GB T 5537-2008 粮油检验.磷脂含量的测定.pdf

1、ICS 67.200. 10 X 14 中华人民主t./、粮油检验和国国家标准GB/T 5537-2008 代替GB/T5537-1985 磷脂含量的测定Inspection of grain and oils-Determination of phosphatide content 2008-11-04发布中华人民共和国国家质量监督检验检痊总局中国国家标准化管理委员会2009-01-20实施发布中华人民共和国国家标准粮油检验磷脂含量的测定GB/T 5537-2008 骨中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准

2、出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 开本880X 1230 1/16 印张0.5字数9千字2009年1月第一版2009年1月第一次印刷骨书号:155066 1-35504定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533G/T 5537-2008 目。吕本标准的第一法参考了美国油脂化学协会AOCSOfficial Method Ca 12-55(磷)(英文版)。本标准代替GB/T5537-1985(植物油脂检验磷脂测定法。本标准与GB/T5537-1985的主要技术差异为:一一标准名称由植物油脂检验磷脂测定法改为粮油检验磷脂含量的测定);

3、一一修改了标准储备液制备中磷酸二氢御的称样量;-一修改了比色皿的规格;一一一修改了空白调零时使用的试样;一一修改了制备被测液时称样量;一一修改了结果计算的方式。本标准国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。本标准起草单位:中粮北海粮油工业(天津)有限公司。本标准主要起草人:郝克非、李学红。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:一一一GB/T5537-1985 0 I GB/T 5537-2008 粮油检验磷脂含量的测定1 范围本标准规定了植物油脂中磷脂含量测定的术语和定义、原理、仪器和用具、试剂和溶液、操作步骤、结果计算和重复性。本标准适用于植物原油、脱胶油及成品泊。本标准第一法

4、为仲裁法。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 5524动植物油脂抨样GB/T 15687 动植物油脂试样的制备3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 磷脂phosphatide 由甘油、脂肪酸、磷酸、氨基醇和环醇等构成的化合物。第一法锢蓝比色法4 原理植物油中的磷脂经灼烧成为五氧化二磷，被热盐酸变成磷酸，遇铝酸铀生成磷铝酸锅，用硫酸联氨还原

5、成铝蓝，用分光光度计在波长650nm，测定铝蓝的吸光度，与标准曲线比较，计算其含量。5 仪器和用具5. 1 分光光度计:具1cm比色皿。5.2 分析天平:分度值0.0001 g。5.3 马弗炉:可控制温度，主要使用温度在550oC ., 600 oC。5.4 封闭电炉z可调温。5.5 沸水浴。5.6 瓷蜻塌或石英增塌:50mL、100mL能承受的最低温度6000C。5.7 容量瓶:100mL、500mL、1000 mL。5.8 移液管:1mL、2mL、5mL.10 mL。5.9 比色管:50mLo 1 G/T 5537-2008 6 试剂和溶液警告:使用本标准的人员应有正规实验室工作的实际经验

6、，本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法律规定的条件。所用试剂均为分析纯，水为蒸馆水。6. 1 盐酸:1.19g/mL。6.2 氧化镑。6.3 氢氧化御。6.4 浓硫酸:1. 84 g/mLo 6.5 铝酸锅。6.6 硫酸联氨。6. 7 磷酸二氢饵:使用前在101oc下干燥2h。6.8 2.5%铝酸铀稀硫酸溶液:量取140mL浓硫酸(6.4)，注入到300mL水中。冷却至室温，加入12.5 g铝酸锅，溶解后用水定容至500mL，充分摇匀，静置24h备用。6.9 0.015%硫酸联氨溶液:将0.15g硫酸联氨(6.6)溶解在1L水中。6.10

7、 50%氢氧化饵溶液:将50g氢氧化饵(6.3)溶解在50mL水中。6. 11 1: 1盐酸溶液:将盐酸(6.1)溶解在等体积的水中。6. 12 磷酸盐标准储备液z称取干燥的磷酸二氢饵(6.7)0.4387 g，用水溶解并稀释定容至1000 mL, 此溶液含磷0.1mg/mL。6. 13 标准曲线用磷酸盐标准溶液:用移液管吸取标准储备液(6.12)10 mL至100mL容量瓶中，加水稀释并定容。此溶液含磷0.01mg/mL。7 操作步骤7. 1 奸样按GB/T5524执行。7.2 试样的制备按GB/T15687执行。7.3 绘制标准曲线取六支比色管(5.9)，编成0、1、2、4、6、8六个号码

8、。按号码顺序分别注入标准溶液(6.13)0 mL、1 mL、2mL、4mL、6mL、8mL，再按顺序分别加水10mL、9mL、8mL、6mL、4mL、2mL。接着向六支比色管中分别加入硫酸联氨溶液(6.9)8mL，铝酸纳溶液(6.8)2mLo加塞，振摇3次4次，去塞，将比色管放人沸水浴(5.5)中加热10min，取出，冷却至室温。用水稀释至刻度，充分摇匀，静置10 mino移取该溶液至干燥、洁净的比色皿中，用分光光度计在650nm处，用试剂空白调整零点，分别测定吸光度。以吸光度为纵坐标，含磷量(0.01mg、0.02mg、0.04mg、0.06mg、0.08mg)为横坐标绘制标准曲线。7.4

