GB T 5413.5-1997 婴幼儿配方食品和乳粉 乳糖、蔗糖和总糖的测定.pdf

1、, GB/T 5413.5-1997 前去一口食品中糖的测定，通常采用的是氧化还原滴定法，但在同时有其他还原糖存在的情况下，会对测定产生干扰。本标准给出了三种测定方法，其中方法之高压液相色谱法和方法二酶比色法，避免了还原糖的干扰，而且，具有较高的准确度。方法一可以同时测定各种糖。方法三采用GB/T16286-1996方法.考虑到传统的氧化还原滴定法在没有其他还原糖干扰的情况下，测定乳糖和煎糖的准确度较高，而且所需仪器设备简单，多数实验室习惯于采用这种方法，因此，仍将莱因-埃农氏法(Laneand Eynor s Method)作为方法二给出.本标准方法一为仲裁法.本系列标准从实施之日起，代替G

2、B5413-85。本标准由中国轻工总会提出。本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位z国家乳制品质量监督检验中心。本标准参加起草单位E卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司.本标准主要起草人g王芸、杨金宝、李玉贤、王心祥。a 240 中华人民共和家标准婴幼儿配方食品和乳粉乳糖、蘑糖和总糖的测定GB/T 5413. 5-1997 Milk powder and formula foods for infant and young children -Determination of lactose ,sucrose and t

3、otal sugars contents 1 范围代替GB5413-85 本标准规定了用离压液相色谱法、莱因-埃农氏法和酶-比色法测定糖的方法。本标准方法一适用于婴幼儿配方食品和乳粉中各种糖的测定，方法二适用于全脂乳粉、全脂加糖乳粉、脱脂乳粉和其他总糖中只含有乳糖、f.糖的乳粉制品中乳糖、煎糖和总糖的测定，方法三适用于婴幼儿配方食品和乳粉中煎糖的测定。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/T 16286-1996食品中熊糖的测定方法梅-比色法方法一高

4、压液相色谱法3 方法提要婴幼儿食品中如含有多种糖，可利用高压液相色谱法的伊碳水化合物柱或氨基柱(Lichrosorb-NH，柱).将它们分离，用示差折光检测棒，检出各糖液的折光指数，此拆光指数与其浓度成正比。4 试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。4. 1 澄清剂s硫酸铜，质量分数7%。氮氧化锁，质量分数4%。4.2 乙腾。4.3 标准溶液4. 3. 1 标准糖贮备液.IOmg/mL.精确称取被测糖的标样地，将于水中，用水稀释至IOOmL容量瓶内，定容。4. 3. 2 标准糖工作液.4mg/mL.吸取4mL贮备液，置IOmL容量瓶中，用乙腊稀释至

5、刻度。5 仪器常用实验室仪器及$5. 1 高压液相色谱仪，带碳水化合物分析校或氨基柱。国家技术监督局1997-05-28批准1998-09-01实施241 GB/T 5413.5-1997 6 操作步骤6. 1 样液制备精确称取2g左右样品，加30mL水溶解，移至100mL容量瓶中，加澄清lfiJ硫酸铜(4.1)10mL.氢氧化销(4.1)4mL.振摇，加水至刻度，静置半小时，过滤。取4mL样品母液置10mL容量瓶用乙脯定容，通过0.45m过滤器过滤，滤液备用。6.2 高压液相色谱仪工作条件sR401示差折光检测器z30cmX4.6mm内径一一碳水化合物分析柱(夹套保温20C)流动相z乙腾/水

6、=85/15流动相流速:0.5mL/min 6.3进样在仪器稳定后，用注射器或进样阀注射50L标准样液共4次，记下保留时间，测定峰高，放弃第一次数据，取后三者平均峰高值，同样进样50L四次得出平均峰高。7 分析结果的寝述CXJJ 25C X H 样品中糖含量(g/loos)zX100=一一一一一. ( 1 ) H X m H X一一，X :. X 1 000 100 10 式中:C 标准糖溶液浓度.mg/mL，H-样品中糖的平均峰高gH一-标准糖溶液的峰高;闸一样品的质量.g。注z如果需同时测定样品中所含其他糖类，可在标准糖溶液中加入各种糖Ig，进样如前，记下各种糖保留时间，按上列公式计算各值

