CJ T 149-2001 城市供水 亚硫酸盐还原厌氧菌(梭状芽胞杆菌)孢子的测定.pdf

1、C.J 中华人民共和国城镇建设行业标准CJ/T 141 150-2001 城市供水水质检验方法标准及编制说明和研究报告2001-07-17发布200112-01实施中华人民共和国建设部发布目录一、城市供水水质检验方法标准前言.3 CJ/T 141一2001城市供水二氧化硅的测定硅铝蓝分光光度法CJ/T 142-2001城市供水锦的测定.8 1.石墨炉原子吸收分光光度法.9 2.原子荧光法.10 CJ/T 143-2001城市供水铀、镜、钙的测定离子色谱法CJ/T 144-2001城市供水有机磷农药的测定气相色谱法”山CJ/T 145-2001 城市供水挥发性有机物的测定.，.川1.气液平衡气相

2、色谱法.,. . 2.吹扫捕集与色谱质谱联用怯中，CJ/T 146-2001城市供水酣类化合物的测定液相色谱禧.11 .“. 32 CJ/T 147-2001城市供水多环芳怪的测定被相色谱法.38 CJ/T 148一2001城市供水粪性链球菌的测定.451.发酵法.46 2.滤膜法.48 CJ/T 149-2001 城市供水亚硫酸盐还原厌氧菌（梭状芽胞杆菌）抱子的测定.51 1.液体培养基增菌法2.滤膜法.CJ/T 150-2001 城市供水致突变物的测定鼠伤寒沙门氏菌哺乳动物微粒体酶试验58二、城市供水水质检验方法标准编制说明和研究报告前言.城市供水二氧化硅的测定硅铝蓝分光光度法编制说明和研

3、究报告城市供水锦的测定编制说明和研究报告.78 城市供水纳、镜、钙的测定离子色谱法编制说明和研究报告.88 城市供水有机磷农药的测定气相色谱法编制说明和研究报告.94 城市供水挥发性有机物的测定编制说明和研究报告.105 城市供水酣类化合物的测定液相色谱法编制说明和研究报告.124 城市供水多环芳煌的测定被相色谱法编制说明和研究报告.137 城市供水粪性链球菌的测定编制说明和研究报告.153 城市供水亚硫酸盐还原庆氧菌抱子的测定编制说明和研究报告.157 城市供水致突变物的测定鼠伤寒沙门氏菌哺乳动物微粒体酶试验编制说明和研究报告.160 参考文献.168 一、城市供水水质检验方法标准Stand

4、ard methods for the examination of water of urban water supply CJ/T 141 150-2001 前去一口为使城市供水行业适应我国国民经济可持续发展的要求，改善我国城市的投资环境，建设部于1993年编写并出版了“城市供水行业2000年技术进步发展规划”（以下简称“规划勺。根据“规划”中水质目标的要求，一类水司（日供水能力在100万m3以上的供水企业）检测能力应达到89项，比现行国家生活饮用水标准（GB5749 1985）增加了54项。经核查，增加项目中的23项可参照现有国家其他相关标准方法进行检测，但尚有31个项目需要补充制定新的

5、检验方法标准。为此，于1997年4月17日经建设部建标【199781号文批准建标，制定本标准。本标准共含10个标准，14个检验方法，31个项目。元机类5项：二氧化硅、锦、铀、钙、楼。有机类23项z5种挥发性有机物：1.1二氯乙烯、l,1,1三氯乙烧、1,1, 2三氯乙皖、三澳甲烧、1,1, 2 .2四氯乙烧；7种多环芳怪：荼、荧惠、苯并（b）荧惠、苯并（k）荧葱、苯并（a）苗、苯并（ghi)i架、苟并(1,2, 3-c ,cl）蓝；6种酣类：苯酣、4硝基酣、3甲基酣、2,4二氯酣、2,4,6三氯酣、五氯酣；5种有机磷农药z敌百虫、敌敌畏、乐果、对硫磷、甲基对硫磷。微生物类2项：粪性链球菌、亚硫

6、酸盐还原厌氧菌。毒理试验1项：鼠伤寒沙门氏菌哺乳动物微粒体酶致突变试验（Ames试验）。本标准是对“规划”中新增水质项目中国内现有相关标准尚未涵盖的项目或方法的补充。本标准在考虑到近年来我国一类水司和部分二类水司（日供水能力在50万m3以上的供水企业）在检测装备和人员素质上的长足发展，他们有实力和能力在检测工作上逐步与国际接轨的现实情况，采用了国际上一些较前卫的检验方法和先进的检测设备，比如z用离子色谱法检测水中铀、钙、楼；采用了吹扫捕集气相色谱质谱联机等大型精密设备检测水中挥发性有机物；还将毒理学Ames试验做为对水质的评价方法。本标准在采用国际上通用检验方法的同时，在某些方面还有一些创新z

