GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准.pdf

1、GB 15979-2002 前言本标准全文强制。GB 15979一1995一次性使用卫生用品E生标准自1996年发布以来，使生产企业明确了卫生要求和目标，管理部门也有了监督监测依据，对推动该行业的健康发展与卫生水平的提高起到了积极作用。与此同时，随着产品种类与材料的发展，该标准有一些地方需要完善。因此提出修订本标准。本标准自实施之日起代替GB15979一1995。本标准的附录A至附录G为标准的附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准负责起草单位上海市疾病预防控制中心；参加起草单位2宝洁中国）有限公司、强生（中国有限公司。本标准主要起草人z沈伟、卢敏、杨宏平、周密、潘希和、刘育京。654

2、. 中华人民共和国国家标准一次性使用卫生用晶卫生标准GB 15979-2002 Hygienic standard for disposable sanitary products 代替Gil15979 1995 1 范围本标准规定了一次性使用卫生用品的产品和生产环境卫生标准、消毒效果生物监测评价标准和相应枪验方法，以及原材料与产品生产、消毒、贮存、运输过程卫生要求和产品标识要求。在本标准中，一次性使用卫生用品是指z本标准适用于国内从事一次性使用卫生用品的生产与销售的部门、单位或个人，也适用于经销进口一次性使用卫生用品的部门、单位或个人。2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构

3、成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。c;B 15981 1995 消毒与灭菌效果的评价方法与标准3定义本标准采用下列定义。一次性使用卫生用品使用一次后即丢弃的、与人体直接或间接接触的、并为达到人体生理卫生或卫生保健（抗菌或抑菌）目的而使用的各种日常生活用品，产品性状可以是团体也可以是液体。例如次性使用手套或指套（不包括医用手套或指套）、纸巾、湿巾、卫生湿巾、电话膜、帽子、口罩、内裤、妇女经期卫生用品（包括卫生护垫）、尿布等排泄物卫生用品不包括皱纹卫生纸等厕所用纸）、避孕套等，在本标准中统称为“卫生用品”。4

4、产品卫生指标4. 1 外观必须整沽，符合该卫生用品固有性状，不得有异常气昧与异物。4.2 不得对皮肤与粘膜产生不良剌激与过敏反应及其他损害作用。4.3 产品须符合表I中微生物学指标。表lt做生物指标产品种类初始污染菌1细菌菌落总数大局菌群cfu/g fu/g或cfu/ml于套或指套、纸巾、湿巾、帽于、内200 不得检出裤、电话膜中华人民共和国国东质量监督检验检症总局200203 05批准致病性化服菌们真茵茵落单数fu/g或cfu/ml不得检出1 00 2002-09-01实施55S GB 15979-2002 表I（完微生物指标产品种类初始污染菌细菌菌落总数真茵茵格，曾数大肠菌群致病性化版商2

5、fu/g或cfu/mLfu/g或cfu/mLcfu/g 抗菌或抑菌）液体产品/根据用途选择1根据材料选择口罩、J妇女经期卫生用品、，, 尿布等排泄物卫生用品、J避孕套/ 、JI l用于阴道粘膜的产品须做阴道粘膜剌激试验，但无须做皮肤剌激试验。A2 试验方法皮肤刺激试验、阴道粘膜剌激试验和皮肤变态反应试验方法按卫生部消毒技术规范（第三版）第一分册实验技术规范（1999）中的“消毒剂毒理学实验技术”中相应的试验方法进行。固体产品的样品制备方法按照A3进行。注I 用于皮肤剌激试验中的空白对照应为生理盐水和斑贴纸2 在皮肤变态反应中致敏处理和激发处理所用的剂量保持一致。A3 样晶制备A3. 1 皮肤剌

