GB T 15686-1995 高梁中单宁含量的测定.pdf

1、GB/T 156861995 本标准等效采用国际标准ISO 9648：1988高粱中单宁含量测定方法。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了高粱中单宁含量的测定方法。 本标准适用于高粱中单宁含量的测定。 2 引用标准 GB 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法 GB 5497 粮食、油料检验 水分测定法 3 原理 用二甲基甲酰胺溶液振荡提取高粱中单宁。过滤后取滤液，在氨存在的条件下，与柠檬酸铁铵形成一种棕色络合物，用分光光度计在525nm波长处测定其吸光度值，与标准系列比较定量。 4 试剂及溶液 所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 4.1 单宁酸标准溶液：2.5g单宁酸溶于水中，定容至1000

2、mL。该溶液避光、低温保存，一周内稳定。单 宁酸标准来源不同，对测定结果有影响。因此，推荐使用分子量为1701.25的单宁酸作为标准品，并且配 制0.3mg/mL的单宁酸标准溶液，按6.5.2测得吸光度值应在0.450.55范围之内。 4.2 8.0g/L氨溶液：取浓氨水（2528）3.6mL，定容至100mL。 4.3 75（ V/V）二甲基甲酰胺溶液：取75mL二甲基甲酰胺，加水约20mL，混匀，放至室温，然后定容至100mL。 注意：二甲基甲酰胺对肺、皮肤和眼睛有伤害。 4.4 3.5g/L柠檬酸铁铵溶液：柠檬酸铁铵试剂铁的含量在17（ m/m）20（ m/m）之间；3.5g/L溶液，使

3、用前24h配制。 5 仪器 5.1 分析天平：感量0.0001g。 5.2 机械粉碎机：带孔径为1.0mm的筛子。 5.3 中速滤纸。 5.4 振荡机。 页码，1/3GB/T 1568619952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156860K.htm5.5 可见分光光度计：10mm比色皿。 5.6 移液管：50mL。 5.7 刻度移液管：1mL、10mL。 5.8 试管。 5.9 容量瓶：25mL。 5.10 具塞三角瓶：100mL。 6 分析步骤 6.1 试样制备 按GB 5491取样。 样品弃去杂质，用机械粉碎机粉碎，并全部通过1.0mm孔径的筛

4、子，充分混匀。 粉碎的高粱试样在避光、干燥的条件下最多保存几天。因此，试样粉碎后应尽快测定。 6.2 水分测定 按GB 5497测定试样水分含量。 6.3 提取 称取试样约1g，精确至0.0001g，置于100mL三角瓶中，准确加入50mL75二甲基甲酰胺溶液，加塞子密封，于振荡机上振荡60min，然后用双层滤纸过滤，滤液备用。 6.4 测定 6.4.1 用移液管吸取提取液（6.3）1.0mL，置于试管中，用移液管移加6.0mL水和1.0mL氨溶液，振荡均匀、静置。自加氨水10min后，以水作空白，用分光光度计在 525nm波长处测定吸光度值。 6.4.2 用移液管吸取提取液（6.3）1.0m

5、L，置于试管中，用移液管移加5.0mL水和1.0mL柠檬酸铁铵溶液，振荡均匀，再加1.0mL氨溶液，充分振荡均匀、静置。自加氨水10min后，以水作空白，用分光光度计在525nm波长处测定吸光度值。 结果为两次测定吸光度值之差。 6.5 绘制标准曲线 测定试样的当天，按以下步骤绘制标准曲线。 6.5.1 用移液管准确吸取0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL单宁酸标准溶液（4.1），分别置于6个25mL容量瓶中，用75二甲基甲酰胺溶液稀释至刻度（标准溶液系列分别相当于0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mg/mL的单宁酸含量）。 6.5.2 用移液管分别吸取以上单宁酸标准溶液系列

6、1.0mL，置于6只试管中，各准确加入5.0mL页码，2/3GB/T 1568619952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156860K.htm水和1.0mL柠檬酸铁铵溶液，振荡均匀，再各加1.0mL氨溶液，充分振荡均匀、静置。自加氨水10min后，以水作空白，用分光光度计在525nm波长处测定吸光度值。 6.5.3 以吸光度值作纵坐标，单宁酸标准溶液系列中单宁酸含量（mg/mL）作横坐标，绘制标准曲线。 7 结果计算 高粱单宁含量以干基中单宁酸质量的百分数来表示，按下式计算： 8 重复性 由同一操作者同时或连续两次测定结果的允许误差不超过0.1，取两次测定的平均值作为测定结果（保留小数点后第二位）。 单宁（）（5 c/m）100/（100 H） 式中： c 试样提取液测定结果（6.4）， 从标准曲线上查得相当的单宁酸含 量，mg/mL；m 试样质量，g；H 试样的水分，。页码，3/3GB/T 1568619952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156860K.htm