GB T 5750-1985 生活饮用水标准检验法.pdf

1、水质总大肠菌酵数的测定方法(多管发酵法、滤膜法)(摘自GB/T5750-1985) 在饮用水的微生物安全监测中，普遍采用正常的肠道细菌作为粪便污染指标，而不是直接测定肠道致病阂。总大肠菌群系指群需氧及兼性厌氧的，在37C生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。总大肠菌群数系指每升水样中所含有的总大肠菌群的数目。总大肠菌群可用多管发酵法或滤膜法检验。1 多管发酵法1. 1 原理根据总大肠菌群应具有的生物特性，如革兰氏阴性无芽胞杆菌，在37C24h内能发酵乳糖并产酸产气.自旨在选择性培养基上产生典型菌落。1. 2 适用范围1. 2. 1 本法适用于饮用水、水源水，特别是混浊度

2、含量高的水质中总大肠菌群的测定。1.2.2 水样中总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能性。1. 3 仪器1. 3. 1 显微镜。1. 3. 2 革氏染色用有关器材。1. 3. 3 其他仪器同细菌总数的测定。1.4 培养基1. 4. 1 乳糖蛋白炼培养液1.4.1.1 成分:蛋白陈牛肉膏乳糖氯化纳10 g gegbns qupbpb 1.6%澳甲酣紫乙醇溶液1 mL 蒸馆水1000 mL 1. 4.1.2 制法.将蛋白脉、牛肉膏、乳糖及氯化销置于1000mL蒸馆水中加热溶解，调整pH为7.2 7. 4 ，再加人1时_1.6%漠甲盼紫乙醇溶液，充分混匀，

3、分装于装有倒管的试管中，置高压蒸汽灭菌器中，以115C灭菌20min，贮存于冷暗处备用。1. 4. 2 二倍浓缩乳糖蛋白陈培养液按上述乳糖蛋白豚培养液(36.j. 4.1)浓缩三倍配制。1. 4. 3 品红亚硫酸销培养基(供多管发酵法用)1.4. 3. 1 成分:蛋白陈10 g 乳糖磷酸氢二梆10 g 3.5 g ,101 琼脂蒸馆水1530 g 1 000 mL 元水亚硫酸销5 g左右5%碱性品红乙醇溶液20 mL 1. 4. 3. 2 储备培养基的制备.先将琼脂加至900mL蒸馈水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二梆及蛋白陈，混匀使之溶解，再以蒸馆水补足至1000mL.调整pH为7.27. 4

4、.趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入乳糖，混匀后定量分装于烧瓶内，置高压蒸汽灭菌器中以115C灭菌20min，贮存于冷暗处备用。1-4. 3. 3 平皿培养基的配制:将上法制备的储备培养基加热融化，根据烧瓶内培养基的含量，用灭菌吸管按比例吸取一定量的5%碱性品虹乙醇溶液，置于灭菌空试管中。再按比例称取所需的元水亚硫酸纳置于另一个灭菌空试管内，加灭菌水少许使其溶解后，置于沸水浴中煮沸10min以灭菌。用灭菌吸管吸取已灭菌的jff.硫酸纳溶液，滴加于碱性品红乙醇溶液内至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸销与碱性晶红的混合液全部加人已融化的储备培养基内，并充分混匀(防止产生气泡).立即将此种培养基适量倾

5、入于己灭菌的空平皿内，待其冷却凝固后置冰箱内备用。此种己制成的培养基于冰箱内保存不宜超过二周，如培养基已由淡红色变成深红色，则不能再用。1. 4. 4 伊红美蓝培养基1. 4.4.1 成分z蛋白陈10 g 乳糖10日磷酸氢二伺2g 琼脂2030 g 蒸馆水1 000 mL 2%伊红水溶液20 mL 。.5%美蓝水溶液13 mL 1-4.4.2 储备培养基的制备.先将琼脂加至900mL蒸馆水，加热溶解，然后加人磷酸氢二饵及蛋白陈，混匀使之溶解，再以蒸馆水补足至1000mL.调整pH为7.27.趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加人乳糖，混匀后定量分装于烧瓶内，置高压蒸汽灭菌器内以115C灭菌20min。