6、激试验和皮肤变态反应试验以横断方式剪一块斑贴大小的产品。对于干的产品，如尿布、妇女经期卫生用品，用生理盐水润湿后贴到皮肤上，再用斑贴纸覆盖。湿的产品，如湿巾，则可以按要求裁剪合适的面积，直接贴到皮肤上，再用斑贴纸覆盖。A3. 2 阴道粘膜剌激试验A3. 2- 1 子的产品（如妇女经期卫生用品）以横断方式剪取足够量的产品，按lg/10 mL的比例加人灭菌生理盐水，密封于萃取容器中搅拌后置于37c士IC下放置24h 0冷却到室温，搅拌后析取样液备检A3. 2 2 湿的产品（如卫生湿巾）在进行阴道粘膜剌激试验的当天，挤出湿巾里的添加液作为试样。A4 判定标准以卫生部消毒技术规范（第三版）第一分册实验

7、技术规范（1999）中“毒理学试验结果的最终判659 GB 15979-2002 ；：”的相1电部分引为试验结果判定原则。附录B（标准的附录）产晶微生物检测方法B1 产晶采集与样晶处理于同一批号的二个运输包装中至少抽取12个最小销售包装样品，1/4样品用于检测，1/4样品用于留样川1/2样品（口j就地封存）必要时用于复检。抽样的最小销售包装不应有破裂，检验前不得启开。在100级净化条件下用无菌方法打开用于检测的至少3个包装，从每个包装中取样，准确称取10且土lE样品。剪碎后加入到200ml，灭菌生理盐水中，充分混匀，得到一个生理盐水样液。液体产品用原液直接做样液。如被检样品含有大量吸水树脂材料

8、而导致不能吸出足够样液肘，稀释液量可按每次50mL递增直至能吸出足够测试用样液。在计算细菌菌落总数与真菌菌落总数时相应调整稀释度。B2 细茵茵落总数与初始污染菌检测方法本厅法适用于产品初始污染菌与细茵茵落总数（以下统称为细茵茵落总数）检测。B2. 1 操作步骤待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作菌落计数。共接种5个平皿，每个平皿中加入lmL样液然后用冷却至45c左右的熔化的营养琼脂培养基1520时，倒人每个平皿内混合均匀。待琼脂凝固后翻转平皿置35（士2C培养48h后，计算平板上的菌落数。B2. 2 结果报告商落呈片状生长的平板不宜采用；it数符合要求的平板上的菌落，按式也1）计算结果：X，

9、二A号式中x, 细菌菌落总数.cfu/g或cfu/mL;/ 5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数sK 稀释度。当阁藩数在100以内按实有数报告，大于100时采用二位有效数字。如果样品菌落总数超过本标准的规定，按B2.3进行复检和结果报告。B2. 3 复检方法) - B ( 将留存的复检样品依前法复测2次，2次结果平均值都达到本标准的规定，则判定被检样品合格；其中有任何l次结果平均值超过本标准规定，则判定被检样品不合格。B3 大肠菌群检测方法B3. 1 操作步骤取样液5mL接种50mL乳糖胆盐发酵管，置35c士zc培养24h，如不产酸也不产气，则报告为大肠商群阴性。如产酸产气，贝lj划线接种伊

10、红美蓝琼脂平板，置35c土zc培养1824h，观察平板上离落形态。典刑的大肠陶落为黑紫色或红紫色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽，也有的呈紫黑色，不m旦旦略带金属光滩或粉红色，中心较深的菌落。取疑似菌落12个作革兰氏染色镜捡，同时接种乳糖发酵管，置35（；土zc培养24h，观察产气。60GB 15979 2002 情况。B3. 2结报告凡乳糖ijfjt发酵管产酸产气乳糖发酵管产酸产气，在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落，革兰氏染色为阴性元芽胞杆菌，i1T报告被检样品检出大肠杆菌。B4 绿腋杆菌检测l方法114. 1 操刊步骤取样液5n1L，加入到50n1!, S（Dl,P培养液中，充

