GB T 24401-2009 α-淀粉酶制剂.pdf

1、H土号w 11在易功我卦掌回国中军臼33翠尊敬辑蜀l:W喜坦率国国时￥y茄中销活LO-EO-OL OZ 阜OE-60-600l uon.nda.ld aS1正m-qdIVh圣陶醒锦蓝白n600l-LOvvl .L/g 罩之四塞回国时￥坦Y茹中09 X OE .00 L . LO S:JI GB/T 24401-2009 前言本标准以QB/T1805. 1-1993(工业用-淀粉酶制剂和QB/T2306-1997(耐高温-淀粉酶制剂为基础，首次制定。本标准的附录A为规范性附录，附录B、附录C为资料性附录。本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。本标准由全国食品工业标准化技术委员会工业发酵分技术

2、委员会归口。本标准起草单位z中国食品发酵工业研究院、元锡赛德生物工程有限公司、山东隆大生物工程有限公司、诺维信(中国)生物技术有限公司、江阴市百圣龙生物工程有限公司、邢台新欣翔宇生物工程有限责任公司。本标准主要起草人:张蔚、吴炳炎、郭庆文、张晶雪、顾建龙、余波、郭新光、胡洪清、杨西江、曹振宇、陆志冲、魏坤。I GB/T 24401-2009 -淀粉酶制剂1 范围本标准规定了-淀粉酶制剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存要求。本标准适用于以淀粉质(或糖质为原料，经发酵、提纯制得的-淀粉酶制剂产品的生产、检验和销售。主要用于食品工业、纺织工业等。其他来源的-淀

3、粉酶制剂可参照相关类别使用，用作饲料添加剂的-淀粉酶制剂可参照A类产品执行。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 191 包装储运图示标志GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB 8275 食品添加剂-淀粉酶制剂QB/T 1803-1993 工业酶制剂通用试验方法3 术语和定义下列术语和定义适用于本

4、标准。3. 1 -淀粉酶alpha-amylase 能水解淀粉分子链中的-1，4-葡萄糖昔键，将淀粉链切断成为短链糊精和少量麦芽糖和葡萄糖，使淀粉粘度迅速下降的酶。3.2 中温-淀粉酶活力activity of medium temperature alpha-amylase 1 g固体酶粉(或1mL液体酶)，于60c、pH值6.0条件下，1h液化1g可溶性淀粉，即为1个酶活力单位，以u/g( u/mL)表示。3.3 耐高温-淀粉酶活力activity of heat-tolerant alpha-amylase 1 g固体酶粉(或1mL液体酶)，于70oc、pH值6.0条件下，1min液化1

5、mg可溶性淀粉，即为1个酶活力单位，以u/g( u/mL)表示。4 产品分类4. 1 按产品的应用领域A类:食品/饲料工业用酶。B类z其他工业用酶。4.2 按产品的适用温度中温-淀粉酶制剂和耐高温-淀粉酶制剂。1 GB/T 24401-2009 4.3 按产品形态液体剂型酶制剂和固体剂型酶制剂。5 要求5. 1 外观固体剂型z白色至黄褐色固体粉末。元霉变、潮解、结块现象，元异味。易溶于水。液体剂型z黄褐色至深褐色液体，无异味，允许有少量凝聚物。5.2 理化要求应符合表1的规定。表1-淀粉酶制剂的理化要求液体剂型固体剂型项中温耐高温中温耐高温目-淀粉酶制剂-淀粉酶制剂-淀粉酶制剂-淀粉酶制剂A类

6、|B类B类A类|B类A类|酶活力a/u/mL(或u/g)J二;:.2000 20 000 2 000 20000 pH值(25OC) 5. 57. 0 5. 86. 8 容重/(g/mL)1. 101. 25 1. 101. 25 干燥失重/%主三8.0 耐热性存活率/%，飞90 90 注:B类产品不得用于食品工业和饲料工业(蒸馆酒类除外。a具体规格可按供需双方合同规定的酶活力规格执行。5.3 卫生要求B类产品不做卫生要求，A类产品按GB8275中卫生要求执行。6 试验方法本标准中所用的水，在未注明其他要求时，均指符合GB/T6682中要求的水。本标准中所用的试剂，在未注明规格时，均指分析纯(