7、比如在有机磷农药和多环芳娃前处理程序中，采用了固相富集提取法，用原子荧光法测定水中锦，这些在国际上也是先进的。因此本标准有较多的科技含量，能与国际水平接轨。本标准在编制中也考虑到各供水企业在检测装备和人员水平上的差异，尽可能为同一项目提供多种方法，有繁有简，供使用者选择。比如挥发性有机物的测定，既可以采用经典的气液平衡哼气相色谱法，也可采用具有国际水平的吹扫捕集气相色谱质谱法。对水中钙、镜离子的测定，现有国家标准中已有了常规的EDTA滴定法和原子吸收分光光度法，本标准提供了具有国际水平的离子色谱法。本标准主办单位：建设部标准定额司、建设部城建司。承办单位：中国城镇供水协会。主编：刘志琪、宁瑞珠

8、、岳舜琳、许树礼、吴玲玲、陈国光、樊康平。主审：肖绍雍、宋仁元、沈大年。起草单位有国家城市供水水质监测网北京、天津、上海、武汉、广州、济南、昆明、成都、深圳等9个监测站，其中上海监测站为组长单位，北京、天津监测站为副组长单位。参加标准验证单位有z国家城市供水水质监测网重庆、南京、南昌、福州、合肥、厦门等监测站及珠海、顺德省级监测站。参加本标准起草及复验人员：3 CJ/T 141 150-2001 冯复来、董瑞圣、张立尖、向华、陆峰、钱静汝、祝敏捷、童俊、刘娟喜、喊道德、冯菊丽、洪华成、王近、蒋增辉、王秀丽、孟莉莉、张旭东、吕宝和、王义芬、李捕、孙海龄、李桂香、秦晶、姚刚、马越、吴玲、徐广志、林

9、爱武、徐素梅、裴琴英、张建华、崔建华、王丹、杜兵、刘静、黄春、罗亮、徐欣、委聪妹、金红、王锦城、陈宛华、吴贤芬、黄媚、李丽萍、梁志坚、林朝晖、潘健芬、杨雪清、卢益新、宣卫、林细萍、宗祖胜、张德明、阮远彪、陶涛、贾瑞宝、刘传明、刘德珍、吴华双、李劲松、刘辆、张红雨、陶晓武、黄秀华、孙郁莉、张杰、辜强、陈桂珍、鲍洁、冯健、谷颖江、吴立群、吴菊慧、胡鸿雁、黄照兰、邬家样、商文新、李朝辉、叶劲、祝大立、黄静、余定学、周皖云、高云霞、肖萌、贺晓芮、王欣、沈震、李频、田明、朱熔钢、李华伟、张珊、李洪波、张霞、夏冰阳、周艳、沈奕、王玉敏、胡建伟、周晓珍、赵卓君、柯天将、林群、高和气、丁成兰、杨所龚、李康、林

10、玉琴、叶振福、陆洋、杨琳、章春星、杨芬芳、陈灵、王纪阳、赖长生、陈日祥、向红、吴文辉、赖玲扬、赵献玲、胡克武、冯兆敏。4 本标准自2001年12月1日起实施。本标准适用于城市供水及其水源水的测定。本标准委托中国城镇供水协会负责解释。CJ /T 149-2001 前主口本标准由建设部标准定额研究所提出。本标准由建设部给水排水产品标准化技术委员会归口。本标准由国家城市供水水质监测网广州监测站负责起草。本标准起草人z林朝晖。本标准参加验证单位：北京监测站、上海监测站、天津监测站、深圳监测站、成都监测站及顺德监测站（省级）。51 中华人民共和国城镇建设行业标准城市供水亚硫酸盐还原厌氧菌（梭状芽胞杆菌）

11、抱子的测定Urban water supply-Determination of the spores of sulfite-reducing anaerobes (clostridia) 1.液体培养基增菌法1. Method by enrichment in liquid medium 1 范围。T149-2001 本标准规定了用液体培养基增菌法测定城市供水及水掠水中亚硫酸盐还原厌氧细菌抱子。本标准适用于城市供水及水源水中亚硫酸盐还原厌氧细菌抱子的测定。2 方法取一定体积的水样。首先用加热法选择水样中的抱子，加热时间应足以杀死营养型细菌。将水样接种于培养液中，然后于371厌氧培养44h土4