11、分混匀，置35c土2C培养1824h。如有绿隙杆萌生长.J市养液在向呈现一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。从培养液的薄离膜处挑取培养物，划线接种六悦二fjl基澳化馁琼脂平板，置35c土2C培养1824h，观察菌落特征。绿服杆菌在此培养基f生长良好，南洛扁平，边缘不整，菌落周围培养基略带粉红色，其他商不长。取1f疑菌落涂片作革兰氏染色镜检为革兰氏阴性菌者应进行下列试验z氧化酶试验取小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内，用元菌玻棒挑取可疑菌落涂在滤纸片上然后在其上滴加一滴新配制的1%工甲基对苯二胶试液，30s内出现粉红色或紫红色，为氧化酶试验阳性不变色者为阴性。绿腺菌素试验：取23个可疑菌落，分

12、别接种在绿服菌素测定用培养基斜面，35土2C培养24h. 加入三氯甲烧35ml，充分振荡使培养物中可能存在的绿隙菌素溶解待三氯甲炕呈蓝色时，用吸管移到另一试管中并加人Imo！，的盐酸lml，振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性，表币街绿版菌素存在。硝酸盐还原产气试验2挑取被检菌落纯培养物接种在硝酸盐陈水培养基中，置35c士2C培养24 h.培养基小倒管中有气者即为阳性。明胶液化试验：取可疑菌落纯培养物，穿刺接种在明胶培养基内，置35c土2C培养24h，取出放于4 10 （，如仍呈液态为阳性，凝固者为阴性。42 （吁吁( i式验：取可疑培养物，接种在普通琼脂斜面培养基上，置42（培养

13、2448h，有绿腋杆商F仁K为阳啊。B4.2 结果报告被检样品经增菌分离培养后，证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿腋杆菌试验均为阳性者，即可报告被检样品中检出绿腋杆菌。如绿版菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42C生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出绿版杆菌。B5 金黄色葡萄球菌检测方法BS. 1 操作步骤取佯液5ml，加入到U50 mL SCD!,P培养液中，充分混匀，置35C土2C培养24h。自上述增菌液中取l2接种环，如j线接种在血琼脂培养基上，置35c土2C培养2448h。在血琼脂平极li亥闲陆洛呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。挑取典型菌落，涂片

14、作革兰氏染色镜检，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列成葡萄状，元芽胞与英膜。镜检符合仁述情况，应进行下列试验zu露醇发酵试验：取上述菌落接种甘露酶培养液，置35C士2C培养24h，发酵甘露醇产酸者为阳性。lfll浆凝固酶试验：玻片法z取消洁干燥载玻片，一端滴加一滴生理盐水，另一端滴加一滴兔血浆，挑Jjj(菌落分别与生理盐水和血浆混合，5min如血浆内出现团块或颗粒状凝块，而盐水滴仍呈均匀混浊元凝固则为阳性，如两者均无凝固则为阴性。凡盐水滴与血浆滴均有凝固现象，再进行试管凝固酶试验g试竹法吸取I: 4新鲜血浆。.5 ml，放灭菌小试管中，加入等量待检菌24h肉汤培养物O.5 mL。1昆匀，66

15、1 GB 15979一2002放35（士2（温箱或水浴中每平小时观察一次，24h之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性商株肉汤培养物各O.5 n1l，作为阳性与阴性对照。85. 2 结果报告凡在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，口j报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。B6 溶血性链球菌检测方法86. 1 操作步骤取样液5ml，加人到50ml，葡萄糖肉汤，35c士2C培养24h。将培养物划线接种血琼脂平板，35c土2C培养24h观察前落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，表面光滑，边缘整齐，周围有

16、元色透明溶血圈。挑取典型商落作涂片革兰氏染色镜检，应为革兰氏阳性，呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况，应进行下列试验z链激酶试验：吸取草酸御血浆。.2 ml,(O. 01 E草酸例加5mL兔血浆混匀，经离心沉淀，吸取上清液），加入o.s时，灭菌生理盐水，混匀后再加入待检菌24h肉汤培养物O.5 ml，和o.25%氯化钙O. 25 ml，混匀，放35c士2C水浴中，2min观察一次（一般10min内可凝固），待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2h内不溶化，继续放置24h观察，如凝块全部溶化为阳性，24h仍不溶化为阴性。杆菌肤敏感试验s将被检菌菌液涂于血平板上，用灭菌慑子取每片含0.04单位杆