7、AR)。若有特殊要求另作明确规定。本标准中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。6. 1 外观称取样品10g(或10mL)，观察、嗅闻作出判断，做好记录。6.2 酶活力6.2.1 原理B类-淀粉酶制剂能将淀粉分子链中的-1，4葡萄糖背键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖，而使淀粉对腆呈蓝紫色的特性反应逐渐消失，呈现棕红色，其颜色消失的速度与酶活性有关，据此可通过反应后的吸光度计算酶活力。6.2.2 试剂和溶液6.2.2.1殃。6.2.2.2 腆化御。6.2.2.3 原殃液z称取11.0 g腆和22.0g腆化饵，用少量水使腆完全溶解，定容至500mL，贮存于棕色瓶中。2 G

8、B/T 24401-2009 6.2.2.4 稀腆液z吸取原映液2.00mL，加20.0g映化御用水溶解并定容至500mL，贮存于棕色瓶中。6.2.2.5 可溶性淀粉溶液(20g/L):称取2.000g(精确至0.001g)可溶性淀粉(以绝干计)于烧杯中，用少量水调成浆状物，边搅拌边缓缓加人70mL沸水中，然后用水分次冲洗装淀粉的烧杯，洗液倒入其中，搅拌加热至完全透明，冷却定容至100mL。溶液现配现用。注z可溶性淀粉采用酶制剂专用可溶性淀粉。6.2.2.6 磷酸缓冲液(pH=6.0):称取45.23g磷酸氢二纳(Na2HP04 12H20)和8.07g拧攘酸(C6 H807 H20)，用水溶

9、解并定容至1000 mLo用pH计校正后使用。6.2.2.7 盐酸溶液c(HCl) =0.1 mol/LJ:按GB/T601配制。6.2.3 仪器和设备除实验室常规仪器外还有以下仪器和设备。6.2.3.1 分光光度计。6.2.3.2 恒温水浴z精度士0.1oc。6.2.3.3 自动移液器。6.2.3.4 试管:25mmX 200 mmo 6.2.3.5 秒表。6.2.4 分析步骤6.2.4.1 待测酶液的制备称取1g-2 g酶粉(精确至0.0001 g)或准确吸取酶液1.00 mL，用少量磷酸缓冲液(6.2.2.6)充分溶解，将上清液小心倾入容量瓶中，若有剩余残渣，再加少量磷酸缓冲液(6.2.

10、2.6)充分研磨，最终样品全部移入容量瓶中，用磷酸缓冲液(6.2.2.6)定容至刻度，摇匀。用四层纱布过滤，滤液待用。注z待测中温-淀粉酶酶液酶活力浓度控制在3.4u/mL.4. 5 u/mL范围内，待测耐高温-淀粉酶活力浓度控制在60u/mL.65 u/mL范围内。6.2.4.2 测定吸取20.0mL可溶性淀粉溶液(6.2.2.5)于试管(6.2.3.4)中，加入磷酸缓冲液(6.2.2.6)5.00 mL，摇匀后，置于60oc士o.2 oC (耐高温-淀粉酶制剂置于70oc士o.2 OC)恒温水浴中预热8 mino 加入1.00 mL稀释好的待测酶液(6.2. 4. 1) ，立即计时，摇匀，

11、准确反应5min。立即用自动移液器吸取1.00 mL反应液，加到预先盛有0.5mL盐酸溶液(6.2.2. 7)和5.00mL稀腆液(6.2.2. 4)的试管中，摇匀，并以0.5mL盐酸溶液和5.00mL稀腆液为空白，于660nm波长下，用10 mm比色皿迅速测定其吸光度(A)。根据吸光度查附录A，求得测试酶液的浓度。6.2.4.3 计算中温-淀粉酶制剂的酶活力按式(1)计算:式中zX1一一样品的酶活力，u/mL(或u/g);C一一测试酶样的浓度，u/mL(或u/g);n一一样品的稀释倍数。所得结果表示至整数。X1 = cX 耐高温-淀粉酶制剂的酶活力按式(2)计算:X2 = cXX 16.67

12、 式中zX2一一样品的酶活力，u/mL(或u/g);. ( 1 ) . ( 2 ) 3 GB/T 24401-2009 C一一测试酶样的浓度，u/mL(或u/g);n 样品的稀释倍数;16.67一一根据酶活力定义计算的换算系数。所得结果表示至整数。6.2.5 允许差平行试验相对误差不得超过5%。6.3 pH值按QB/T1803-1993中第9章执行。6.4 耐高温-淀粉酶制剂耐热性存活率6.4.1 试剂和溶液6.4. 1. 1 氢氧化纳溶液c(NaOH)=0. 1 mol/LJ:按GB/T601配制。6.4. 1. 2 糊精溶液:称取糊精100.0g于烧杯中，加水300mL，搅匀，加入耐高温-