7、a8 允许楚同一样品两次测定值之差不得超过两次测定平均值的5%。方法二乳糖、11糖和总糖的测定(莱因-埃农民法)9 方法提要乳糖z样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，直接滴定己标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终点稍过量时，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。煎糖2样品除去蛋白质后，其中煎糖经盐酸水解转化为具有还原能力的葡萄糖和果糖，再按还原糖测定。将水解前后转化糖的差值乘以相应的系数即为煎糖含量。总糖z乳糖和jJ，糖之和。10 试剂所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，如未注

8、明其他要求，均指三级水.10. 1 费林氏液甲液和乙液10. 1. 1 甲液s取34.639g硫酸铜，溶于水中，加入0.5mL浓硫酸，加水至500mL。242 GB/T 5413. 51997 10. 1. 2 乙液z取173g酒石酸仰销及50g氢氧化销溶解于水中，稀释至500mL.静置两天后过滤。10.2 次甲基蓝溶液，10g/L.10.3 盐酸溶液z体积比1 1. 10.4 自由散溶液，0.5g盼歌溶于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加入20mL水，然后再加入约O. lmol/L的氢氧化纳溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容至100m! 10.5 氢氧化销溶液，c(NaOH)

9、为300g/L。取300g氢氧化锅，溶于1000mL水IU10.6 乙酸铅溶液，c(PbAc2)为200g/L.取20g乙酸铅，溶解于100mL水中。10.7 草酸饵-磷酸氢二锅溶液:取草酸梆袍，磷酸氢二锅7g.溶解于100mL司、tJO11 仪器常用理化实验室仪器。12 操作步骤及结果计算12. 1 费林氏液的标定12. 1. 1 用乳糖标定12.1.1.1 称取预先在9294C烘箱中干燥2h的乳糖标样约0.75g(准确到O.2mg).用水溶解并稀释至250mL.将此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中，待滴定。12.1.1.2 预滴定s取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶

10、中。再加入20mL蒸馆水，从滴定管中放出15mL乳糖溶液于三角瓶中，置于电炉上加热，使其在2mn内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s.加入3滴次甲基蓝溶液(10.2).继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。12.1.1.3 精确滴定s另取10mL费林氏液甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馆水，一次加入比预备滴定量少O.51. OmL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝溶液，然后继续滴入乳糖溶液(一滴一滴徐徐滴入).待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据(在同时测定煎糖时，

11、此即为转化前滴定量)。12.1.1.4 按式(2)、(3)计算乳糖测定时，费林氏液的乳糖校正值1，), A , = v, X m , X 1000 , -且2io=4V1mIHH-HH-. . .叫2) f-4 VEXm1 1 一AL，一一( 3 ) 式中，A，一实测乳糖数，mg;V , 滴定时消耗乳糖液量，mL，m，一一称取乳糖的质量.g , AL，一一由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数，mg() 243 GB/T 5413.5一1997表1乳糖及转化糖因数表(lOmL费林氏液)1商定量，mL乳糖.mg转化糖.mg滴定量.mL乳糖.mg转化糖.mg15 68.3 50.5 33 67.8

12、51. 7 16 68.2 50.6 34 67.9 51. 7 17 68.2 50.7 35 67.9 51. 8 18 68. 1 50.8 36 67.9 51. 8 19 68. 1 50.8 37 67.9 51. 9 20 68.0 50.9 38 67.9 51. 9 21 68.0 51. 0 39 67.9 52.0 22 68.0 51. 0 40 67.9 52.0 23 67.9 51. 1 41 68.0 52. 1 24 67.9 51. 2 42 68.0 52.1 25 67.9 51. 2 43 68.0 52.2 26 67.9 51.3 44 68, 0

13、 52.2 27 67.8 51. 4 45 68.1 52.3 28 67.8 51. 4 46 68. 1 52.3 29 67, 8 51. 5 47 68.2 52.4 30 67.8 51. 5 48 68.2 52.4 31 67.8 51. 6 49 68.2 52.5 32 67.8 51. 6 50 68.3 52, 5 注，因数系指与精定量相对应的数目，可自表I中查得.若蔚糖吉量与现糖含量的比超过3 1时，则在精定量中加表2中的校正数后计算.12.1.2 用煎糖标定12. 1. 2. , 称取在105C烘箱中干燥2h的1-糖约O.2g(准确iJJO. 2mg).用SOmL水

14、溶解并洗入100mL容量瓶中，加水10mL，再加入10mL盐酸(10.3)，置7SC水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min4Ss之间，使瓶内温度升至67C。自达到6TC后继续在水浴中保持5min.于此时间内使其温度升至69.SC，取出，用冷水冷却，当瓶内温度冷却至3SC时，加2滴甲基红指示剂(10.4).用300g/L的氢氧化销(1 0. S)中和至呈中性.冷却至20C，用水稀释至刻度.摇匀、并在此温度下保温30min后再按12.1.1.2和12.1.1.3操作。得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化糖量。12.2.2 按式(4)、(S)计算1-糖测定时，费林氏液的1-糖校正值(/，),

