农业部953号公告-9.4-2007 转基因植物及其产品环境安全检测 抗病水稻 第4部分 生物多样性影响.pdf

1、ICS 65020B 04中华人民 共禾口 国国家标准农业部953号公告一942007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第4部分：生物多样性影响Evaluation of environmental impact of genetically modifiedplants and its derived productsDisease-resistant ricePart 4：Impacts on biodiversity20071218发布 20080301实施中华人民共和国农业部发布刖 舌农业部953号公告一9 42007本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标

2、准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国农业科学院生物技术研究所、农业部科技发展中心、中国农业科学院植物保护研究所、中国水稻研究所。本标准主要起草人：金芜军、宋贵文、王锡锋、傅强、黄世文、彭于发、张永军、宛煜嵩、沈平。农业部953号公告一9 42007转基因植物及其产品环境安全检测 抗病水稻第4部分：生物多样性影响1范围本标准规定了转基因抗细菌病害自叶枯病水稻对稻田生物多样性影响的检测方法。本标准适用于转基因抗白叶枯病水稻对稻田主要害虫及优势天敌种群数量、节肢动物群落结构及水稻主要病害影响的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款

3、。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各研究和检测单位使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 44041粮食作物种子禾谷类农业部953号公告912007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性GBT 157941995稻飞虱测报调查规范3要求3 1试验材料转基因抗病水稻品种和对应非转基因水稻品种。3 2其他要求按农业部953号公告一912007中“4要求”执行。4试验方法4 1试验设计随机区组设计，3次重复，小区面积不小于150m2(10m15m)。除进

4、行常规耕作管理外，按化学防治不同设4个处理：1)转基因抗病水稻，不喷施任何化学农药；2)转基因抗病水稻，除不防治靶标病害外，进行正常病、虫、草害化学防治；3)对应非转基因水稻品种，不喷施任何化学农药；4)对应非转基因水稻品种，进行正常病、虫、草害化学防治。4 2播种和移栽转基因抗病水稻按当地单季水稻播种(或按转基因抗病水稻品种特性确定)，25 d30 d秧龄(或转基因抗病水稻品种推荐秧龄)时单本移栽，移栽密度25万株30万株hm2。43调查记录43 1对水稻田节驶动物多样性的影响43 1 1调查方法直接调查观察法：田间调查采用盘拍法平行跳跃式取20个30个样点，每个样点取2栋，瓷盘规1农业部9

5、53号公告一9 42007格为30 cmX40 cm调查从移栽后20 d到成熟，每7 d调查1次，记载整株水稻上各种昆虫和蜘蛛的数量、种类和发育阶段。开始调查时，首先要快速观察活泼易动的昆虫和(或)蜘蛛的数量。对田问不易识别的种类进行编号。带回室内鉴定。吸虫器调查法：在水稻移栽20 d30 d(分蘖中期)后调查第1次，以后在分蘖末期、齐穗期和黄熟期(收获前l周2周)各调查1次，共计4次，每小区采用对角线5点取样。每点用吸虫器抽取6株水稻(全株)及其地面上的所有节肢动物。将抽取的样品带回室内清理和初步分类后，放人75乙醇溶液保存，供迸一步鉴定。4 3 1 2结果记录记录所有直接观察到和用吸虫器抽

6、取的节肢动物的名称、发育阶段和数量。4 3 13结果表述用节肢动物群落的多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数3个指标，分析比较转基因抗病水稻田昆虫群落、害虫和天敌亚群落的稳定性。节肢动物群落的多样性指数按公式(1)计算。H一P。lnP。(1)式中：H多样性指数；P。一N，N(M为第i个物种的个体数；N为总个体数)；s 物种数。节肢动物群落的均匀性指数按公式(2)计算。JHInS(2)式中：J均匀性指数；H多样性指数；S 物种数。节肢动物群落的优势集中性指数按公式(3)计算。C=：(N，IN)2(3)式中：C 优势集中性指数；N。第i个物种的个体数；N总个体数。4 3 2对水稻田主要鳞翅目害虫

