GB T 19162-2011 梭鱼.pdf

1、ICS 65. 150 B 51 中华人民2011-06-16发布GB 共和国国家标准梭鱼Redlip mullet GB/T 19162-2011 代替GB19162-2003 2011-11-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检痊总局中国国家标准化管理委员会发布数码防伪目lJ1=1 本标准代替GB19162-2003(梭鱼儿本标准与GB19162-2003相比主要变化如下:修改了梭鱼的学名和英文名;修改与补充了规范性引用文件;GB/T 19162-2011 一一修改了6.2生化遗传学特性的测定，采用肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶，代替肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶，并删除肌肉中乳

2、酸脱氢酶(LDH)同工酶酶带的活性强度指标;删除了6.2.2;增加了7.1检验规则气增加了7.2抽样方法E修改了7.6染色体检测飞直接引用GB/T18654. 12; 修改了7.7生化遗传分析，直接描述了具体的操作方法;增加了判定规则;一-删除了原标准中A.2;增加了附录B。本标准的附录B为规范性附录，附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位:天津市水产研究所。本标准主要起草人:耿绪云、李相普、刘克奉、王雪惠、马维林。I GB/T 19162-2011 梭鱼1 范围本标准规定了梭鱼Lizahaematoche

3、ila (Temminck et Schkegel)的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性以及检测方法。本标准适用于梭鱼的种质检测和鉴定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 17826 海洋生物分类代码GB/T 18654. 1 养殖鱼类种质检验第1部分z检验规则GB/T 18654. 2 养殖鱼类种质检验第2部分:抽样方法GB/T 18654.

4、3 养殖鱼类种质检验第3部分:性状测定GB/T 18654. 12 养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析3 名称与分类3. 1 学名梭鱼Lizahaematocheila (Temminck et Schkegel)，见GB/T178260 3.2 分类位置属鳝形目(Mugiliformes)、幽科(Mugilidae)、酸属(Liza)。4 主要形态构造特征4. 1 外部形态特征4. 1. 1 外形体细长呈梭形，前端略平扁，向后渐为侧扁。口下位，呈人字形。两顿齿细小，呈绒毛状。上顿骨在嘴角后突然向下弯曲，后端外露。眼小，常呈红色，脂眼险不发达。背鳝两个，分离。胸鳝基部元腋鳞。体被弱柿鳞

5、，头部为圆鳞，元侧线。姐和细长，排列密集。尾鳝凹形或浅凹形。头及体背呈青灰色，体侧淡黄色，腹部白色。梭鱼的外部形态见图1。圄1梭鱼外形1 G/T 19162-2011 4. 1. 2 可数性状4. 1.2. 1 背鳝鳝式:D.凹，1-8。4. 1. 2. 2 胸鳝鳝式:P.1617。4. 1. 2. 3 腹鳝鳝式:v. 1 -50 4.1.2.4 臀鳝鳝式:A.皿-8904. 1. 2. 5 纵列鳞数:3644 0 4. 1. 2. 6 横列鳞数:121404. 1. 2. 7 第一鲤弓外侧鲤把数:2660+5076。4.1.3 可量性状取980尾体长6.7 crn71. 0 crn，体重34

6、g5 330 g的个体实测可量性状比例值见表L表1实测可量性状比例值全长/体长|体长/体高|体长/头长l头长/吻长|头长/眼径|头长/眼间距|体长/尾柄长|尾柄长/尾柄高1. 186土0.08315.031土0.65114.211土0.24514.593士0.49515.707士0.85712.133士0.19915.430士0.40511.947士0.2024.2 内部构造特征4.2. 1嫖瞟一室，前端分叉，两侧具角棘突起。4.2.2 脊椎骨脊椎骨总数:240第二脊椎骨关节突向后伸延呈棘状。4.2.3 腹膜灰黑色。4.2.4 幽门盲囊5个7个(通常6个)。4.2.5 消化道食道短，胃呈v字形

7、，胃壁肌肉发达，肠较长。4.2.6 性腺位置体腔背面，镖F面。5 生长与繁殖5. 1 生长不同年龄组的梭鱼体长、体重的实测值见表20与表2对应的不同年龄组的鱼体长、体重平均退算值、生长方程、体长体重关系式参见附录AQ表2不同年龄组梭鱼的体长、体重实测值年龄/龄2 3 4 5 6 7 实测体长/cm17.335.2 25. 247. 5 36. 053. 5 42. 966. 5 58. 367.。61. 074.。合实测体重/g86750 2501 815 51O2 665 1 2054 045 2 2004 305 3 7454 590 实测体长/cm23. 440. 4 29. 247.