15、 A , = v, X m , X 1 000句2 = .r; :-. .r;:; : . - = 10.5263 X V2 X m? 100 X O. 9S .， ._.- . ., .,. ( 4 ) /, = 10.5263 X V, X m2 ,- AL26. . . . .( 5 ) 式中，A2一一实测转化糖数，mg;V2一)滴定时消耗1-糖液量.mL;m2一-取称蕉糖的质量.g ; AL2二一由煎糖液滴定毫升数查表l所得的转化糖数.mgo12.2 乳糖的测定12. 2. 1 样品处理244 GB/T 5413. 5-1997 12. 2. 1. 1 称取2.53g样品(准确至O.0

16、1g).用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。12. 2. 1. 2 加4mL乙酸铅00.6)、4mL草酸僻磷酸氢二锅溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤纸过滤，弃去最初25mL滤液后，所得滤液作滴定用。12.2.2 滴定12.2.2.1 预漓定z将此滤液注入一个50mL滴定管中，待测定。取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馆水，置于电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态155，加入3滴次甲基蓝00.2).然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。1

17、2.2.2.2 精确滴定z另取10mL费林氏液(甲、乙各5mL)于250mL三角烧瓶中，再加入20mL蒸馆水.一次加入比预备滴定量少O.51. OmL的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2mint加入3滴次甲基蓝溶液，然后一滴满徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为汁算的依据(在同时测定lt糖时，此即为转化后滴定量)。12. 2. 3 乳糖含最的计算L=F, x 1, X 0.25 X 100 V , X m 式中:L一一样品中乳糖的质量分数.g/100g，1，一-由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数，mg;1，一费林氏液乳糖校正值:V ,

18、 滴定消耗滤液量，mL;m一一样品的质量.go12.3 煎糖的测定12.3.1 转化前转化糖量的汁算利用测定乳糖时的满定量，自表1中查出相对应的转化糖量，按式(7)计算z. ( 6 ) 转化前转化糖质量分数(%)= F 2 X 12 X 0.25 X 100.HH-. .( 7 ) V1 X m 式中:F2 由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得转化糖数，mg;12一一费林氏液煎糖校正值;V, 滴定消耗滤液量，mLjm一一样品的质量.g0 12.3.2 样液的转化及滴定取50mL样液于100mL容量瓶中，加水10mL.再加入10mL的盐酸00.3).置75C水浴锅中，时时摇动，在2min30s

19、至2min45s之间，使瓶内温度升至67C0自达到6TC后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5C.取出，用冷水冷却，当瓶内温度冷却至35C时，加2滴盼歇溶液剂(10.4).用氧氧化纳(10.5)中和至呈中性，冷却至20C.用水稀释至刻度，摇匀。并在此温度下保温30min后再按12.2.2滴定，得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化液量。13 X 12 X O. 50 X 100 转化后转化糖质量分数(%)= V2 X m 式中:1, 由V2查得转化糖数，mg;12 费林氏液煎糖校正值;m一样品的质量.g，V2一一滴定消耗的转化液量，mLo12. 3. 3 煎糖含量的计算( 8

20、 ) 样品中煎糖含量也/100日)= (1., - .2) X 0.95 . . .( 9 ) 245 GB/T 5413. 5-1997 式中，L.-转化后转化糖的质量分数，%;L，一一转化前转化糖的质量分数，%。12.3.4 若样品中乳糖与jf糖之比超过3: 1时，则计算乳糖时应在滴定量中加上表2中的校正值数后再查表1和汁算。12.3.5 总糖=煎糖+乳糖13 允许缠13. 1 重复性由同一分析人员在短时间间隔内测定的两个结果之间的差值，不应超过结果平均值的1.5%。13. 2 重现性由不同实验室的两个分析人员对同一样品测得的两个结果之差，不应超过结果平均值的2.5%。表2乳糖滴定量校正值数滴定终点时所用的糖液量用10mL费林氏液、煎糖及乳糖量的比mL 3 1 6 1 15 O. 15 0.30 20 0.25 0.50 25 0.30 0.60 30 0.35 。7035 0.40 0.80 40 0.45 0.90 45 0.50 0.95 50 0.55 1. 05 方法三蕉糖的测定-一(酶比色法)同GB/T16286。246