7、的影响4 3 2 1调查方法采用平行跳跃法取样，每点连续调查相邻2株4株(发生重的少查，发生少的多查)水稻，每小区查25点，分别在分蘖中期、分蘖末期、齐穗期和黄熟期(收获前1周2周)各调查1次，或根据主要鳞翅目害虫发生情况确定调查时间。调查指标包括每株水稻的分蘖数、叶片数，稻螟虫(二化螟、三化螟、大螟)造成的枯鞘、枯心或白穗数，稻纵卷叶螟造成的卷叶数及卷叶程度，其他鳞翅目害虫如稻弄蝶、稻眼蝶、稻螟蛉的数量。4 3 2 2结果表述稻螟虫的发生情况用枯鞘枯心白穗率表述，按公式(4)计算。 枯鞘枯心白穗率()一篆嚣者磊1。(4)2农业部953号公告一9 42007稻纵卷叶螟的发生情况用卷叶率表述，按

8、公式(5)计算。 卷叶率()一碉蚕亲藉100(5)其他鳞翅目害虫的发生情况用害虫的发生密度表述，按公式(6)计算。 某种害虫的发生密度(头百株)一螽妻燃100(6)43 3对水稻田主要刺吸性害虫的影响4 3 3 1调查方法调查每个小区飞虱(如褐飞虱、灰飞虱、白背飞虱等)和叶蝉(如黑尾叶蝉等)的种类和数量，下述两种方法任选1种。方法1：按6BT 15794 1995中“大田虫情普查”的方法进行调查。即用盘或盆拍查法，分别在分蘖中期、分蘖末期、齐穗期和黄熟期(收获前1周2周)各调查1次。每小区调查i05点(虫量多的少查，虫量少的多查)，每点查2株水稻，记录稻飞虱及叶蝉的种类、虫态和数量。方法2：机

9、动吸虫器取样法。用对角线5点取样法，分别在分蘖中期、分蘖末期、齐穗期和黄熟期(收获前1周2周)各调查1次。每小区调查5点，每个样点用吸虫器吸取6株水稻全株及其地面的所有害虫。将吸取的样品带回室内清理并记录稻田飞虱和叶蝉的种类、虫态和数量。4332结果表述按公式(6)计算刺吸式害虫的发生密度，以此表述各主要刺吸式害虫的发生情况。4 4对水稻主要病害的影响4 4 1对水稻稻瘟病的影响4 4 1 1调查记录在水稻苗期和分蘖期各调查1次叶瘟，每小区采用5点取样，每点调查20株水稻，具体病害的分级标准按附录A中表A1 1执行。在水稻黄熟期(收获前l周2周)调查1次穗颈瘟，每小区采用5点取样，每点调查20

10、株水稻，具体病害的分级标准按附录A中表A卜2执行。4 4 1 2结果表述对水稻苗瘟和叶瘟的发病情况用病情指数表示，按公式(7)计算。f一莓凳型100(7)T1 M 式中：I 病情指数；： 调查病害相对病级数值及其株数乘积的总和；N 病害某一级别的植株数，单位为株；R一病害的相对病级数值；M 病害的最高病级数值；T 调查总株数，单位为株。水稻穗颈瘟用损失指数表示，损失指数按公式(8)计算。 ，一瓣100(8)式中：I 损失指数，单位为百分数()；： 调查各级损失率及其发病株数乘积的总和；3农业部953号公告一942007N某一级别的损失率的植株数，单位为株；s各级损失率；B分级标准最高级损失率；

11、T调查总株数，单位为株。综合苗叶瘟和穗颈瘟的发病情况，根据附录A中表A1_3，对转基因抗病水稻抗稻瘟病进行综合性评价。44 2对水稻纹枯病的影响4 4 2 1调查记录在分蘖盛期、孕穗后期和黄熟期各调查一次，每小区采用5点取样，每点调查20株水稻，对水稻纹枯病发生情况进行调查，具体病害的分级标准按附录A中表A2执行。4422结果表述对水稻纹枯病的发病情况用病情指数表示，按公式(7)计算。443对水稻白叶枯病害的影响4 4 3 1调查记录在水稻分蘖盛期和黄熟期，各调查1次。每小区采用5点取样，每点调查20株水稻；或采用平行跳跃法调查5行，每行调查20株。分级标准按本标准第l部分附录A中表A1执行。

