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GB T 5009.168-2003 食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定.pdf

1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.168-2003 食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定Determination of eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid in foods 2003-08-11发布2004-01-01实施390 中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员EGB/T切09.168-2003前言本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位=广东省食品卫生监督检验所P参加起草单位g广东药学院,广州市卫生防疫站。本标准主要起草人z罗建波、黄伟雄、邓平建、毋福海、黄

2、聪。391 GB/T 5009.168-2003 引言食品中的脂肪酸在营养学上十分重要,而富含于深海鱼泊中的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)具有调节免疫,降血脂及改善智力等功效已为国内外医学实验证实。为了对日益兴起的各种深海鱼油产品进行有效监测,保障广大消费者利益,有必要制定EPA、DHA的国家标准检验方法。392 GB/T 5009.168-2003 1 范围食品中二十碳革烯酸和二十二醋六蜡酸的测定本标准规定了食品中二十碳li烯盖章简称EPA,下同幸在二十二碳六烯酸简称DHA.下岗始测定方法。本标准适用于海鱼类食品,鱼油产品和添加EPA和DHA的食品中二十碳五烯酸和二十二碳六

3、烯酸含量的测定。本方法检出限0.1mg/险。2原理池腹经皂化处理后生成游离l肪酸,其中的长碳键不饱和指肪酸CEPA和DHM经甲黯化后挥发性提高。可以黑色谱柱有效分离,烧氢火焰离子化检测器捡溅,使用外标法定量。3试知j3.1 iE己烧g分析纯,重蒸g3.2 月间醇3优级纯g3.3 2 mol/L氮氧化镇职董事济液s称取8g氮氧化指挥辈子100mL甲董事中e3.4 2 mol/L盐酸甲蹲榕液g把浓硫酸小心滴加在约100g的氯化铺上,把产生的氯化氯气体通人事先量取必约470mL甲董事中,按质量量增加量换算,溺制成2mol/L盐酸fj31!事滚液,密用保存在冰箱内。3.5 二十碳五烯酸、二十二碳六烯激

4、标准溶液s精密称取EPA、DHA得50.0mg.加入正己烧溶解并定容至100mL,此溶液每毫升含0.50mgEPA和0.50吨DHA;4 仪镣4.1 气相色谱仪附有氮火焰离子化检测者(FID)。4.2 索氏提取器。4.3 氯化氢发生系统(启曾发生器儿4.4 刻度试管数分J度),2mL、5mL、10mL. 4.5 组织捣碎机。4.6 旋涡式震荡混合器。在7旋转蒸发仪。5 试桦制备5.1 海鱼类食品:用蒸铺水冲洗干净晾干,先切成碎块去除膏锁,然后那组织捣碎梳捣碎、混匀,称取样品50日置于250mL具寨腆量瓶中,加100mL-200 mL石泊隧沸程30C-60C).充分摇匀后,放宜过夜.1在快速泼、

5、纸过滤,减f五蒸键擦干溶剂.得到1毒草草草去称重备赂可计算捷浊率)。5.2 添加食品z称取样品10g置于60mL分液漏斗中,用60mL正己烧分三次萃取(每次振摇萃取10 min) ,合并提取液,在70C水浴上挥至近子,备用。5.3 :提炮制品z直接进行佯品能处理。393 GB/T 5009. 168-2003 8 分析吉普骤6.1 粤化6. 1. 1 鱼油和j品和海鱼类食品g取鱼油制品或经5.1处理得到的海鱼泊脂1g子50田L具黎睿萤瓶中,加入10mL正己烧轻摇使油脂溶解,并用1E己烧容至刻度。吸取此溶液1.00 mL-5. 00 mL于另一10mL具塞比色管中,再加入2mol/L氮氧化销m甲

6、醇溶液1mL.充分震荡10min后放入60C的水浴中加热1mn-2 mn,皂化完成后,冷却到?在温,待甲醋化用。6. 1. 2 添加食品z用2mL-3 mL正己烧分两次将经5.2处理而得的浓缩样液小心转至10mL具寨比包赞中,以下按6.1.1中再加入2mL 2. 0 mol/L氮氧化纳甲醇溶液.操作。6.2甲lIIi化6.2.1 标准溶液系列E准确吸取按3.5自己制的标准溶液1.0,2.0、5.0mL分别移入10mLJ电寒比色管中,撼力E入2mol/L盐酸-甲醇溶液2mL.充分震荡10mn,并于50C的水浴中加热2min,进行Ejl隙化,奔去下层液体,再加约2四L蒸馆水洗净井去除水层,用漓管吸

7、出正己统层,移至另一装有3盐水硫酸然始漏斗中跳水,将泼水嚣的溶液在70C水浴上级热浓缩,定容至1血L.待上叙事曾试用,J比标准系列中在PA或DHA的浓度依次为0.5、1.0、2.5mg/mL. 6.2.2 样品洛液z在经在1皂化处理后的样品溶液中加入2mol/L盐酸-甲醇溶液2mL.以下按6.2.1中充分震荡10min.起操作。6.3 气相色谱测定6.3.1 色谐柱玻璃柱1mX4 mm(id).填充涂有10%DEGS/ChromosorbW DMCS 80日-100目的损体自6.3.2 气体及气体流速氮气50mL/min、氢气70mL/min、空气100mL/min. 6.3.3 系统温度色谱

8、校185C、进样口210C、检测器210C 6.4 测定6.4.1 标准路线锵作2分那吸取经6.2.1Ejl雷毒化处渎后的标准溶液1.0严L.注入气粮色谱仪中.军事喜得不同浓度EPA甲黯、DHA甲黯部蜂寓,以浓度为楼坐标,稳应始峰离确应值为纵坐标,绘哥哥标准蓝蓝线。6.4.2 把经6.2步骤处理后必祥品溶泼1.0L-5.0L注入气相色谱仪中,以保留时问忽然,以2睡得的峰高响应值与标准曲线比较定量。6.5 结果计算6.队1海鱼类(以脂肪计)按式(l)计算gv XK VH-x 叫一mk X . ( 1 ) 6.5.2 鱼油制品按式(2)计算s1吨Vx-v川VH-x x-m A 盟X . ( 2 )

9、 6.5.3 添加食品按式(3)计算zX AxV, 一刽噎.( 3 ) 王运中zX一一试待中二十曾是豆瓣酸或二十二哥是六烯磁盘号含量,单位为毫克每克由g!g), A一被测定祥波中二十碳五烯盖章或二十二碳六烯酸的含量,单位为毫克每毫升(mg/mLl,V1 鱼泊和海鱼类试祥皂化前定容总体积,单位为毫升(mL), 394 GB/T 5009. 168-2003 V2 鱼油和海鱼类试样用于皂化样液体积,单位为毫升(mL),V3 样液最终定容体积,单位为毫升(mL),m一一样品的质量,单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。6.6 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。6.7 色谱图EPA和DHA的气相色谱图见图1。0.327 1 二十碳五蛐醺(EPA)二十二碳大烯醺(DHA】圈1395

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