17、菌肤的纸片放在平板表面t，同时以己知阳性菌株作对照，在35c土2下放置1824h，有抑菌带者为阳性。86. 2 结果报告镜检革兰民阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肤试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌。B7 真茵茵落总擞栓测方法B?. 1 操作步骤待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作真菌计数。共接种5个平皿，每个平皿中加入lmL样液，然后用冷却至45c左右的熔化的沙氏琼脂培养基1525mL倒入每个平皿内混合均匀，琼脂凝固后翻转平皿置25c士2C培养7天，分别于3、5、7天观察，计算平板上的菌落数，如果发现菌落蔓延，以前次的菌落计数为准。B?. 2 结果报告菌落呈片状生长

18、的平板不宜采用：计数符合要求的平板上的菌落，按式（B2）计算结果：x，二B号式中X，一真菌菌落总数，cfu/g或cfu/mL;B一5块沙氏琼脂培养基平板上的真菌菌落总数gK 稀释度。当闲落数在100以内，按实有数报告，大于100时采用二位有效数字。如果样品菌落总数超过本标准的规定，按B7.3进行复检和结果报告。B7. 3 复检方法( B2 ) 将留存的复检样品依前法复测2次，2次结果都达到本标准的规定，则判定被检样品合格；其中有任何1次结果超过本标准规定，则判定被检样品不合格。662 B8 真菌定性检测方法BS. 1 操作步骤GB 15979 2002 取样液5n1I，加入到50ml, /Y氏

19、培养基中.25c 2培养7天，逐日观察有无真菌生长。BS. 2 结果报告培养管混浊应转种沙氏琼脂培养基，证实有真菌生长，可报告被检样品检出真菌。附录C（标准的附录）产品杀菌性能、抑菌性能与稳定性测试方法C1 样晶采集为使样品具有良好的代表性，应于同一批号三个运输包装中至少随机抽取20件最小销售包装样品，其巾5件留样J件做抑菌或杀菌性能测试，10件做稳定性测试。C2试验商与菌液制备c2. 1 试验菌c2. 1. 1 细菌：金黄色葡萄球菌（ATCC6538），大肠杆菌（8099或ATCC25922）。c2. 1. 2 酵母菌z臼色念珠菌（ATCC10231）。菌液制备：取菌株第314代的营养琼脂培

20、养基斜面新鲜培养物（1824h）.用5mL 0. 03 mol/L 磷酸盐缓冲液（以下简称PBS）洗下菌苔，使菌悬浮均匀后用上述PBS稀释至所需浓度。C3 杀菌性能试验方法该试验取样部位，根据被试产品生产者的说明而确定。C3. 1 中和剂鉴定试验进行杀菌性能测试必须通过以下中和剂鉴定试验。C3. 1. 1 试验分组1）染菌样片smL PBS。2）染菌样片smL中和剂。3）染菌对照片十5mL中和剂。4）样片十5ml，中和剂十染菌对照片。5）染菌对照片5mL PBS, 6）同批次PBS,7 l I司批次中和剂。的同批次培养基。c3. 1. 2 评价规定, 1 ）第1组元试验菌，或仅有极少数试验菌菌

21、落生长。2）第2组有较第1组为多，但较第3、4、5组为少的试验菌落生长，并符合要求。3）第3,4,5组有相似量试验菌生长，并在11091O cfu片之间，其组间菌落数误差率应不超过15%,4）第68组元商生长。5）连续3次试验取得合格评价。663 GB 15979-2002 c3. 2 杀菌试验c3. 2. 1 操作步骤将试验商24h斜面培养物用PllS洗下，制成菌悬液要求的浓度为z用100I，漓于对照样片上，因收陆数为1IO9IOcfu片）。取被试样片（z. 0 cm 3. 0 cm）和对照样片（与试样同质材料，同等大小，但不含抗菌材料，且经灭菌处理）各4片，分属4组置于4个灭菌平皿内。取I