13、淀粉酶制剂(按每克糊精13u酶活力加入)，置于电炉上加热至沸腾，冷却，用氢氧化铀溶液(6.4.1.1)调pH值至6.0-7.0，移人500mL容量瓶，稀释，定容，摇匀备用。6.4.2 仪器和设备恒温水浴z精度士0.1oc。6.4.3 分析步骤6.4.3.1 待测酶液的制备除用糊精溶液(6.4.1.2)代替磷酸缓冲溶液(6.2.2.6)外，其余同6.2. 4. 10 6.4.3.2 热处理吸取25mL待测酶液于50mL比色管中，置于95oc恒温水浴中热处理60min，冷却，补水至原酶液体积，摇匀，备用。6.4.3.3 酶活力测定按6.2.4.2测定制备6.4. 3. 1时所用酶制剂的酶活力;按6

14、.2. 4. 2测定热处理后的待测酶液(6.4.3.2)的酶活力。6.4.4 计算耐热性存活率按式(3)计算zX3 = El/E X 100 式中zX3一一样品酶耐热性存活率，%;El一一-样品热处理后实测的酶活力，u/mL(或u/g);E一一样品热处理前实测的酶活力，u/mL(或u/g)。所得结果表示至整数。6.5 容重按QB/T1803-1993执行。6.6 干燥失重按QB/T1803-1993执行。7 检验规则7. 1 批次的确定由生产单位按照其相应的规则负责确定产品的批号，批内产品的品质应均一。7.2 取样规则和样本量取样应均匀分布在整个灌装过程中，或均匀分布于灌装后的成品中。( 3

15、) 取样时应采用适宜的方法保证取样具有代表性，保证取样部位和取样瓶的清洁。对用于微生物检4 GB/T 24401-2009 验的取样，应使用无菌操作。成品抽样的样本量见表2。取样的样本量可按照估计的批量参照表2执行，或由生产企业和(或)相关方确定。表2成晶抽样的样本量批量/桶(或箱样本量/瓶(或袋50 2 51500 3 500 4 注1:批取样量不得少于300mL(或300g)，不足者应按比例适当加取。注2:批量是指批中所包含的单位商品数，单位为桶(或箱)。样本量是指样本中所包含的单位样本数，单位为瓶(或袋)。7.3 出厂检验每批产品出厂时，应对外观、酶活力、pH值、容重、干燥失重团体)，A

16、类产品的菌落总数等逐项进行检验。7.4 型式检验产品在正常生产情况下，每年至少进行一次型式检验，遇有下列情况之一时按本标准全部要求进行检验:一一正常生产时，至少每年对产品检验一次;一一正常生产时，如原料、配方或工艺有较大改变，可能影响产品质量时;一一更换设备，或产品长期停产又恢复生产时;一一出厂检验结果与平常记录有较大差别时;国家质量监督部门提出要求时。7.5 判定规则出厂检验和(或)型式检验合格时，由质量检验部门出具产品合格证。出厂检验和(或)型式检验不合格时，在原批次基础上加倍取样分析。如仍不合格，判定该产品为不合格品，不得出厂。8 标志、包装、运输及贮存8. 1 标志产品的外包装宜使用符

17、合GB/T191要求的标志。产品的包装上应贴有牢固的标签。标识内容应包括品名、产地、厂名、卫生许可证号、规格、生产日期、批号或代号、保质期等。A类产品的标签的内容应符合相关规定。8.2 包装产品的内包装和(或)包装容器的内涂料应采用国家批准的材料，A类产品应符合相应的食品包装用或食品容器卫生标准的材料。8.3 运输产品在运输过程中应轻拿轻放，严防雨淋和曝晒。运输工具应清洁、元毒、元污染。严禁与有毒、有害、有腐蚀性的物质混装混运。8.4 贮存产品应贮存在阴凉干燥的环境下。严禁与有毒、有害、有腐蚀性的物质同存。8.5 保质期8.5.1 在250C以下，液体酶制剂保质期不少于90d;固体酶制剂保质期

18、不少于180d，企业应按上述要求具体标示。8.5.2 在保质期内，实测酶活力不应低于标示酶活力。5 GB/T 24401-2009 附录A(规范性附录眼光度与测试-淀粉酶酶浓度对照表表A.1吸光度与测试-淀粉酶酶浓度对照表吸光度(A)酶浓度(c)/( u/mL) 吸光度(A)酶浓度(c)/( u/mL) 吸光度(A)酶浓度(c)/ (u/mL) o. 100 4.694 0.131 4.539 0.162 4.385 0.101 4.689 0.132 4.534 0.163 4.380 O. 102 4.684 O. 133 4.529 0.164 4.375 O. 103 4.679 O.