12、4 4 3，2结果表述水稻白叶枯病的发病情况用病情指数表示，按公式(7)计算。4 4 4对水稻条纹叶枯病的影响4 441调查记录在水稻苗期、分蘖盛期和黄熟期各调查1次，每小区采用5点取样，每点调查20株水稻，对水稻条纹叶枯病发生情况进行调查，病害的具体分级标准按附录A中表A3执行。4 4 4 2结果表述对水稻条绞叶枯病的发病情况用病情指数表示，按公式(?)计算。4 5结果分析采用方差分析方法比较转基因抗病水稻与非转基因水稻对主要鳞翅目害虫、主要刺吸性害虫、节肢动物群落结构以及水稻主要病害的影响。附录A资料性附录)病害分级标准农业部953号公告一942007表A 11 水稻苗瘟、叶瘟病情分级和调

13、查记载标准病级 稻瘟病抗性反应 抗感o 叶片上无病斑，叶片受害面积为。 HR1 病斑为针头状大小或稍大褐点，叶片受害面积o11og R3 圆形至椭圆形灰色病斑，边缘褐色，病斑直径约1 mm2 mm，叶片受害面积MR11105 典型纺锤形病斑，叶片受害面积lO1z5 MS7 典型纺锤形病斑，叶片受害面积25175 S9 叶片受害面积751或全部枯死 HS表A 12穗颈瘟或单穗病情分级和调查记载标准病级 穗颈瘟受害情况 单穗受害情况o 病穗率低于1 穗上无病1 病穗率15 每穗损失率5(个别小枝梗发病)3 病穗率为5110 每穗损失率5115(1lO15左右枝梗发病)5 病穗率为lO125 每穗损

14、失率15130(15】3左右枝梗发病)7 病穗率为25150 每穗损失率301-50(穗颈或主轴发病，谷粒半瘪)9 病穗率501 每穗损失率501(穗颈发病，大部分瘪谷或造成白穗)表A 1-3稻瘟病抗性评价综合指数病级 抗性综合指数 抗性水平o O1 高抗(HR)1 o12 抗(R)3 214o 中抗(MR)5 4 16o 中感(MS)7 6175 感(s)9 769 高感(HS)表A 2水稻纹枯病病情分级和调查记载标准病害评级 症 状 病情指数0级(免疫)(HR) 植株叶鞘和叶片未见症状 病指为01级(抗病)(R) 稻株基部有少数零星病斑 病指为01-203级(中抗)(MR) 病斑延伸到倒3

15、叶(剑叶为倒0叶) 病指为20I405级(中感)(Ms) 病斑延伸到倒2叶 病指为401-607级(感病)(s) 病斑延伸到倒l叶 病指为601809级(高感)(Hs) 病斑延伸到剑叶或全株枯死 病指为801100农业部953号公告_9 42007表A 3水稻条纹叶枯病病情分级和调查记载标准病害评级 病害症状 相对病指。级=高抗(HR) 无症状 相对病级指数小于。1级=抗病(R) 有轻微黄绿色斑驳症状，病叶不卷曲，植株生长正常 相对病级指数为O-lO病叶上褪绿扩展相连成不规则黄白色或黄绿色条斑，病叶不卷曲或略2级一中抗(MR) 相对病级指数为lo130有卷曲，生长基本正常3级一中感(MS) 病叶严重褪绿，病叶卷曲呈捻转状，少数病叶出现黄化枯萎症状 相对病级指数为30150大部分病叶卷曲呈捻转状，叶片黄化枯死，植株呈假枯心状或整株枯4级=感病(s) 相对病级指数大于50】死6