6、贮存于冷暗处备用。1.4.4.3 平皿培养基的配制:将上法制备的储备培养基加热融化。根据烧瓶内培养基的容量，用灭菌吸管按比例分别吸取一定量已灭菌的2%伊红水溶液及一定量已灭菌的0.5%美蓝水溶液，加入已融化的储备琼脂内，并充分混匀(防止产生气泡).立即将此种培养基适量倾人于已灭菌的空平皿内，待其冷却凝固后置冰箱内备用。1. 5 操作步骤1. 5. 1 生活饮用水1.5.1.1 初发酵试验在2个各装有已灭菌50mL三倍浓缩乳糖蛋白陈培养液(1.4.2)的大试管或烧瓶中(内有倒管)内，以元菌操作各加人水样100mL，在10支装有已灭商5mL三倍浓缩乳糖蛋白豚培养液的试管中(内有倒管).以无菌操作各

7、加入水样10mL.混匀后置于37C恒温箱内培养24h。1.5.1.2 平板分离经培养24h后，将产酸产气及只产酸的发酵管，分别接种于品红亚硫酸销培养基或伊红美蓝培养基上.再置于3TC恒温箱内培养1824h.挑选符合下耳目特征的菌落，取菌落的一小部分进行涂片、革兰氏染色、镜检。品红亚硫酸销培养基上的菌落z紫红色，具有金属光泽的菌落。深红色，不带或略带金属光泽的菌落。淡红色，中心色较深的菌落。伊红美蓝培养基上的菌落:深紫黑色，具有金属光泽的菌落。405 紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落。淡紫红色，中心色较深的菌落。.5.3 复发酵试验上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽胞杆菌，则挑取该菌落的另一部

8、分再接种于普通浓度乳糖蛋白陈培养液中(内有倒管).每管可接种分离自同一初发酵管的最典型的菌落13个，然后置于3TC恒温箱中培养24h.有产酸产气者(不论倒管内气体多少皆作为产气论).即证实有总大肠菌群存在。.5.4 根据证实有总大肠菌群存在的阳性管(瓶)数查表1.报告每升水样中的总大肠菌群数。表l总大肠菌群数检数表接种水样总量300mLOOO mL2份.10mL10份)J 100 mL水量的阳性。l 2 管(瓶7数每升7230 ,. 5. 2 水源水.5.2. 将水样作1 10稀释。.5.2.2 于各装有5mL三倍浓缩乳糖蛋白陈培养液(1.4. 2)的5个试管中(内有倒管).各加人10mL 水

9、样;于各装有10时，乳糖蛋白陈培养液(1.4.1)的5个试管中(内有倒管)，各加入1mL水样;于各装有10mL乳糖蛋白陈培养液(1.4.1)的5个试管中(内有倒管)，各加入1mLl I 10稀释水样。共计15管，三个稀稀度。以后的检验步骤同上述生活饮用水的检验方法。.5.2.3 根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数查表2报告每升水祥中的总大肠菌群数。表2总大肠菌群(MPN)检数表(总接种量55.5mL.其中5份10mL水样，5份1mL水样，5份。1mL水样)接种量.mL 每100mL水样中接种量.mL 每100mL在样中10 1 O. 1 总大肠菌群近似数10 1 o. 1 总大肠菌群近似数。2

10、 。4 。1 2 。2 1 6 。2 4 。2 2 7 。3 5 。2 3 9 。4 7 。2 4 11 。5 9 。2 5 13 。2 1 1 。4 。1 I 4 1 1 1 6 。2 6 1 1 2 8 。3 7 1 1 3 10 。4 9 1 l 4 12 。1 5 1 1 1 1 5 14 406 表2(续)接种量，mL 每100mL水样中接种量，mL 每100mL水样中10 1 O. 1 总大肠菌群近似数10 1 O. 1 总大肠菌群近似数。3 。6 2 。5 。3 1 7 2 。l 7 。3 2 9 2 。2 9 。3 3 11 2 。3 12 。3 4 13 2 。4 14 。3

