呈 半透 明水 肿样,色泽 变淡,横 纹消 失,其 肿胀程 度一 般为 正 常神经 的 2 3 倍。这 些变 化 多发生 在腰 荐神 经丛、坐 骨神经 丛、臂神 经丛、颈 部迷走 神经 丛等 部位。由于多为 不对 称性,通 过比 较对侧 神经 将有 助于 判定。5.3.3 皮肤型 该类 型病 理变 化比 较 少见。其病 理变 化特 征为:以皮肤 的羽 毛囊 为中 心,
12、形 成半球 形隆 起的 肿瘤,其表面 有时 可见 鳞片 状棕 色痂皮。5.3.4 眼型 该类型 由于 淋巴 细胞 浸润 虹膜而 导致 的病 理变 化,虹膜呈 环状 或斑 点状 褪色,出 现淡 灰色;瞳孔 不规则,有时 偏向 虹膜 一侧。实验室 检测 5.4 5.4.1 样品采 集 疑似 鸡 马立 克氏病 时,应 立即按 照 GB/T 18643 和NY/T 541 的要 求 采集 病料 并 填写样 品采 集登 记表(附录A),进 一步 进行 实 验室诊 断。5.4.2 血清学 诊断 琼脂免 疫扩 散试 验检 测按 照 GB/T 18643 鸡马 立克 氏病诊 断技 术第 五章 节规 定执行。5
13、.4.3 病原学 诊断 5.4.3.1 病毒分 离鉴 定按 照 GB/T 18643 鸡马 立克 氏病 诊断 技 术第四 章节 规定 执行。5.4.3.2 聚合酶 链式 反应 试验 按 照GB/T 18643 鸡 马立 克氏 病 诊断技 术第 六章 节规 定执 行。5.4.3.3 荧光定 量PCR 按照 GB/T 18643 鸡马 立克 氏病 诊断 技 术第七 章节 规定 执行。结果 判定 5.5 5.5.1 临床检 测鸡只 或相 关细胞 培养物,经病 毒分 离,或 琼脂免 疫扩散 试验,或聚 合酶链 式反应 试 验检测,或 实时 荧光 聚合 酶链 式反应 试验 检测,其中 一种 方法检 测为
14、 阳性,可判 定为 鸡马立 克氏 病 毒 感 染。5.5.2 临床疑 似判定 发生 鸡马立 克氏病 的鸡只,经 分离出 鸡马立 克氏病 毒且 鉴定为 野毒株 感染,或 经琼脂免 疫扩 散实 时检 测出 抗原阳 性,或经 聚合 酶链 式反应 试验 检测 结果 符合 野毒株 特征,可 判 定 为 鸡 马立克氏 病。5.5.3 临床无 明显特 异症 状的鸡 只,经 分离出 鸡马 立克氏 病毒且 鉴定为 野毒 感染,或经聚 合酶链 式 反应试验 检测 结果 符合 野毒 株特征,判 定为 存在 鸡马 立克氏 病毒 野毒 株感 染。5.5.4 临床无 明显特 异症 状的鸡 只,分 离出鸡 马立 克氏病 毒
15、且鉴 定为疫 苗株 感染,或经聚 合酶链 式 反应试验 检测 结果 符合 疫苗 株特征,判 定为 正常 的鸡 马立克 氏病 疫苗 免疫。6 常规流 行病 学调 查 DB 4117/T 169.26 2022 5 目的任 务 6.1 调查 鸡 马立 克氏 病 的 发生 情况,了解 其临 床症 状、流行强 度和 流行 规律,为 预警预 报提 供依 据,提出防控 措施 建议。调查程 序 6.2 6.2.1 县级动 物疫病 预防 控制机 构以县 级监测 网点 和固定 流行病 学调查 点为 流行病 学调查 点,每 个 监测网点 每年 不少 于2 次,固定流 行病 学调 查点 每月 实施 1 次,每月 对
16、调 查数 据进行 分析 汇总 同 时 填 写 附录B、附录C 相 关表 格并 上报至 市级 动物 疫病 预防 控 制机 构。6.2.2 市级动 物疫病 预防 控制机 构以市 级监测 网点 和固定 流行病 学调查 点为 流行病 学调查 点,每 个 监测网点 每年 不少 于2 次,固定流 行病 学调 查点 每月 实施 1 次,每月 对全 市调 查数据 进行 分析 汇 总 同 时 填写附 录B、附录C 相 关表 格并上 报至 省、市级 动物 疫病预 防控 制机 构。6.2.3 国家有 特殊 要求 的,按照 要求进 行。调查要 求 6.3 采用询 问、信访、问 卷填 写、现 场查 看、查阅 资料 和检
17、测 等方 式进 行流 行病 学调查,同 时分 动 物 种类填写 常规 流行 病学 调查 表及相 关养 殖场 信息(附 录B、附录C)。7 紧急流 行病 学调 查 在常规 调查 过程 中发 现 鸡 马立克 氏病 较短 时候 内出 现大批 鸡群 发病,且 蔓延 较 快时启 动紧 急流 行 病学调查。目的任 务 7.1 掌握 鸡马 立克 氏病 突发 情 况,分 析可 能扩 散范 围,为预警 预报 提供 依据,提 出防控 措施 建议。调查程 序 7.2 7.2.1 市、县 级动物 疫病 预防控 制机构 接到疑 似病 例报告 或调查 中发现 疑似 病例,应立即 核实信 息,进行初 步调 查并 填写 紧急
