农业部1025号公告-21-2008 动物源食品中氯霉素残留检测气相色谱法.pdf

1、ICS 67040X OO中华人民共和国国家标准农业部1025号公告一212008动物源食品中氯霉素残留检测气相色谱法Determination of chioramphenicol residues in edible tissues of animalGas chromatographic method20080429发布 2008-0429实施中华人民共和国农业部发布刖 罱农业部1025号公告一212008本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：中国农业大学、农业部兽药安全监督检验测试中心(北京)。本标准主要起草人：沈建忠、丁双阳、李建成、江海

2、洋、肖希龙、李晓薇、程林丽。1范围农业部1025号公告一212008动物源食品中氯霉素残留检测气相色谱法本标准规定了动物源食品中氯霉素残留量的气相色谱检测方法。本标准适用于猪肉、鸡肉中氯霉素残留量检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682分析实验室用水规则和试验方法农牧发200311号兽药残留试验技术规范(试行)农牧发199918号官方取样程序3原

3、理组织样品经乙酸乙酯提取、液液分配和固相萃取净化后，用N，O双三甲基硅烷三氟乙酰I按(BSTFA)衍生化，用气相色谱微电子捕获检测器检测，内标法定量。4试剂除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯；水符合GBT 6682二级用水的规定。41乙酸乙酯：色谱纯。4 2正己烷：色谱纯。43甲醇：色谱纯。4 4乙腈：色谱纯。4 5氯化钠溶液(4)：称取氯化钠400 g，加水溶解并稀释至1 000 mL。4 6 N，o双三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)。47氨水。4 8氯霉素标准品。49异氯霉素标准品。410氯霉素标准贮备液(1 000“gL)准确称取适量的氯霉素标准品，用乙腈溶解定容，配制成1 000

4、pgL的标准贮备液，一20。C冰箱中保存。工作液用乙腈稀释。4 11异氯霉素标准贮备液(1 000阻鐾L)准确称取适量的异氯霉素标准品，用乙腈溶解定容，配制成1 000,gL的标准贮备液，200c冰N中保存。工作液用乙腈稀释。5仪器5 1气相色谱仪，配微池电子捕获检测器。1农业部1025号公告一2120085 2涡动混合器。5 3冷冻离心机。5 4电子天平：感量001 g与0001 g。5 5组织匀浆机。56氮吹仪。5 7固相萃取装置。5 8固相萃取柱HLB或相当者：60 mg，3 mL。6测定步骤6 1提取称取(5士o05)g试样，置于50 mL离心管中，加人20 mL乙酸乙酯旋涡混合2 m

5、in，5 000 rrain离心15min，分离上清液。用20mL乙酸乙酯重复提取1次，合并两次上清液，加人500“L氨水，放人一20冰箱过夜后，在一10条件下6 000 rmin离心20min，将全部上清液迅速转移至另一离心管中，45。C氮气吹干。加500“L甲醇旋涡混合1rain后，加入10mL 4氯化钠溶液(45)旋涡混合10 s，再加入10mL正己烷轻摇20次，4 000 rrain离心10rain，弃上层液，用正己烷重复脱脂1次，加入500”L氨水，混匀备用。62净化HLB柱用2mL甲醇和2mL水预洗，将上述备用液在重力作用下过柱，然后分别用2mL水和1mL甲醇：乙腈：水：氨水(15

6、：15：65：5)淋洗，再用2 mL甲醇：乙腈：水：氨水(30：30：35：5)洗脱药物，收集洗脱液。63衍生化洗脱液在45。C氮气吹干，加入100 pL乙腈旋涡混合20 s，再加100 pL BSTFA旋涡混合10 S，70 6C衍生化20rain，取出旋涡混合30 S，待冷却后，用氮气小流速缓慢吹干，然后用200L正己烷复溶，旋涡混合30 s，再加入300pL甲醇：水(5；5)旋涡混合30 s，转人500pL离心管中，9 000 rmin离心2rain，吸取上层液转入装有200“L内插管的进样小瓶中，供气相色谱检测。6 4气相色谱测定641气相色谱测定参数气相色谱柱：HP一1(5苯基甲基硅

7、氧烷)，30 mX 320 rnmX025Lm。载气：氮气。柱前压：30 psi。进样口温度：250。进样量：3L。分流模式：不分流。程序升温程序：105保持05 min，以30rain的速度升至280。C，保持5 rain。以30rain的速度再升至290，保持5 rain。检测器：微池电子捕获检测器，检测温度320。642测定分别取适量试样溶液和相应浓度的标准工作液，作单点或多点校准，以待测物色谱峰面积与内标物色谱峰面积比值进行定量。6 4 3结果计算试样中氯霉素的残留量x，以微克千克表示(“gkg)，按公式(1)计算：，X一业农业部1025号公告212008式中：A试样色谱峰与内标色谱峰

8、的峰面积比对应的氯霉素质量，单位为微克(pg)，试样稀释倍数；m试样的取样量，单位为克(g)；测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后两位。7检测方法灵敏度、准确度、精密度7 1灵敏度本方法在猪肉、鸡肉组织中的检测限为01”gkg。7 2准确度本方法回收率均为60120。7 3精密度本方法的批内变异系数CV21，批间变异系数cV32。农业部1 025号公告一2 120084附录A(资料性附录)Hz jEcDlB(LxW、w61瑚01 D)15 COO mcap n stdam12 500 】00 1_7 500 J1 唧 5 000 f2 5喘一J u L八J L6 5 7E 7 7

9、笛 7 E 7j5 s RE 乳囊久 “图A 1猪肉标准品、空白、0 3斗gkg添加色谱图i囊ECDl B(LXW、W6120801 D)眦叩 n fl ，l l “一fl yI 唧f2 5鼍 v、7、。，。、，。，、，、，。，U、，、，、 5 7 7 5 R R 5 m1“ECDl B(LXW、W6120805 D)bl肋ky。、“ L6 65 7 7 5 8 E 5 Hz ECDl B(LXW、W6120808 D)15 000 咒 1 。i2 50010 0007 5005 000 【l fl 阻P J,12 500 J一J U ULL06 65 7 7j i gj mtJ图A 2鸡肉标准品、空白、0 3斗gkg添加色谱图