8、6 31.152.1 44. 269. 6 56. 464. 5 57. 671. 0 实测体重/g191979 4172 075 6342 705 1 4403 680 2 9954 700 2 0355 330 注:1龄梭鱼雌雄不辨，实测体长:9.6 cm25. 3 cm，实测体重:26g260 g. 5.2 繁殖5.2.1 性成熟年龄雌鱼3龄4龄，雄鱼2龄3龄。2 G/T 19162-2011 5.2.2 产卵次数性成熟个体性腺每年成熟一次，一次性产卵。5.2.3 怀卵量不同年龄组个体怀卵量见表30表3不同年龄组个体怀卵量年龄/龄体重/g绝对怀卵量/粒相对怀卵量/(粒/g)6 遗传学特性

9、6. 1 细胞遗传学特性6. 1. 1 染色体数3 1 069土169.6(5.5士1.l)X105568士194.7体细胞染色体二倍体数，2n=48。6. 1. 2 染色体组型4 5 1 491土695.02 596士677.7(7.5士1.5) X 105 (13.7士3.2)X 105 555士166.4745士148.5 6 7 3 682土905.32 945土1131. 4 (13.0土2.2)X105(7.5士1.9)X105411士153.9260土31.9 中部着丝粒染色体(m组)13对，亚中部着丝粒染色体(sm组)5对，亚端部着丝粒染色体(st组)6对。染色体臂数(NF)8

10、4(见图2)。核型公式:2n=26m十10sm+ 12 st。露集警号靠盖章桑普拉普毛毒素草委羁费事量每毒这. 善事靠在亲玲等每鹅杀擎鄂靠卖费远号费争夺. . 飞￥v 图2梭鱼染色体组型6.2 生化遗传学特性梭鱼肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶谱见图30肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶扫描图见图4。十图3肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳图谱+ 图4肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶带扫描图3 GB/T 19162-2011 7 检测方法7. 1 检验规则按GB/T18654. 1的规定执行。7.2 抽样方法按GB/T18654.2的规定执行。7.3 性状测定按GB/T18654.

11、 3的规定执行。7.4 年龄的鉴定7.4. 1 鳞片选取部位:体侧背鳝基部下方与纵列鳞上方之间。7.4.2 操作步骤za) 用慑子取下背侧鳞片，保存在鳞片袋中;b) 将保存在鳞片袋中的鳞片取出，放在培养皿中，清洗干净;c) 将清洗好的鳞片按在鱼体的位置夹在两玻片之间，贴上标签，两端用透明胶带封好;d) 在显微镜或投影仪下观察鳞片的年轮，确定鱼的年龄。7.4.3 年轮特征:疏密相间，切割或形成间隙带。7.4.4 再生鳞不得用作年龄鉴定。7.5 繁殖力的测定在繁殖季节，对产卵前性成熟亲鱼进行活体解剖，用电子天平称体重、净体重和性腺重(精确到0.01 g)，同时称1.00 g卵，两个样品，在解剖镜下

12、分别计数每克卵粒数，求其平均卵粒数。卵巢中所含的全部卵粒数即为绝对怀卵量，单位体重(g)所含的卵粒数即为相对怀卵量。7.6 染色体检测按GB/T18654. 12规定执行。7.7 生化遗传分析7.7. 1 样品采集及制备活体解剖梭鱼取肝脏，密封-20.C贮存。电泳前取0.3g组织，放入玻璃匀浆器中，用预冷水冲洗3遍，按1: 3的比例加入900L预冷水，冰浴匀浆。匀浆液4.C冰箱静置30min , 4 .C , 13 500 r/min 离心40min，取上清液。加入等体积的三瓷甲基氨基甲烧(Tris-HCD缓冲液(0.01mol/L , pH7. 0)，混匀离心，取上清液用于电泳。7.7.2