19、 134 4.524 0.165 4.370 O. 104 4.674 O. 135 4.518 0.166 4.366 O. 105 4.669 O. 136 4.513 0.167 4.361 O. 106 4.664 O. 137 4.507 0.168 4.356 O. 107 4.659 O. 138 4.502 0.169 4.352 O. 108 4.654 O. 139 4.497 0.170 4.347 O. 109 4.649 O. 140 4.492 0.171 4.342 0.110 4.644 O. 141 4.487 0.172 4.338 0.111 4.639

20、O. 142 4.482 0.173 4.333 0.112 4.634 0.143 4.477 0.174 4.329 0.113 4.629 0.144 4.472 0.175 4.324 0.114 4.624 0.145 4.467 0.176 4.319 0.115 4.619 0.146 4.462 0.177 4.315 0.116 4.614 0.147 4.457 0.178 4.310 0.117 4.609 O. 148 4.452 0.179 4.306 0.118 4.604 0.149 4.447 0.180 4.301 0.119 4.599 0.150 4.44

21、2 0.181 4.297 O. 120 4.594 0.151 4.438 0.182 4.292 O. 121 4.589 0.152 4.433 0.183 4.288 O. 122 4.584 0.153 4.428 0.184 4.283 O. 123 4.579 0.154 4.423 0.185 4.279 O. 124 4.574 0.155 4.418 0.186 4.275 O. 125 4.569 0.156 4.413 0.187 4.270 O. 126 4.564 0.157 4.408 0.188 4.266 O. 127 4.559 O. 158 4.404 0

22、.189 4.261 O. 128 4.554 O. 159 4.399 0.190 4.257 O. 129 4.549 O. 160 4.394 0.191 4.253 O. 130 4.544 0.161 4.389 0.192 4.248 6 GB/T 24401-2009 表A.1(续)吸光度(A)酶浓度(c)!(u!mL)吸光度(A)酶浓度(c)!(u!mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u!mL)0.193 4.244 0.228 4.101 0.263 3.974 0.194 4.240 0.229 4.097 0.264 3.971 0.195 4.235 0.230 4.09

23、3 0.265 3.968 0.196 4.231 0.231 4.089 0.266 3.964 0.197 4.227 0.232 4.085 0.267 3.961 O. 198 4.222 0.233 4.082 0.268 3.958 0.199 4.218 0.234 4.078 0.269 3.954 0.200 4.214 0.235 4.074 0.270 3.951 0.201 4.210 0.236 4.070 0.271 3.948 0.202 4.205 0.237 4.067 0.272 3.944 0.203 4.201 0.238 4.063 0.273 3.9

24、41 0.204 4.197 0.239 4.059 0.274 3.938 0.205 4.193 0.240 4.056 0.275 3.935 0.206 4.189 0.241 4.052 0.276 3.932 0.207 4. 185 0.242 4.048 0.277 3.928 0.208 4. 181 0.243 4.045 0.278 3.925 0.209 4.176 0.244 4.041 0.279 3.922 0.210 4.172 0.245 4.037 0.280 3.919 0.211 4. 168 0.246 4.034 0.281 3.916 0.212

25、4.164 0.247 4.03 0.282 3.913 0.213 4. 160 0.248 4.026 0.283 3.922 0.214 4. 156 0.249 4.023 0.284 3.919 0.215 4. 152 0.250 4.019 0.285 3.915 0.216 4.148 0.251 4.016 0.286 3.912 0.217 4. 144 0.252 4.012 0.287 3.909 0.218 4.140 0.253 4.009 0.288 3.906 0.219 4.136 0.254 4.005 0.289 3.903 0.220 4.132 0.2