12、h。由于亚硫酸盐还原厌氧细菌能把培养液中的亚硫酸盐还原为硫化铁门）是黑色沉淀，则培养液变黑为阳性。3 试剂和材料3. 1 单一强度的基本培养基3. 1. 1 成分蛋白陈10 g 牛肉膏10 g 酵母浸膏1. 5 g 淀粉1 g 乙酸销（含水）5 g L半肮氨酸盐酸盐0. 5 g 葡萄糖1 g 蒸锢水1 000 mL 3. 1. 2 制法将蛋白陈、牛肉膏、乙酸铀和酵母浸膏混合于800mL水中。用200mL蒸榴水制备淀粉液，步骤如下：把淀粉置于少量的冷水中调成浆糊状。把剩下的水加热至沸，在搅拌中慢慢倒入浆糊状淀粉中。将此淀粉液与前述800mL混合液混合，加热至沸，使全部榕解。申华人民共和国建设部2

13、001辐07-17批准2001-12-01实施52 CJ/T 149-2001 最后再加入葡萄糖和L半胧氨酸盐酸盐，使其溶解。用NaOH(lmol/L)榕液调pH值至7,11.2，分装10mL培养基溶液到25mL带盖螺口玻璃瓶中，冷却后，拧紧瓶盖。1211高压灭菌15min。3.2 双强度基本培养基制备双强度基本培养基的过程与单一强度的基本培养基（3.1）同，但水的体积要减少一半。将10 mL或50mL双强度培养基溶液分别将在25mL或100mL螺口瓶中，121士1高压下灭菌15 min。3. 3 亚硫酸铀（Na2S03）溶液4g无水亚硫酸钢搭于100mL水中，用O.2 m搪膜过滤除菌。保存温

14、度25。保存期14天。3. 4 拧攘酸铁CCsHs01Fe）溶液7 g拧撵酸铁榕于100mL水中，用O.2 m滤膜过滤除菌。保存温度zc5。保存期14天。3. 5 完全培养基3. 5. 1 分析时，将等体积的亚硫酸铀溶液（3.3）和拧攘酸铁溶液（3.4）混合。3. 5.2 在每瓶单一强度培养基中各加入o.5 mL的棍合溶液（3.5, 1)，此培养基应重新在沸水水洛上加热15min并冷却。3, 5. 3 在每瓶10mL的双强度培养基中各加入0.4mL的混合溶液（3.5. 1) ,50 mL的双强度培养基中各加入2mL的棍合溶液，此培养基也应重新在沸水水浴上加热15min并冷却。4 仪器4.1 1

15、00 mL和25mL螺口带盖玻璃瓶。4. 2 50 mL,100 mL、10mL和1mL移液管。4,3 恒温水浴锅。4.4 试管(150mm 13 mm）。4.5 接种环。4.6 恒温培养箱（保持温度37士1）。4. 7 细菌过撞器。5 测定步骤5. 1 抱子的选择水样在试验前须放置于75土5水浴锅中，加热15min ，用同样带盖螺口瓶子作空白，检查加热温度。5.2 接种与培养将50mL水样置于含50mL双强度完全培养基（3.5.3）的100mL螺口瓶中。向5个含有10mL双强度完全培养基（3.5, 3）的25mL螺口瓶中，加入10mL水样。向5个含有10mL单一强度完全培养基（3.5.2）的

16、25mL螺口瓶中，加入1mL水样。如果有必要，可向5个含有10mL单一强度完全培养基（3.5, 2）的25mL螺口瓶中分别加入1mL 稀释度为110倍的水样稀释液。为定性检验100mL水样而无需进行最可能数CMPN）计算时，可向含有100mL双强度完全培养基（3.5. 3）的200mL螺口瓶中加入100mL水样。53 CJ/T 149-2001 如有必要，可将单一强度完全培养基加至瓶颈处，以保证瓶中残留极少量的空气。拧紧瓶盖，将瓶密封，于无氧条件下培养。在37土l培养44h4 h。注意：由于培养中可产生气体在密封的大体积玻璃容器中培养时可能发生爆炸，应选用较坚固的玻璃容器。在接种前，将烧红的铁