11、 5 15 2 。5 16 。4 。8 2 1 。7 。4 l 9 2 l 1 9 。4 2 11 2 1 2 12 。4 3 13 2 1 3 14 。4 4 15 2 1 4 17 。4 5 17 2 1 5 19 。5 。9 2 2 。9 。5 1 11 2 2 1 12 。5 2 13 2 2 2 14 () 5 3 15 2 2 3 17 。5 4 17 2 2 4 19 。5 5 19 2 2 5 22 。2 2 3 。12 。1 4 2 3 l 14 。2 6 2 3 Z 17 。3 8 2 3 3 20 。4 10 2 3 4 22 。5 12 2 3 5 25 2 。6 2

12、4 。15 2 1 8 2 4 1 17 2 2 10 2 4 . 2 20 2 3 12 2 4 3 23 2 4 15 2 4 4 25 2 5 17 2 4 5 28 3 。8 2 5 。17 3 1 10 2 5 1 20 3 2 12 2 5 2 23 1 3 3 15 2 5 3 26 3 4 17 2 5 4 29 3 5 19 2 5 5 32 L一1 4 。1 1 3 。8 4 1 13 3 。l 1 1 4 2 15 3 。2 13 l 4 3 17 3 。3 16 4 4 19 3 。4 20 4 5 22 3 。5 23 5 。13 3 l 。11 5 1 15 3 1

13、 1 14 5 2 17 3 1 2 17 1 5 3 19 3 1 3 20 1 5 4 22 3 1 4 23 5 5 24 3 1 5 27 407 表2(完)接种量.mL 每100mL水样中接种量.mL 每100mL群水近样似中10 l O. 1 J总大肠菌群近似数10 1 O. 1 总大肠菌数3 2 。14 4 4 。34 3 2 l 17 4 4 l 40 3 2 2 20 4 4 2 47 3 2 3 24 4 4 3 54 3 2 4 27 4 4 4 62 3 2 5 31 4 4 5 69 3 3 。17 4 5 。41 3 3 1 21 4 5 1 48 3 3 2 24

14、 4 5 2 56 3 3 3 28 4 5 3 64 3 3 4 32 4 5 4 72 3 3 5 36 4 5 5 81 3 4 。21 5 。23 3 4 1 24 5 。l 31 3 4 2 28 5 。2 43 3 4 3 32 5 。3 58 3 4 4 36 5 。4 76 3 4 5 40 5 。5 95 3 5 。25 5 1 。33 3 5 1 29 5 l 1 46 3 5 2 32 5 1 2 63 3 5 3 37 5 1 3 84 3 5 4 41 5 1 4 110 3 5 5 45 5 1 5 130 4 。13 5 2 。49 4 。1 17 5 2 l 7

15、0 4 。2 21 5 z 2 94 4 。3 25 5 2 3 120 4 。4 30 5 2 4 150 4 。5 36 5 2 5 180 4 l 。27 5 3 。79 4 l 1 21 5 3 1 110 4 1 2 26 5 3 2 140 4 1 3 31 5 3 3 180 4 l 4 36 5 3 4 210 4 1 5 42 5 3 5 250 4 2 。22 5 4 。130 4 2 1 26 5 4 1 170 4 2 2 32 5 4 2 220 4 2 3 38 5 4 3 280 4 2 4 41 5 4 4 350 4 2 5 50 5 4 5 430 4 3

16、。27 5 5 。240 4 3 l 33 5 5 1 350 4 3 2 39 5 5 2 540 4 3 3 45 5 5 3 920 4 3 4 52 5 5 4 1600 4 3 5 59 5 5 5 1600 408 2 滤膜法2. , 原理滤膜是一种微孔薄膜，孔径。.450. 65m，能滤过大量水样，并将水中含有的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜贴在选择性培养基上，经培养后，直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落，算出每升水样中含有的总大肠菌群数。2.2 适用范围2. 2. , 本法适用于饮用水和水源水，特别是低浊度水样中总大肠菌群数的测定。2.2.2 本法适用于较大量水样的测定。2.