13、制胶用于垂直平板电泳的凝胶被灌注在中间有隔缝的两块玻璃板之间。玻璃板与胶条接触的边缘抹上凡士林，保证玻璃板与胶条密封，放入电泳槽后拧紧。先灌注分离胶，充分聚合后，必要时4.C冰箱过夜。次日上午灌注浓缩肢。凝胶配方见附录B。7.7.3 电泳电极缓冲液为pH8.3的三是甲基氨基甲皖-甘氨酸CTris-Gly)溶液。4.C冰箱中稳压电泳，78V预电泳30min , 150 V电泳3h. 7.7.4 染色染色在37.C恒温箱中进行，染色液现用现配，染色液配方见附录B.7.7.5 记录分析用凝胶成像系统拍照、记录、分析。8 结果判定按GB/T18654. 1的规定执行。4 GB/T 19162-2011

14、 附录A(资料性附录)不同年龄组梭鱼体长体重退算值、生长方程、体长体重关系式A.1 体长体重退算值与表2对应的不同年龄组鱼的体长、体重平均退算值见表A.L表A.1不同年龄组鱼的体长、体重平均退算值年龄/龄。+1十2+ 3+ 4+ 5+ 6+ 7+ 退算体长/cm7.8 13.9 22.5 31. 1 40.3 48. 6 59.1 63.5 台退算体重/g8.9 52.4 199.8 51 1. 5 1 033.4 1 653.7 2 784. 1 3 67 1. 1 退算体长/cm7.8 13.6 22.3 32. 1 40. 1 49.0 58. 1 63.0 退算体重/g8.9 49.5

15、 193.2 566.5 1 013.3 1 755. 1 2 978. 9 3 498.4 A.2 体长体重关系式W =0. 027 09 X L2.887 6 ( A.l ) 式中zW 体重，单位为克(g);0.027 09 系数;L一一体长，单位为厘米(cm)。5 GB/T 19162-2011 附录B(规范性附录)乳酸脱氢酶LDH分析用溶波配制、凝股配方和染色液配方B. 1 溶渣配制B. 1. 1 单体工作液丙烯酷股29.1g , N ，N-甲叉双丙烯酷肢0.9g，用水溶解，定容至100mL，棕色瓶4oC贮存。B. 1.2 分离肢缓冲液9.08 g三是甲基氨基甲皖(Tris)用40mL

16、水溶解，用盐酸(HCl)调pH至8.9，用水定容至50mL , 4 oC保存备用。B. 1.3 浓缩胶缓冲液3.03 g Tris用40mL水溶解，用HCl调pH至6.8，用水定容至50mL, 4 oC保存备用。B. 1. 4 10%过硫酸镇0.1 g过硫酸镀用1mL水溶解，40C保存备用。B. 1.5 10%四甲基乙二肢100L四甲基乙二股加水900L，40C保存备用。B. 1.6 上样缓冲撞2 mL浓缩肢缓冲液加入1mL 87%甘油、0.1mg澳酣兰定容至10mL，分装后4oC保存。B. 1.7 电极缓冲班称取3.03g Tris和14.41g甘氨酸(Gly)，加800mL H20溶解，用

17、HCl调pH至8.3，定容至1 L , 4 oC保存。B. 1.8 0.1 mol/L氯化铀5.85 g氧化铀(NaCl)，用水溶解并定容至1000 mL, 4 oC保存备用。B. 1.9 1 mol/L乳酸铀11. 206 g乳酸铀用水溶解并定容至100mL, 4 oC保存备用。B.2 凝胶配方见表B.l.项目单体工作液胶缓冲液水10%过硫酸镀10%四甲基乙二胶B.3 染色液配方见表B.20 6 表B.1 凝胶配方分离胶(T=7.5%)3.7 mL 300L 11 mL 75L 75L 浓缩胶(T=4%)650L 100L 4.25 mL 37.5L 37.5L GB/T 19162-201

18、1 表B.2染色液配方试剂浓度用量辅酶1(NAD) 25 mg 氯化硝基四氮嗖盐(NBT)15 mg 吩嚓甲酶硫酸盐(PMS)5.25 mg 氯化销(NaCI)0.1 mol/L 2.6 mL 乳酸纳1 mol/L 5 mL 水(H20)50 mL FFON-SFEH阁。国和华人民共国家标准梭鱼GB/T 19162-2011 白* 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张0.75字数15千字2011年8月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2011年8月第一版* 书号:155066. 1-43314 16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价GB/T 19162-2011 打印日期:2011年9月13日F002A