17、丝置于瓶内培养基中密封，可有助于厌氧培养。5. 3 观察结果瓶子内部变黑为阳性。6 计鼓及报告结果根据试验阳性的瓶数，查MPN表（见表l和表2），即可得100mL 11180 1 2 。5 54 CJ/T 149一2001表2亚硫酸盐还原厌氧细菌抱子最可能数（MPN）检数表（总接种量55.5 mL，其中5份10mL水样、5份1mL水样、5份0.1mL水样）接种量，mLMPN 接种量，mL10 1 0.1 （每100mL) 10 1 o. 1 。1 800 55 CJ/T 149-2001 2 方法取一定体积的水样。首先用加热法选择水样中的抱子，加热时间应足以杀死营养型细菌。把水样通过撼膜过撼，

18、使细菌抱于截留于膜上。将滤膜置于专用的选择性培养基（亚硫酸盐铁琼脂）上，于371厌氧培养20h土4h及44h4 h，计数黑色菌落。3 试剂和材料3. 1 亚硫酸盐铁琼脂3. 1. 1 基本培养基3.1.1.1 成分牛肉膏3 g 蛋白陈10 g 氧化铀5 g 琼脂15 g 蒸锢水1 000 mL 3.1.1-2 制法把上述各成分，在水浴中加热至搭解，再以蒸锢水补足至1L，用1mol/L的氢氧化铀溶液调pH值至7.60. 1 ，然后每一试管中注入18mL培养基，121土l高压灭菌20min。凝固后保存于冰箱中。3. 1. 2 元水亚硫酸铀（Na2S03）榕液：10g元水亚硫酸铀溶于100mL水中用

19、O.2 m滤膜过滤灭菌。保存温度25。保存期14天。3. 1. 3 硫酸亚铁（FeS04）溶液：8g晶体硫酸亚铁潜于100mL水中，用O.2 m滤膜过滤灭菌。保存温度25。保存期14天。3. 1. 4 完全培养基在基本培养基（3.1. 1)使用前，先将其融化，然后向含有18mL基本培养基的试管中注入1mL Na2S03溶液（3.1. 2）和5滴8%硫酸亚铁榕液（3.1. 3）。3. 2替代培养基膜蛋白沂亚硫酸盐琼脂培养基3. 2. 1 成分膜蛋白月，f,(Tryptose)大豆蛋白陈（Soytone)酵母浸膏焦亚硫酸饷（Na2S20s)拧攘酸铁镀（Fe3+)琼脂蒸锢水3. 2. 2 制法上述成

20、分置于约900mL蒸馆中在水浴中加热至榕解，再以蒸锢水补足至1L，在25时用1 mol/L的氢氧化饷榕液调pH值至7.6土o.1，然后注入试管中，每管培养基18mL,121土l高压灭15 g gbubgbgb EUFO咱i15 g 1 000 mL 菌15min.4 C5保存，保存期为两星期。4 仪器4. 1 三角瓶（2L) 4.2 试管(160mm 16 mm) 4.3 移被管(IOmL) 56 4.4 烧杯(1L) 4.5 水浴锅4.6 抽滤设备4. 7 元齿慑子4.a 滤膜（孔径o.2 m) 4.9 培养箱（保持温度371）4. 10 培养皿4. 11 滤膜过滤器5 测定步骤5. 1 滤

21、膜灭菌CJ/T 149-2001 将滤膜放入烧杯中，加入蒸锢水，置于沸水活中煮沸灭菌三次，每次15min。前两次煮沸后需要更换水洗涤23次，以除去残留溶剂。5.2 掠器灭菌，视滤器质地采用于热（酒精棉球火焰）或湿热灭菌。5.3 抱子的选择水样在试验前须放置于水浴锅中，75C5加热15min。用同样的水样瓶作空白，用温度计检查加热温度。5,4 接种与培养水样的过滤量要适当：对于饮用水、泉水、井水、海水、地面水和梭状芽抱杆菌轻度污染的水，取100 mL过滤；对污染严重的水或废水，可用元菌水稀释后检测。调配一定的稀释度，使在滤膜上生长的黑色菌落分离，而更易于计数。水样过据后，用元菌慑子将滤膜过滤面朝下，置于培养皿中，同时使滤膜下元气泡。小心地将18mL 约50的完全培养基（3.1.4）或替代培养基（3.2）倾注于培养皿中的膜上。在形成培养基层后，371厌氧培养20h土4h和44h4 h。如果使用厌氧瓶或厌氧培养箱，捕膜可放置在琼脂面上，且滤膜面向上。5. 5 观察结果培养20h4 h和44h土4h后，计数所有黑色菌落。6 分析结果的表述试验报告应说明所使用的方法，单位体积水样中亚硫酸盐还原厌氧细菌培养44h土4h的抱子数；抱子数太多，黑色菌落连在一起而难以计数，可采用20h土4h培养时间的抱子大约数目。结果以CFU/100 mL it。57