17、2. 3 如检验原水样量过少，可加适量灭菌水稀释使体积加大后再测定。2.3 仪器2. 3. , 滤器。2.3.2 滤膜，孔径。.450. 65m。直径根据滤器规格，目前常用的有3.5cm和4.7cm两种。2. 3. 3 抽滤设备。2. 3. 4 元齿慑子。2.3.5 其他仪器同35.1. 3和36.1. 30 2.4 培养基2.4. , 品红亚硫酸纳培养基2.4. 1. 1 成分蛋白陈10 g 酵母浸膏5 g 牛肉膏5g 乳糖10 g 琼脂1520 g 磷酸氧二惆3.5 g 元水亚硫酸销5 g左右5%碱性晶虹乙醇溶液20mL 蒸馆水1 000 mL 2.4. .2 培养基的制备=培养基的制备方

18、法与1.4.3.2制备法相同。2.4.2 乳糖蛋白陈培养液，同1.4. 1条相同。2.4.3 乳糖蛋白陈半固体培养基2.4.3. 成分蛋白陈10 g 牛肉膏5g 酵母浸膏5g 乳糖10 g 琼脂5g左右蒸偏水1 000 mL 2.4.3.2 制法:将上述成分置于800mL蒸馆水中，加热溶解，调整pH为7.27.4，再用蒸馆水补充至1000mL，过滤分装于小试管中，每管装人的培养基量约为试管容积的三分之一，115C灭菌20min , 冷却后置于冰箱内保存，以不超过两周为宜.此培养基制成后，需用已知大肠菌群菌株进行鉴定，应在68h产生明显气泡。2.5 操作步骤2. 5. 1 准备工作409 2.5

19、.1.1 滤膜灭菌z将滤膜放人烧杯中，加入蒸馆水，置于沸水浴中煮沸灭菌三次，每次15min。前两次煮沸后需更换水洗涤23次，以除去残留溶剂。2.5.1.2 滤器灭菌:用点燃的酒精棉球，火焰灭菌。也可用121C灭菌20min , 2.5.2 过滤水祥2.5.2.1 用无菌银子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴放已灭菌的滤床上，稳妥地固定好滤器，将333mL水样(如水样含菌数较多，可减少过滤水样量)注入滤器中，加盖，打开滤器阀门，在负O.5 大气压下抽滤。2.5.2.2 水样滤完后，再抽气约5s.关上滤器阀门，取下滤器，用灭商银子夹取滤膜边缘部分，移放在品红亚硫酸销培养基(2.4.1)上，滤膜

20、截留细茵茵向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将平皿倒置，放入3TC恒温箱内培养2224h , 2.6 观察结果2.6.1 挑选符合下列特征菌落进行革兰氏染色、镜检。紫红色，具有金属光泽的菌落g深红色，不带或略带金属光泽的菌落s淡红色，中心色较深的菌落。2.6.1.1 凡系革兰氏染色阴性无芽胞杆菌，再接种乳糖蛋白陈培养液(2.4.2)或乳糖蛋白陈半固体培养基(2.4.3)(接种前应将此培养基放入水浴中煮沸排气，冷却凝固后方能使用).经37C培养，前者于24 h产酸产气者;或后者经68h培养后产气者，则判定为总大肠菌群阳性。2.6.1.2 1 L水样中总大肠菌群数等于滤膜上生长

21、的大肠菌群菌落总数乘以3， 110 水质粪大肠(多管发酵技术方法滤膜法)(摘自GB/T5750-1985) 粪大肠菌群的基本性状与总大肠菌群相似，而且是总大肠菌群的一部分，为了区别存在于自然环境中的大肠菌群细菌和存在于温血动物肠道内的大肠菌群细菌，可将培养温度提高到44.SC .在此种条件下仍能生长并发酵乳糖产酸产气的，则称为粪大肠菌群(fecalcoliform)。粪大肠菌群的测定可以用多管发酵技术或滤膜技术。1 多雷发酵技术提高培养的温度，可以将大肠杆菌分为温血动物的粪便中所存在的大肠杆菌及环境中其它来源的大肠杆菌。1. 1 培养基1. 1. 1 乳糖蛋白陈培养液蛋白陈牛肉浸膏乳糖氯化例1

