GB T 12399-1996 食品中硒的测定.pdf

1、中华人民共和国国家标准食品中晒的测定Determination of selenium in foods 1 范围丰标准规定了用荧光法和氢化物原子荧光光谱法测定食品中晒的方法。本标准jJ!用于各类食品中陋的测定。第一篇荧光法（第一法）2 原理GB/T 12399 1996 代替Gil12399 90 祥品经混合般消化后，晒lt合物被氧化为四价元机晒（Se），与2,3二氨基茶（2,3 diaminonaph thalene.简称DAN）反应生成4.5苯并主晒脑（4, 5-benzo piaselenol），其荧光强度与晒的浓度在定条件干成1f比。用环己烧萃取后于激发光波民376nm，发射光1伏5

2、20日m处测定荧光强度，与绘制的标准f曲线比较定址。本方法检出限为3ng。3试剂3, 1 环己烧。3. 2硝酸。3. 3过；4酸。3. 4 盐酸。3. 5 氢澳酸。3. 6 ( 1十9）盐酸溶液z取10时，盐酸，加90mL水。3.7 0 1111. 3.15 EIYl,i合液，取o.2 11101/L的El)T,(3.9）和10%盐酸窍胶（3. IO）液各50mL，混匀，再加:, 1111.门，lI l的ift.旧水桥11主lL, 4 仪器和设备4. 1 7：段雪白月1设备E4. 2 荧光分光光度计。5 分析步骤5. 1 样品处理及消化5. 1. 1 粮食：样品用水洗三次，于60（烘干，用不锈

3、钢磨磨成粉，储于塑料瓶内，放一小包律脑精盖紧益保f.备用。5. 1.2 蔬菜及其他植物性食物2取可食部分用水冲洗三次后用纱布吸去水滴，用不锈钢刀切碎，取混合均匀的样品60 （烘干，称茧，粉碎，备用。5. 1. 3 1中取o.5 2. 0 g样品（含晒量。.01 o. 5 g）于磨口三角瓶内，加10ml.(5+95）去晒硫酸，样品1日润后，再加20mL 混合酸液放背过夜。次日于IY、浴上逐渐加热，当激烈反应发生后（溶液变无色），然绘加热京产生自烟，溶液逐渐变成淡黄色即达终点。某些蔬菜样品消化后常出现浑浊，难以确定终点，！好以咬细心现察。还有含晒较高的蔬菜含有较多的Se忡，需要在消化达到终点时冷却

4、后加10m,( + 们让自主继续加热使Se1还原成Se ，按上述方法确定终点。5. 2 测定l作品消化液中bn20 ml.tDT ，混合液用氨水（！+ ）或盐酸调至淡红橙色（pH!.5 2. 0）。以下1t WKtnfi在进行：加3mLDAN试剂，混匀佳沸水浴中煮5min，取出立即冷却，加3mL环己烧，振摇-lrnin.将全illli在i在移入分液漏斗，待分层后弃去水层，环己烧层转入带盖试管中，小心勿使环己烧中混入水滴.f激发光波长376nm.发射光波长520nm处测定萃晒脑的荧光强度。5.3 晒标准曲线绘制z准确吸取晒标准使用液。，0.2,1. 0,2. 0及4.o mL，加水至5ml，按样

5、品测定步骤J,;jllt进行。硝含量在0.5问以下时荧光强度与恼含量呈线性关系，在常规测定样品时，每次需做试剂啊！1与样品晒含量相近的标准管（双份）即可。6 结果6. 1 Jtfl B-B C-A X ( I ) 式小X样品中晒含量，g/g;. 1 标准管荧光读数sR 空白管荧光读数：（、一样品管荧光i主数，, GB/T 12399 1996 In，一一标准管中辆质量，问：111, 试样质量.g 0 6. 2 结果的允许差问9；验宣平行测定或重复测定结果相对偏差绝对值10%。第二篇氢化物原子荧光光谱法（第二法）7 原理样品经酸加热消化后，在6mol/L盐酸（HCl）介质中，将样品中的六价晒还原

6、成四价晒，用棚氧化纳NaBH,l或棚氢化饵（KBH，）作还原剂，将囚价砸在盐酸介质中还原成硝化氢（SeH，），由载气（氧气）带入原子化器中进行原子化，在晒特制空心阴极灯照射下，基态晒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与晒含量成正比。与标准系列比较定量。8试制本方法中，除特殊规定外，所用试剂为分析纯，试验用水为蒸馆水或同等纯度水。8. 1 硝酸（优级纯）。8.2 高氯酸（优级纯）。8.3盐酸（优级纯）。B.4 混合酸2硝酸十高氯酸（4+1）混合酸。8. 5 氢氧化纳（优级纯）。8. 6珊氢化纳溶液（8g/l，）称取8.0 g砌氢化纳（NaBH，），溶于氢氧化

