1、 ICS 65.020.01 CCS B 21 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 41482025 马铃薯大茎尖快速脱毒技术规程 Code of practice for rapid detoxification of potato bigger stem tips 2025-08-15 发布2025-09-15 实施内蒙古自治区市场监督管理局发 布 DB15/T 41482025 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC 20）归口
2、本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业技术推广中心、内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古农业大学。本文件主要起草人：梁东超、苏敏莉、郝文胜、赵远征、王东、李倩、孙宇燕、张龙梅、李树生、邓澍、薛凯、郭琳、梁炳鲲、孟怀德、慕安琪、张素青、多利娜、林艺馨、张润茗、白玉婷、李燕敏、张鹏宇、赵倩、王静、刘羽、昊翔。DB15/T 41482025 1 马铃薯大茎尖快速脱毒技术规程 1 范围 本文件规定了马铃薯大茎尖快速脱毒技术的术语和定义、材料选择、催芽处理、材料消毒、材料扩繁、病毒钝化的技术和方法。本文件适用于马铃薯生产材料的高效快速脱毒。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必
3、不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 18133 马铃薯种薯 NY/T 1212 马铃薯脱毒种薯繁育技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。大茎尖 bigger stem tip 区别于常规0.1 mm0.3 mm茎尖分生组织，切取的0.5 mm以上植株茎顶端生长区段。病毒钝化 virus inactivation带病毒植株体经过特定条件处理后，其体内病毒丧失或侵染速度变慢的现象。4 材料选择 选择具有本品种/品系典型特性、生长健壮，按照 GB 18133 要求无类病毒的块茎作为
4、脱毒基础材料。5 催芽处理 将入选材料通过自然发芽，待顶芽生长至2 cm3 cm时待用。6 材料消毒 DB15/T 41482025 2 取 510 个 1 cm 顶芽放入烧杯中，用 2 层纱布封口，在自来水下冲洗 20 min30 min；然后用75%酒精浸泡 10 s，无菌水冲洗 3 次；最后用 5%次氯酸钠溶液浸泡 15 min，无菌水冲洗 3 次。经消毒的顶芽材料放入已灭菌的培养皿中待用。7 材料扩繁 在超净工作台上，将消毒处理过的顶芽接入 MS 培养基中，在 25 条件下，光照 3000 Lx12 h、黑暗 12 h 交替培养，剔除污染苗，扩繁 30 株以上保存待用。8 病毒钝化 钝
5、化培养基配制 配制 MS+30 mg/L 病毒唑的钝化培养基，培养基 pH 为 5.8。钝化培养 取步骤 7 中保存的无菌株 30 株，分别切取 1 cm 顶端部分组织，接入钝化培养基中进行常规培养。高温、弱光辅助培养 钝化培养基中的顶端组织生根后，剔除污染苗，在 37、弱光 2000 Lx 条件下培养 7 d。大茎尖脱毒 经钝化处理后的材料，全部取其顶芽 0.5 mm 接入 MS 培养基中，分品种/品系做好编号。在 25 条件下，光照 3000 Lx12 h、黑暗 12 h 交替培养。病毒检测 待苗长出 45 个叶片时，将无污染苗每株按单节切段，扩繁 45 株，保存 2 株，其余株用于病毒检测。扩繁按照 NY/T 1212 进行。病毒检测采用酶联免疫吸附法（ELISA），无毒材料进行扩繁并保存，用于原原种生产。按照GB 18133 规程确定无毒苗。