22、0 g gogee qu民d民d1.6%澳甲自由紫乙醇溶液蒸馆水1 mL 1000 mL 将蛋白陈、牛肉浸膏、乳糖、氯化纳加热溶解于1000mL蒸馆水中，调节pH为7.2-7.4.再加入1.6%澳甲盼紫乙醇溶液1mL.充分混均，分装于试管中，于高压蒸气灭菌器中，在llSC灭菌20min , 贮存于暗处备用。此培养基适用于检验大肠菌群时作发酵试验之用.根据实际需要，也可按上述配方比例配成二倍、三倍或五倍浓缩的乳糖蛋白陈培养液。1.1.2 EC培养液腆陈20 g 乳糖Sg 胆盐一号1. S g 磷酸氧二御(K，HPO，)4g 磷酸二氧御(KH，PO，)1. 5 g 氯化纳5 g 蒸馆水1000 m

23、L 将上述成分加热溶解，然后分装于试管中.置高压蒸气灭菌器中，121C灭茵15min。灭菌后pH应为6.90 1. 2 操作步骤1. 2. 1 水样接种量:将水样充分混匀后，根据水样污染的程度确定水样接种晕目每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水样量要有五管。相对未受污染的水样接种量为10mL.1 mL , O.l mL。受污染水样接种量根据污染程度接种1mL , 0.1 mL ,O. 01 mL或0.1mL ,O. 01 mL.O. 001 mL等(见表1)。411 如接种体积为10mL.则试管内应装有三倍浓度乳糖蛋白陈培养液5mL;如接种量为1mL或少于1 mL，则可接种于普通浓度

24、的乳糖蛋白质陈培养液10mL中。.2.2 初发酵试验:将水样分别接种到盛有乳糖蛋白陈培养液的发酵管中。在3TC士0.5C下培养24h士2h，产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性。,. 2. 3 复发酵试验z轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管，用3mm接种环或灭菌棒将培养物转接到tlEC培养液中。在44C士0.5C水浴下培养24h土2h，培养后立即观察。发酵管产气表明确信试验阳性。.2.4 计算和报告结果z根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目，从总大肠菌群数测定方法中的总大肠菌群(MPN)检数表中查得相应的MPN指数，按总大肠菌群的计算方法

25、计算每升水中粪大肠菌群细菌的MPN值。2 滤腹法同总大肠菌群一样，粪大肠菌群的密度也可用滤膜技术来测定。如果这种滤膜技术是用于检验加氯消毒后的水样时，在使用这个技术之前，应先做实验，证实它所得的数据资料与多管发酵试验所得的数据资料具有可比性。2. , 培养基M-FC培养基腕陈蛋白陈酵母浸膏氯化纳乳糖胆盐三号10 g 5 g 3.0 g 5.0 g 12.5 g 1. 5g 1%苯胶蓝水溶液10 mL 1%玫瑰色酸溶液(溶于O.2mol!L 10 mL 氮氧化纳溶液中)蒸馆水1000 mL 将上述培养基中的成分(除苯胶蓝和玫瑰色酸外).置于蒸馆水中加热溶解，调节pH为7.4.分装于小烧瓶内，每瓶

26、100mL.于121C灭菌15min，贮于冰箱中备用。临用前，按上述配方比例，用灭菌吸管分别加入煮沸灭菌的1%苯胶蓝溶液1mL及新配制的1%玫瑰色酸溶液(溶于0.2mol/L氢氧化纳溶液中)1mL，混合均匀。加热溶解前，加入1.2%1. 5%琼脂可制成固体培养基。如培养物中杂菌不多，则培养基中不加玫瑰色酸亦可。2.2 操作步骤2.2. , 水样过滤2.2. 水样量的选择z水样量的选择根据细菌受检验的特征和水祥中预测的细菌密度而定。理想的水祥体积是在一片滤膜上生长2080个粪大肠菌群菌落，而总菌落数不越过200，使用的水样量参考表1，2.2. .2 水样的过滤z按总大肠菌群滤膜法水样过滤的步骤和

27、注意事项进行过滤。2.2.2 培养使用M-FC培养基。培养基含或不含琼脂，不含琼脂的培养基使用无菌吸收垫.将滤过水样的滤膜置于琼脂或吸收垫表面，将培养皿紧密盖好后，放入塑料袋或容器内，漫漫在44C士O.5C恒温水浴中，经24h土2h培养。412 表1接种用水量参考表接种量.mL 水样种类检测方法100 50 10 1 O. 1 10 -2 10- 3 10-4 10- 5 较清洁的湖水、滤膜法 井在多管发酵法 一般的江水、滤膜法 河水、塘水多管发酵法 城市内的河水、滤膜法 湖水、塘水多管发醇法 城市原污水滤膜法 多管发回事法 2.2.3 计算及报告结果粪大肠菌群菌落在M-FC培养基上呈蓝色或蓝