18、 流行病 学调 查表(见 DB4117/T 217.1 规 范性 附录),同时 按规 定报 告疫 情至市级动 物疫 情主 管部 门。市 级动物 疫情 主管 部门 接到 报告后 立即 组织 市级 动物 疫病预 防控 制机 构开 展 现场调查。7.2.2 市级动 物疫病 预防 控制机 构按照 市动物 疫情 主管部 门的要 求及时 派专 业技术 人员深 入现场 开 展流行病 学调 查。7.2.3 采集样 品时 进行 实验 室检 测。疑 似 鸡 马立 克氏 病 时,应立 即按 照 GB/T 18643 和 NY/T 541 的要求采集 病料 并填 写样 品采 集登记 表(附 录A)进行 实验室 诊断。
19、7.2.4 现场调 查人 员进 一步 核实 情况后,采 集有 关信 息,详细、全面、准 确收 集相 关信息。7.2.5 现场调 查人员 根据 获取的 信息,描述动 物疫 情现状(时间、空间 和群 间分布 等),分析疫 病 来源,判 断疫 情发 展趋 势,提出控 制措 施建 议,形成 调查评 估报 告。怀疑 疫情 扩散时,在 高风 险 地 区 开 展追踪调 查。7.2.6 对现场 调查 人员 的调 查评 估报告 进行 审核 并及 时上 报至市 级动 物疫 情主 管部 门。工作要 求 7.3 DB 4117/T 169.26 2022 6 采取问 卷调 查、现场 调查、查阅 历史 资料 和采 样检
20、 测相结 合的 方式 进行。结合全 市流 行病 学调 查方 案按时 完成 调查、采 样和 检测工 作,并及 时收 集数 据、汇 总和 分析,撰 写 调查报告。调查 步骤 和内 容 7.4 组织准 备、确定 疫情 存在、建立 病例 定 义、开 展调 查按照DB4117/T 217.1 执 行。结果分 析和 报告 7.5 描述病 例的 三间 分布、建 立并验 证假 设、措施 建议 及报告 按照DB4117/T 217.1 执行。A A DB 4117/T 169.26 2022 7 附录A(资料 性)样品登 记表 表A.1 规定 了样 品采 集登 记表。表A.1 样品 采集 登记 表 县/乡 名称
21、:被采样单位名称 采样地点 联系人 联系电话 邮编 动物类别 样品名称 采样日期 动物种类 日龄 存栏量 样品数量 样品编号 被采样动物 临床情况 被采样动物免疫情况 免疫 病种 疫苗类型 疫苗 厂家 疫苗批号 免疫 次数 末次免疫剂量 末次免疫至采样的 间隔天数 检测目的 被采样单位盖章或签名 年 月 日 采样单位盖章 采样 人 签名 年 月 日 备注 注1:样品类型指全血、血清、拭子、组织样品等。注2:动物种类指蛋种鸡、肉种鸡、商品鸡、蛋鸭、肉鸭等。注3:疫苗类型应注明,禽流感疫苗标注毒株类型。此单一式三份,第一联由采样单位保存、第二联随样品、第三联由被采样单位保存。B B DB 4117
22、/T 169.26 2022 8 附录B(资料 性)流行病 学调 查表 表B.1 规定 了鸡 场/户流 行 病学调 查表。表B.1 鸡场/户 常规 流行 病学调 查表 场/户名称 开始养禽时间 年 月 禽场地址 县 乡/镇/街道办 村;东经,北纬。1 现养殖情况(头)蛋种鸡 商品蛋鸡 肉种鸡 商品肉鸡 种鸭 蛋鸭 肉鸭 鹅 其它:品 种 现存栏(羽)去年出栏(羽)2 防疫状况 动物防疫条件合格证:有 无 防疫设施:场舍有门禁 入口有消毒设施 进 场消毒、换胶靴 定期消 毒 养殖场相对独立 病死动物无害化处理设施:场内有 场内无 交无害化处理厂 3 疫苗使用情况 疫苗种类 毒 株 生产企业 4
23、临床疑似疫病发病情况(时间是发病的月份;发病数、死亡数是绝对数,不是%)。病 种 时间 发病数 死亡数 主要症状 备注:1.经度和纬度保留6 位 小数,例如:东经 116.044722 度,北纬 36.077222 度。2.本表格仅作为流行病学调 查专用,信息严格保密,请如实填写。填 表人:联 系电 话:填表 日期:年 月 日 C C DB 4117/T 169.26 2022 9 附录C(资料 性)疫苗临 床应 用效 果流 行病 学调查 表 表C.1 规定 了禽 疫苗 临床 应用效 果流 行病 学调 查表。表C.1 禽 疫苗 临床 应用 效 果流行 病学 调查 表 养殖场户名称 启用时间 地
24、 址 市 县(区、市)乡(镇)村 一、养殖情况 规模蛋种鸡场 规模蛋 鸡场 规模肉种鸡场 规模肉鸡场 规模 种鸭场 规模蛋鸭场 规模肉鸭场 规模鹅 场 散养鸡 散养鸭 散养 鹅 目前存栏数量:去年出栏量:年末存栏量:二、高致病性禽流感疫苗应用情况 疫苗种类 疫苗毒株 生产企业 三、免疫注射安全(免疫注射 3 天内,发生的临床现象)1、免疫应激 免疫数:应激反应数:应激发病数:应激死亡数:2、应激减蛋率(蛋禽、种禽场填写)最近一次免疫时间:免疫前 3 天产蛋枚数:免疫后 3 天产蛋枚数:四、疫苗使用后有效性(免疫保护期内,临床怀疑高致病性禽流感发病情况)生产企业 免疫数 发病时间 发病数 发病死亡数 总体评价:好 一般 效果不明显 无效 免疫程序:填表人:联系方式:填表时间:年 月 日
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