26、55 4.002 0.290 3.900 0.221 4.128 0.256 3.998 0.291 3.897 0.222 4. 124 0.257 3.995 0.292 3.894 0.223 4.120 0.258 3.991 0.293 3.891 0.224 4.116 0.259 3.988 0.294 3.888 0.225 4.112 0.260 3.984 0.295 3.885 0.226 4.108 0.261 3.981 0.296 3.881 0.227 4.105 0.262 3.978 0.297 3.878 7 GB/T 24401-2009 表A.1(续)吸

27、光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL) 吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)0.298 3.875 0.333 3. 771 0.368 3.670 0.299 3.872 0.334 3. 768 0.369 3.668 0.300 3.869 0.335 3. 765 0.370 3.665 0.301 3.866 0.336 3. 762 0.371 3.662 0.302 3.863 0.337 3.759 0.372 3.659 0.303 3.860 0.338 3.756 0.373 3.656 0.304 3.857 0.339 3. 75

28、3 0.374 3.654 0.305 3.854 0.340 3. 750 0.375 3.651 0.306 3.851 0.341 3.747 0.376 3.648 0.307 3.848 0.342 3.744 0.377 3.645 0.308 3.845 0.343 3.741 0.378 3.643 0.309 3.842 0.344 3. 739 0.379 3.640 0.310 3.839 0.345 3. 736 0.380 3.637 0.311 3.836 0.346 3. 733 0.381 3.634 0.312 3.833 0.347 3.730 0.382

29、3.632 0.313 3.830 0.348 3. 727 0.383 3.629 0.314 3.827 0.349 3. 724 0.384 3.626 0.315 3.824 0.350 3.721 0.385 3.623 0.316 3.821 0.351 3. 718 0.386 3.621 0.317 3.818 0.352 3. 716 0.387 3.618 0.318 3.815 0.353 3. 713 0.388 3.615 0.319 3.812 0.354 3.710 0.389 3.612 0.320 3.809 0.355 3. 707 0.390 3.610

30、0.321 3.806 0.356 3. 704 0.391 3.607 0.322 3.803 0.357 3.701 0.392 3.604 0.323 3.800 0.358 3.699 0.393 3.602 0.324 3. 797 0.359 3.696 0.394 3.599 0.325 3. 794 0.360 3.693 0.395 3.596 0.326 3. 791 0.361 3.690 0.396 3.594 0.327 3. 788 0.362 3.687 0.397 3.591 0.328 3. 785 0.363 3.684 0.398 3.588 0.329

31、3. 782 0.364 3.682 0.399 3.585 0.330 3.779 0.365 3.679 0.400 3.583 0.331 3.776 0.366 3.676 0.401 3.580 0.332 3. 774 0.367 3.673 0.402 3.577 8 G/T 24401-2009 表A.1(续)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL) 吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)0.403 3.575 0.438 3.482 0.473 3.397 0.404 3.572 0.439 3.479 0.474 3.394 0.405

32、3.569 0.440 3.477 0.475 3.392 0.406 3.567 0.441 3.474 0.476 3.389 0.407 3.564 0.442 3.472 0.477 3.387 0.408 3.559 0.443 3.469 0.478 3.385 0.409 3.556 0.444 3.467 0.479 3.383 0.410 3.554 0.445 3.464 0.480 3.380 0.411 3.551 0.446 3.462 0.481 3.378 0.412 3.548 0.447 3.459 0.482 3.376 0.413 3.546 0.448

33、3.457 0.483 3.373 0.414 3.543 0.449 3.454 0.484 3.371 0.415 3.541 0.450 3.452 0.485 3.369 0.416 3.538 0.451 3.449 0.486 3.366 0.417 3.535 0.452 3.447 0.487 3.364 0.418 3.533 0.453 3.444 0.488 3.362 0.419 3.530 0.454 3.442 0.489 3.359 0.420 3.528 0.455 3.440 0.490 3.357 0.421 3.525 0.456 3.437 0.491

34、3.355 0.422 3.522 0.457 3.435 0.492 3.353 0.423 3.520 0.458 3.432 0.493 3.350 0.424 3.517 0.459 3.430 0.494 3.348 0.425 3.515 0.460 3.427 0.495 3.346 0.426 3.512 0.461 3.425 0.496 3.344 0.427 3.509 0.462 3.423 0.497 3.341 0.428 3.507 0.463 3.420 0.498 3.339 0.429 3.504 0.464 3.418 0.499 3.337 0.430