22、述前悬液分别在每个被试样片和对照样片上滴加I00 ,.,1，均匀涂布，开始计时，作用2、5、10、20 min，用无菌慑分别将样片投入含5ml，相应中和剂的试管内，充分混匀，作适当稀释，然后取其中23个稀释度，分别吸取O.5 ml，置于两个平皿，用凉至4045c的营养琼脂培养基（细菌或沙氏琼脂培养基（酵母菌）15 ml，作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平板，35土zc培养48h （细菌或72h（酵母菌，作活茵茵落计数。试验重复3次，按式（Cl）计算杀菌率：式中x, 杀菌率，%：A一对照样品平均菌落数；B 被试样品平均菌落数。C3. 2 2 评价标准杀菌率二主90%，产品有杀菌作用

23、。X，（A-B)/A100% C4 溶出性抗（抑）菌产晶抑菌性能试验方法c4. 1 操作步骤( CI ) 将试验菌24h斜面培养物用PBS洗下，制成菌悬液（要求的浓度为z用I00 fI，漓于对照样片上或5 mL样液内回收菌数为110910cfu片或ml,)o 取敬试样片（2.0 cm 3. 0 cm）或样液（5mLl和对照样片或样液（与试样同质材料，同等大小，但不含抗菌材料，且经灭菌处理）各4片（置于灭菌平皿内）或4管。取t述菌悬液，分别在每个被试样片或样液和对照样片或样液上或内滴加100fL，均匀涂布混合开始计时，作用2,5、10、20min，用无菌慑分别将样片或样液（0.5 mLJ投入含5

24、mL PBS的试管内，充分i昆匀，作适当稀释，然后取其中23个稀释度，分别吸取O.5 ml，置于两个平皿，用凉至4045c 的营养琼脂培养基（细菌）或沙氏琼脂培养基（酵母离）15mL作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平极.35 c：士zc培养48h （细菌）或72h（酵母菌），作活茵茵落计数。试验重复3次，按式（CZ）计算抑菌率：x=(A - BJ/AX 100% 式中x，一抑菌率，%；A 对照样品平均菌落数zB 被试样品平均菌落数。c4. 2 评价标准抑菌率二三50%90%，产品有抑菌作用，抑菌率二三90%，产品有较强抑菌作用。C5 非溶出性抗（抑）菌产晶抑商性能试验方法C5.

25、1 操作步骤称取被试样片（剪成.0 cm I. 0 cm大小）O.75 g分装包好。( cz ) 将o.75 g重样片放入一个250时，的三角烧瓶中，分别加入70ml, PBS和5mL菌悬液，使菌悬液在PllS中的浓度为lx 109IO、，-cfu/mL。664 GB 15979 2002 将-c:角烧瓶固定于振荡摇床上，以300r/min振摇Iho 取o.5时，振摇后的样液，或用PBS做适当稀释后的样液，以琼脂倾注法接种平皿，进行菌落计数。同时设对照样片组和不加样片组，对照样片组的对照样片与被试样片同样大小但不含抗菌成分，其他操作程序均与被试样片组相同，不加样片组分别取5ml，菌悬液和70m

26、L PBS加入一个250ml，三角烧瓶中，混匀，分别于0时间和振荡1h后，各取O.5 ml，菌悬液与PBS的混合液做适当稀释，然后进行菌落计数。试验重复3次按式CC3l计算抑菌率X, （A B)/A X 100% ( C3 ) 式中x,抑前率，%；A 被试样品振荡前平均菌落数gB 被试样品振荡后平均菌落数。C5. 2 评价标准不加样片组的菌落数在11o 9 104 cfu/mL之间，且样品振荡前后平均菌落数差值在10%以内，试验有效$被试样片组抑菌率与对照样片组抑菌率的差值26%，产品具有抗菌作用。C6 稳定性测试方法C6. 1 测试条件C6. 1 1 自然留样将原包装样品置室温下至少1年，每