28、绿色，其他非粪大肠菌群菌落呈灰色、淡黄色或无色。正常情况下，由于温度和玫瑰酸盐试剂的选择性作用，在M-FC培养基上很少见到非粪大肠菌菌落。计数呈蓝或蓝绿色的菌落，每lL水样中的粪大肠菌群数按式。)计算:一滤膜上计数的粪大肠菌群数X1000 粪大肠菌群菌落数/L一.( 1 ) 滤过的样品量(mL) 413 水质细菌总数的测定平板法(摘自GB/T5750-1985) 细茵总数是指1mL水样在营养琼脂培养基中，于37C经24h培养后，所生长的细茵茵落的总数。1 原理每种细菌都有它一定的生理特性，培养时应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质)去满足其要求，才能分别将各种细菌

29、培养出来。在实际工作中，不可能做到。一般是根据测定要求而采用常用方法进行细菌总数的测定，所测定的结果，只包括在所使用的条件下生长的细菌总数。2 适用范围2. 1 本法适用于测定饮用水和水源水中的细菌J总数。2.2 所测定的细菌总数增多说明水被生活废弃物污染，但不能说明污染的来源。因此必须结合总大肠菌群数来判断水污染的来源和安全程度。3 仪器3. 1 高压蒸汽灭菌器。3. 2 干热灭菌箱。3. 3 恒温箱。3.4 冰箱。3.5 放大镜。3.6 试管、平皿(直径9cm)、刻度吸管等，置于干热灭菌箱中160C灭菌2h。4 培养基4. 1 成分蛋白陈牛肉膏氯化销琼脂10日3g 5g 1020 g 蒸馆

30、水1000 mL 4.2 制法:将上述成分混合后，加热溶解，调整pH为7.47. 6.过滤，分装于玻璃容器中，经121C灭菌20min，储存于冷暗处备用。5 操作步骤5. 1 生活饮用水5. 1. 1 以元菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15mL巳融化并冷却到45C左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。414 5. 1. 2 待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于37C恒温箱内培养24h，进行菌落计数，即为水样1 mL中的细菌总数。5. 2 水源水5. 2.

31、 1 以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样，注入盛有9mL灭菌水的试管中，混匀成1: 10稀释液。5.2.2 吸取1: 10的稀释液1mL注入盛有9mL灭茵水的试管中，混匀成1: 100稀释液。按同法依次稀释成1: 1000、1: 1 0000稀释液等备用。吸取不同浓度的稀释液时必须更换吸管。5.2.3 用灭菌吸管取23个适宜浓度的稀释液1mL，分别注入灭菌平皿内。以下操作同生活饮用水的检验步骤。6 菌落计鼓及报告方法作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时，若其中一个平皿

32、有较大片状菌落生产时，则不宜采用，而应以无片状菌落生产的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。7 各种不同情况的计算方法7. 1 首先选择平均菌落数在30300之间者进行计算，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告之(见表1例。7.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30300之间，则应按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2应报告两者的平均数，若大于2则报告其中较小的菌落总数(见表1例2及例3)。7.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于

33、300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表I例4)。7.4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表l例5)。7.5 者所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表1例6)。7.6 菌落计数的报告=菌落数在100以内时按实有数报告，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示(见表l报告方式栏)。在报告菌落数为无法计数时，应注明水样的稀释倍数。表1稀释度选择及菌落总数报告方式不同稀鼻度的平均菌落数两个稀释度菌菌落总数报告方式例次落数之比个/mL个/mL10- 10-2 10-3 1 1 365 164 20 16400 16000或1.6X102 2 760 295 46 1. 6 37750 380或3.8XIO3 2 890 271 60 2. 2 27100 27000或2.7X104 无法计数1 650 513 51300 510000或5.1X10气 27 11 5 270 270或2.7XIO6 无法计数305 12 30500 31 000或3.IXIO415