9、制备试液根据试样的磷脂含量，用捕塌(5.6)称取制备好的试样(7.2) ，成品油试样称量10g，原油及脱胶泊称量3.0 g3. 2 g(精确至0.001g)。加氧化钵(6.2)0.5g，先在电炉上缓慢加热至样品变稠，逐渐加热至全部炭化，将增塌送至550oC 600 oc的马弗炉中灼烧至完全灰化(白色)，时间约2h。取出增塌冷却至室温，用10mL盐酸溶液(6.11)溶解灰分并加热至微沸，5min后停止加热，待溶解液温度降至室温，将溶解液过滤注入100mL容量瓶中，每次用大约5mL热水冲洗增塌和滤纸共3次4次，待滤液冷却到室温后。用氢氧化饵溶液(6.10)中和至出现混浊，缓慢滴加盐酸溶液(6.11

10、)使氧化钵沉淀全部溶解，再加2漓。最后用水稀释定容至刻度，摇匀。制备被测液时同时制备一份样品空白。GB/T 5537-2008 7.5 比色用移液管吸取被测液(7.4)10mL，注人50mL比色管中。加入硫酸联氨溶液(6.9)8mL，铝酸锅溶液(6.8)2mL。加塞，振摇3次-4次，去塞，将比色管放人沸水浴中加热10min，取出，冷却至室温。用水稀释至刻度，充分摇匀，静置10min。移取该溶液至干燥、洁净的比色皿中，用分光光度计在650 nm下，用试样空白调整零点，测定其吸光度。8 结果计算试样中磷脂含量按式(1)计算zP. .Vl x = x :71 x 26.31 1. V2 式中zX一一

11、磷脂含量，单位为毫克每克(mg/g); P一一标准曲线查得的被测液的含磷量，单位为毫克(mg); m一一试样质量，单位为克(g);V1一一一样品灰化后稀释的体积，单位为毫升(mL);V2一一比色时所取的被测液的体积，单位为毫升(mL);26.31一一每毫克磷相当于磷脂的毫克数。. ( 1 ) 当被测液的消光值大于o.8时，需适当减少吸取被测液的体积，以保证被测液的消光值在O.8 以下。每份样品应平行测试两次，平行试样测定的结果符合精密度要求时，取其算术平均值作为结果，计算结果保留小数点后三位。9 重复性在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第二法重量法10 原

12、理植物泊中的磷脂吸水膨胀，密度增大，使其由絮状悬浮物转变为沉淀物。将试样水化后，用丙嗣反复洗涤过滤，由于磷脂不溶于丙酣，油溶于丙酶，从而可使得磷脂与油分离。称量磷脂的质量，计算其含量。该方法所得到的沉淀过滤物不完全是磷脂，还有其他不溶于丙酣的类脂物质。11 仪器和用具11. 1 玻璃漏斗、漏斗架。11. 2 分析天平:分度值0.0001 go 11. 3 电烘箱:可控制在103oc士2oC。11.4 200 mL烧杯。11. 5 抽滤瓶。11. 6 锥形瓶。11. 7 定量滤纸。12 试剂丙酣z分析纯。CON-h冈山的同筒。GB/T 5537-2008 操作步骤13. 1 按7.17.2制备试

13、样。13.2 取均匀的样品约100mL置于锥形瓶中，加热至90oc左右时进行过滤。用烧杯称取试样25g (mo) ，加热至80OC，加水2.0mL ,., 2. 5 mL，充分搅拌使之水化，在室温下静置过夜，或进行离心沉淀。倾出上层清液，用已知恒重的滤纸(m)(或抽滤)进行过滤，待滤液全部滤出后，用冷的丙酣把杯内残留的沉淀冲洗人滤纸中，继续用丙酣洗涤滤纸和沉淀，洗至无油迹为止。待滤纸和沉淀上的丙酣挥尽后，送入105oc烘箱中烘至恒重并准确称量(m2)。13 结果计算14 试样中磷脂含量按式(2)计算:. ( 2 ) 式中:Y一一磷脂含量，单位为毫克每克(mg/g); m2一一沉淀物和滤纸的质量，单位为克(g);m 滤纸质量，单位为克(g); mo 试样质量，单位为克(g)。每份样品应平行测试两次，平行试样测定的结果符合精密度要求时，取其算术平均值作为结果，计算结果保留小数点后三位。y=2-m!_ X 1 000 mo 重复性15 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。究一必记一权L一僵一M霄仍一有切一专vu一权弘一札版书一定10.00元GB/T 5537-2008