GB T 20189-2006 饲料中莱克多巴胺的测定.高效液相色谱法.pdf

1、ICS 65. 120 B 20 道自中华人民共和国国家标准GB/T 20189-2006 饲料中莱克多巴肢的测定高效液相色谱法Determination of ractopamine in animal feeds High performance liquid chromatographic method 2006-05-17发布中华人民共和国国家质量监督检验检瘦总局中国国家标准化管理委员合2006-09-01实施GB/T 20189-2006 前言本标准是在参阅了国内外大量文献的基础上，根据我国技术发展水平研究制定的，采用了高效液相色谱-荧光检测法。本标准由农业部和全国饲料工业标准化技术

2、委员会提出并归口。本标准负责起草单位z中国农业大学动物医学院、国家饲料质量监督检验中心(北京)。本标准主要起草人z沈建忠、张素霞、苏晓鸥、徐百志、丁双阳、沈张奇、李兰。I 1 范围饲料中莱克多巴肢的测定高效液相色谱法本标准规定了检测动物饲料中莱克多I为o.5g/g。2 规范性引用文件是否可使用这些文件3 方法原理动相，用高效液相4 试剂和溶液除非另有说明，4. 1 乙睛:色谱纯。4. 2 甲醇:色谱纯。4.3 甲醇。4.4 二氯甲烧。4.5 正己炕。4. 6 4. 7 4. 8 (C5 HII 03 SNa . H2 0)，混匀。GB/T 20189-2006 4. 9 莱克多巴胶标准贮备液:

3、准确称取莱克多巴胶标准品(纯度二三99%)0.1000g，置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解，定容，其浓度为1000g/ mL的储备液，置4C冰箱中，可保存3个月。4. 10 莱克多巴胶标准工作被:分别准确吸取一定量的标准贮备液(4.9) ，置于10mL容量瓶中，用2%冰乙酸稀释、定容，配制成浓度为O.01g/mL、O.1g/mL、O.2g/mL、0.5g/mL、1.0g/mL、2.0g/mL的标准溶液，分别进行HPLC检测。5 仪器和设备实验室常用仪器、设备及以下设备。GBjT 20189-2006 5. 1 高效液相色谱仪z配荧光检测器。5.2 离心机。5.3 振荡器。5.4 玻璃具塞三角

4、瓶:250mL。5.5 微孔滤膜:0.45m。5.6 璇涡混合器。6 试样制备按GB/T14699. 1规定，取有代表性的样品，四分法缩减取约200g，经粉碎，全部过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。7 测定步骤7. 1 试样提取称取一定量的试样(10.0 g配合饲料，或5.0g浓缩饲料，或1.0g添加剂预混合饲料)，置于250 mL玻璃具塞三角瓶中，加人100mL提取液(4.7)，振荡30min。静止20min，取上清液1mL于离心管中，于450C下氮气吹干，加入4mL乙酸溶液(4.6)榕解，涡动30s60 s，加入2mL二氯甲皖(4.4)萃取，涡动30s , 3 000 r/min离心10

5、min，取上层乙酸相于另一离心管中，加入2mL正己皖(4.5) ，涡动30s , l 000 r/min离心5min，弃去上层，用0.45m微孔有机滤膜过滤作为试样制备液，供高效液相色谱分析。7.2 HPLC色谱条件色谱柱:C18柱，长250mm，内径4.6mm，粒径5m，或相当者。柱温:室温。流动相z见4.8轧。流动相流速z1.0 mL/m口11归n激发波长:226nn口m丑1。发射波长:305nm。进样量:50L。7.3 HPLC测定取适量试样制备液(7.1)和相应浓度的标准工作液(4.10)，作单点或多点校准，以色谱峰面积积分值定量。当分析物浓度不在线性范围内时，应将分析物稀释或浓缩后再

6、进行检测。8 结果计算与表述8. 1 试样中莱克多巴肢的含量x，以质量分数(g/g)表示，按式。)计算:式中:x=些.!.Xnm mj-一-HPLC试样色谱峰对应的莱克多巴肢的质量，单位为微克(g);m-一一试样质量，单位为克(g);n-一稀释倍数。8.2 测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后1位。9 精密度9. 1 重复性实验室内平行测定间的变异系数不大于10%。2 .( 1 ) GB/T 20189一20069.2 再现性实验室间测定的变异系数不大于20%。OON-ONH阁。国华人民共和国家标准饲料中莱克多巴朦的测定高效液相色谱法GB/T 20189-2006 由自唾中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地、新华书店经销9晤印张0.5字数6千字2006年8月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2006年8月第一版* 定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-27857 GB/T 20189-2006