35、3.502 0.465 3.415 0.500 3.335 0.431 3.499 0.466 3.413 0.501 3.333 0.432 3.497 0.467 3.411 0.502 3.330 0.433 3.494 0.468 3.408 0.503 3.328 0.434 3.492 0.469 3.406 0.504 3.326 0.435 3.489 0.470 3.404 0.505 3.324 0.436 3.487 0.471 3.401 0.506 3.321 0.437 3.484 0.472 3.399 0.507 3.319 9 GB/T 24401-2009

36、表A.1(续)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL) 吸光度(A)酶浓度(c)/ (u/mL) 0.508 3.317 0.543 3.243 0.578 3.175 0.509 3.315 0.544 3.241 0.579 3.173 0.510 3.313 0.545 3.239 0.580 3.171 0.511 3.311 0.546 3.237 0.581 3.169 0.512 3.308 0.547 3.235 0.582 3. 168 0.513 3.306 0.548 3.233 0.583 3. 166 0.514 3.304 0.5

37、49 3.231 0.584 3.164 0.515 3.302 0.550 3.229 0.585 3. 162 0.516 3.300 0.551 3.227 0.586 3. 160 0.517 3.298 0.552 3.225 0.587 3. 158 0.518 3.295 0.553 3.223 0.588 3. 157 0.519 3.293 0.554 3.221 0.589 3.155 0.520 3.291 0.555 3.219 0.590 3.153 0.521 3.289 0.556 3.217 0.591 3.151 0.522 3.287 0.557 3.215

38、 0.592 3. 149 0.523 3.285 0.558 3.213 0.593 3.147 0.524 3.283 0.559 3.211 0.594 3.146 0.525 3.280 0.560 3.209 0.595 3.144 0.526 3.278 0.561 3.207 0.596 3. 142 0.527 3.276 0.562 3.205 0.597 3. 140 0.528 3.274 0.563 3.204 0.598 3.139 0.529 3.272 0.564 3.202 0.599 3.137 0.530 3.270 0.565 3.200 0.600 3.

39、135 0.531 3.268 0.566 3.198 0.601 3.133 0.532 3.266 0.567 3.196 0.602 3.131 0.533 3.264 0.568 3.194 0.603 3. 130 0.534 3.262 0.569 3.192 0.604 3. 128 0.535 3.260 0.570 3.190 0.605 3.126 0.536 3.258 0.571 3. 188 0.606 3.124 0.537 3.255 0.572 3.186 0.607 3. 123 0.538 3.253 0.573 3.184 0.608 3.121 0.53

40、9 3.251 0.574 3.183 0.609 3.119 0.540 3.249 0.575 3.181 0.610 3.118 0.541 3.247 0.576 3.179 0.611 3.116 0.542 3.245 0.577 3.177 0.612 3.114 10 GB/T 24401-2009 表A.1(续)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)0.613 3.112 0.648 3.055 0.683 3.004 0.614 3.111 0.649 3.054 0.684 3.003 0.615

41、 3. 109 0.650 3.052 0.685 3.001 0.616 3. 107 0.651 3.051 0.686 3 0.617 3. 106 0.652 3.049 0.687 2.998 0.618 3. 104 0.653 3.048 0.688 2.997 0.619 3. 102 0.654 3.046 0.689 2.996 0.620 3.101 0.655 3.045 0.690 2.994 0.621 3.099 0.656 3.043 0.691 2.993 0.622 3.097 0.657 3.042 0.692 2.992 0.623 3.096 O. 6

42、58 3.04 0.693 2.99 0.624 3.095 0.659 3.039 0.694 2.989 0.625 3.094 0.660 3.037 0.695 2.988 0.626 3.092 0.661 3.036 0.696 2.986 0.627 3.089 0.662 3.034 0.697 2.985 0.628 3.087 0.663 3.033 0.698 2.984 0.629 3.086 0.664 3.031 0.699 2.982 0.630 3.084 0.665 3.03 O. 700 2.981 0.631 3.082 0.666 3.028 O. 70

43、1 2.98 0.632 3.081 0.667 3.027 O. 702 2.978 0.633 3.079 0.668 3.025 O. 703 2.977 0.634 3.078 0.669 3.024 O. 704 2.976 0.635 3.076 0.670 3.022 O. 705 2.975 0.636 3.074 0.671 3.021 O. 706 2.973 0.637 3.073 0.672 3.02 O. 707 2.972 0.638 3.071 0.673 3.018 O. 708 2.971 0.639 3.070 0.674 3.017 O. 709 2.96