27、半年进行抑菌或杀菌性能测试。C6. 1. 2 加速试验：将原包装样品置5457C恒温箱内14天或3740C恒温箱内3个月，保持相对湿度75%，进行抑商或杀菌性能测试。CG. 2 评价标准产品经自然留样，其杀菌率或抑菌率达到附录C3或附录C4，附录C5中规定的标准值，产品的杀商或抑菌作用在室温下的保持时间即为自然留样时间。产品经54c加速试验，其杀菌率或抑菌率达到附录C3或附录C4，附录C5中规定的标准值，产品的杀菌或抑菌作用在塞温下至少保持一年。产品经37加速试验，其杀菌率或抑菌率达到附录C3或附录C4、附录C5中规定的标准值，产品的杀菌或抑菌作用在室温下至少保持二年。附录D（标准的附录）产晶

28、环氧乙镜残留量测试方法D1 测试目的确定产品消毒后启用时间，当新产品或原材料、消毒工艺改变可能影响产品理化性能时应予测试。D2 样晶采集环氧乙烧消毒后，主即从同一消毒批号的三个大包装中随机抽取一定量小包装样品，采样量至少应满足规定所需测定次数的量（留一定量在必要时进行复测用。分别于环氧乙烧消毒后24h及以后每隔数天进行残留量测定，直至残留量降至本标准4.6所规定的标准值以下。665 GB 15979-2002 D3 仪器与操作条件仪器气相色谱仪，氢焰检测器（FID）。柱，Chromosorb101 HP6080目；玻璃柱长2m，但mmo柱温，120C。检测器：150c。气化器：150（。载气量

29、：氮气，35mJ,/min0 氧气，35ml,/min0 空气，350 ml,/min。柱前压约为108kPao D4 操作步骤04. 1 标准配制用100mL玻璃针筒从纯环氧乙统小钢瓶中抽取环氧乙烧标准气（重复放空三次，以排除原有空气），塞上橡皮头，用IOmL针筒抽取上述100mL针筒中纯环氧乙烧标准气10mL，用氮气稀释到100 ml，（可将10ml，标准气注人到已有90mL氮气的带橡皮塞头的针筒中来完成）。用同样的方法根据需要再逐级稀释23次（稀释I000 10 000倍），作三个浓度的标准气体。按环氧乙统小钢瓶中环氧乙烧的纯度、稀释倍数和室温计算出最后标准气中的环氧乙烧浓度。计算公式如

30、下zc= 44 x 10 . , 273 - 22. 4 103 k , 273 + t ( Dl ) 式中c 标准气体浓度，g/ml.;k 稀释倍数gt 室温，Co04. 2 样品处理至少取2个最小包装产品，将其剪碎，随机精确称取2g，放入萃取容器中，加入5mL去离子水，充分摇匀，放置4h或振荡30min待用。如被检样品为吸水树脂材料产品，可适当增加去离子水量，以确保至少可吸出2mL样液。04. 3 分析待仪器稳定后，在同样条件下，环氧乙烧标准气体各进样.0 ml，待分析样品（水溶液）各进样2 I，每一样液平行作2次测定。根据保留时间定性，根据峰丽积（或峰高）进行定量计算，取平均值。04.

31、4 计算以所进环氧乙炕标准气的微克（g）数对所得峰面积或峰高）作环氧乙统工作曲线。以样品中环氧乙统对应的峰面积（或峰高）在工作曲线上求得环氧乙烧的量A(g），并以式（02）求得产品中环氧乙饶的残留量。X= A . ( 02 ) 严v，迸 （萃式中zx 产品中环氧乙炕残留量，g/g;A 从工作曲线中所查得环氧乙烧量，用3m一一所取样品量，g;v, . , 萃取液体积，ml,;666 GB 15979 2002 V【选进样量.mLo附录E（标准的附录）生产环撞来样与测试方法E1 空气采样与测试方法E1. 1 样品采集在动态下进行。室内面积不超过30m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙

32、1m；室内面积超过30时，设东、西、南、北、中5点，周围4点距墙1ffio 采样时，将含营养琼脂培养基的平板（直径9cm）置采样点（约桌面高度），打开平皿盖使平板在空气中暴露5min。E1. 2 细菌培养在采样前将准备好的营养琼脂培养基置35c土2C培养24h，取出检查有元污染，将污染培养基剔除。将己采集的培养基在6h内送实验室，于35c土2培养48h观察结果，计数平板上细茵茵落数。E1. 3 菌落计算nv- A 。一t一-1 -S A- VJ ( El ) 式中Y1 空气中细菌菌落总数，cfu/m3;A一一平板上平均细菌菌落数$S，平板面积，cm;t一暴露时间，minoE2 工f乍台襄面与工

33、人手褒面来样与测试方法E2. 1 样品采集工作台：将经灭菌的内径为5cmX5 cm的灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采祥管内送检。工人于：被检人五指并拢，用一浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10ml，灭菌生理盐水的采样管内送检。E2. 2 细菌菌落总数检测将已采集的样品在6h内送实验室每支采样管充分混匀后取1mL样液，放入灭菌平皿内，倾注营养琼脂培养基，每个样品平行接种两块平皿，置35士2C培养48h，计数平板上细菌菌落数。y, 兰10y

34、, =A 10 式中Y2 工作台表团细菌菌落总数，cfu/cm;A一一平板上平均细菌菌落数ss, 采样面积，cm勺y, 工人手表面细茵茵落总数，cfu只手。( E2 ) ( E3 J 667 E2. 3 致病菌检测按卒标准附录B进行。Fl 环氧乙镜消毒GB 15979 2002 附录F（标准的附录）消毒效果生物监测评价方法Fl. 1 环氧乙烧消毒效果评价用生物指示菌为枯草杆菌黑色变种芽胞CATCC9372）。在菌量为5IO 5 I 05 cfu片、环氧乙烧浓度为600mg/I，士30mg/I，、作用温度为54c士2、相对湿度为60%10%条件下，其杀灭90%微生物所需时间D值应为Z.55.8

35、min，存活时间二三7.5 min，杀灭时间运58min o Fl 2 每次测试至少布放IO片生物指示剂，放于最难杀灭处。消毒完毕，取出指示菌片接种营养肉汤培养液作定性检测或接种营养琼脂培养基作定量检测，将未处理阳性对照菌片作相同接种，两者均置35 c士2( 培养。阳性对照应在24h内有菌生长。定性培养样品如连续观察7天全部元菌生长，可报告生物指示剂培养阴性，消毒合格。定量培养样品与阳性对照相比灭活指数达到10也可报告消毒合格。F2 电离辐射消毒F2. 1 电离辐射消毒效果评价用生物指示商为短小杆菌芽胞E601CA TCC 27142），在菌量为5IO5 JO c!u片111，其杀灭90%.微

36、生物所需剂量丸。值应为1.7 kGy。F2. 2 每次测试至少选5箱，每箱产品布放3片生物指示剂，置最小剂量处。消毒完毕，取出指示菌片接种营养肉汤培养液作定性检测或接种营养琼脂培养基作定量检测，将未处理阳性对照菌片作相同接种，两者均置35c士2C培养。阳性对照应在24h内有菌生长。定性培养样品如连续观察7天全部无菌生长，黄溶解于乙醇中，然后用蒸饱水稀释。(2）稀石炭酸复红液zI g 2g 300 mL 0. 25 g 10 mL 90 ml, 称取碱性复红10g，研细，加95%乙弹100mL，放置过夜，滤纸过滤。取该液IOmL，加5%石炭酸水溶液90ml，混合，即为石炭酸复红液。再取此液10mL，加水90ml，即为稀石炭酸复红液。G18 O. 03 mol/L确醺盐缓冲液（PBS,pH?. 2) 成分672 磷酸氧二纳磷酸二氧御蒸馆水2. 83 g 1. 36 g 1 000 mL