44、9 0.640 3.068 0.675 3.015 0.710 2.968 0.641 3.066 0.676 3.014 0.711 2.967 0.642 3.065 0.677 3.012 O. 712 2.966 0.643 3.063 0.678 3.011 0.713 2.964 0.644 3.062 0.679 3.01 0.714 2.963 0.645 3.060 0.680 3.008 O. 715 2.962 0.646 3.058 0.681 3.007 0.716 2.961 0.647 3.057 0.682 3.005 0.717 2.959 11 GB/T 2

45、4401-2009 表A.1(续)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/(u/mL)吸光度(A)酶浓度(c)/ (u/mL) o. 718 2.958 O. 735 2.938 o. 752 2.919 O. 719 2.957 O. 736 2.937 O. 753 2.918 O. 720 2.956 O. 737 2.936 o. 754 2.917 o. 721 2.955 O. 738 2.935 O. 755 2.916 0.722 2.953 O. 739 2.933 O. 756 2.915 O. 723 2.952 O. 740 2.932 O. 7

46、57 2.914 O. 724 2.951 O. 741 2.931 0.758 2.913 O. 725 2.95 O. 742 2.93 0.759 2.912 0.726 2.949 O. 743 2.929 0.760 2.911 O. 727 2.947 O. 744 2.928 O. 761 2.91 0.728 2.946 O. 745 2.927 O. 762 2.909 O. 729 2.945 O. 746 2.926 0.763 2.908 O. 730 2.944 O. 747 2.925 0.764 2.907 O. 731 2.943 O. 748 2.923 0.

47、765 2.906 O. 732 2.941 O. 749 2.922 O. 766 2.905 O. 733 2.94 0.750 2.921 O. 734 2.939 O. 751 2.92 12 GB/T 24401-2009 附录B(资料性附录)中温-淀粉酶活力的测定目视比色法B. 1 原理-淀粉酶制剂能将淀粉分子链中的-1，4葡萄糖背键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖，而使淀粉对映呈蓝紫色的特性反应逐渐消失，呈现棕红色，其颜色消失的速度与酶活性有关，据此计算酶活力。B.2 试剂本附录中所用的水，在未注明其他要求时，均指符合GB/T6682中要求的水。本附录中所用的试剂

48、，在未注明规格时，均指分析纯(AR)。若有特殊要求另作明确规定。本附录中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。B.2.1 原破液称取结晶腆11.0 g、腆化饵22.0g，先用少量蒸馆水使腆完全溶解后，再加蒸馆水定容至500mL, 贮于棕色瓶内。本溶液在冷藏(4oC ,-., 8 OC)条件下的保存期为2个月。B.2.2 稀破液取原腆液2.00mL，加腆化饵20.0g，加蒸馆水溶解定容至500mL，贮于棕色瓶内。B.2.3 2%可溶性淀粉称取2.00g可溶性淀粉(以绝干计)，用少量水调成浆状物，边搅拌边缓缓加入70mL沸水中，然后用水分次冲洗装淀粉的烧杯，洗液倒入其中，搅拌加热至完全透明

49、，冷却定容至100mL。此溶液当天配制当天使用。B.2.4 磷酸氢二铀拧橡酸缓冲溶液(pH=6.0)称取磷酸氢二锅(Na2HP04 12H2 0)45. 23 g和拧橡酸(CSHg07 H20)8. 07 g，用蒸馆水溶解定容至1000 mL，配好后应以酸度计校正pH值为6.00B.3 待测酶液的制备称取酶粉1g,-.,2 g(精确至0.1mg)或量取酶液1.00 mL，先用少量400C磷酸氢二纳-拧棱酸缓冲溶液(B.2.4)溶解，并用玻璃棒捣碎，将上层清液小心倾入适当的容量瓶中，沉渣部分再加入少量上述缓冲溶液，如此反复研捣3次-4次，最后全部移入容量瓶中，用缓冲溶液定容至刻度，摇匀，通过四层纱布过滤，再用滤纸滤清，滤液供测定用。B.4 分析步骤于白瓷板空穴内滴入1.5 mL稀腆液(B.2. 2)。取2%可溶性淀粉20mL(B. 2. 3)和磷酸氢二纳-拧橡酸缓冲溶液(B.2. 4)5 mL于25mmX200 mm试管中，于