7、销溶液（5g/L）中，然后定容至1 000 mLo 8. 7 铁氟化御（100g/L），称取10.0 g铁氟化御K,Fe(CN），），溶于100mL蒸饱水中，混匀。8.8 晒标准储备液z精确称取100.0 mg晒（光谱纯），溶于少量硝酸中，加2mL高氯酸，置沸水浴中加热34h，冷却后再加8.4 mL盐酸，再置沸水浴中煮2min，准确稀释至1000 mL，其盐酸浓度为0. 1 mol/I，此储备液浓度为每毫升相当于100吨晒。8. 9晒标准应用液z取100问mL嗣标准储备液1.0 mL，定容至100mL，此应用液浓度为1问ml，。9仪器9. 1 AFS-210双道原子荧光光度计或同类仪器。9.

8、2 电热板。9. 3 自动控温消化炉。10分析步骤1 o. 1 样品处理及消化1 o. 1. 1 粮食：样品用水洗三次，子60烘干，用不锈钢磨粉碎，储于塑料瓶内，备用。1 o. 1. 2 蔬菜及其他植物性食物z取可食部用水洗净后用纱布吸去水滴，打成匀浆后备用。1 o. 1. 3 称取0.5 2. 0 g样品于150mL高筒烧杯内，加10.0 mL混合酸及几粒玻璃珠，盖上表面皿冷消化过夜。次日于电热板上加热并及时补加混酸。当溶液变为清亮无色并伴有臼烟时，再继续加热1剩余体积2ml，左右，切不可蒸子。冷却，再加5mL 6 mol/L盐酸，继续加热至溶液变为清亮无色并i！音白烟出现，以完全将六价晒还

9、原成囚价稽。冷却，转移定容至50mL容量瓶中。同时做空白试验。1 o. 1. 4 吸取10ml，样品消化液于15mL离心管中，加浓盐酸2mL，铁氟化饵溶液1mL，混匀待测。10.2 标准曲线的配制z分别取0.0,0.1,0. 2,0. 3,0. 4,0. 5 mL标准应用液于15ml，离心管中，用去南321 GB/T 123 9 9 199 6 r ;J；主手ff10 nd，再分别加浓盐酸2ml，铁氨化饵lmL，混匀，制成标准工作曲线。1 o. 3 测定1 o. 3. 1 fX. :i参号条件负高压340v灯电流：100mA；原子化温度800c；炉高，gmm，载气流速SOU rnL/min，屏

10、蔽气流速：I000 nrl,/min；测量方式标准曲线法；读数方式z峰面积；延迟时间：1的读数时间：15,)J日液时间8问进样体积，2 ml, 0 1 o. 3. 2 测定：根据实验情况任选以F一种方法。10.3.2.1 浓度测定方式测量设定好仪器最佳条件，逐步将炉温升至所需温度后，稳定1020min后Jf fi测址。连续用标准系列的苓管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。转入样品iNJ咕分别测定样品空白相样品消化液，每测不同的样品前都应清洗进样器。样品测定结果按以下公式i I ll , 10. 3. 2. 2 仪器臼动计算结果厅式测量：设定好仪器最佳条件，在样品参数画面，输

11、入以下参数样品质！此以此111I.) .稀梓体积（时，），并选择结果的浓度单位。逐步将炉温升至所需温度后，稳定1020min 1, ; j好ii川I,i: 0连续用标准系列的苓管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。在转入If川，l1!1Jii：之前.j!进入空白值测量状态，用样品空白消化液进样，让仪器取其均值作为扣底的空白值。随, -j lill 11J j( i；测定佯品。i！rJ定完毕后，选择“打印报告”即可将测定结果自动打印。10. 4 ，；骂：1 o. 4. 1 ii). X一（C- Col V 1 000 m 1 000 1 000 式中：X一一样品中晒的含量，mg

12、/kg（或mg/L)1 ( . 样品消化液测定浓度，ng/mL;(, 样品空白消化液测定浓度，ng/m,;Ill 样品质量（体积），以mL);v 样品消化液总体积，mL10.4.2 本标准检出限仪器检出限为0.5 ng/mL。标准曲线线性范围。400ng/mL。们去11收率：标准粉85.7% 102. 3%；奶粉88.8% 101. 2%。标准参比物质控结果：标准物测定次数归）测定值( 2 ) 茶叶(C;B W08 505) 摘月1(GB Wos 551) 特1对标准偏差：RS!l二2.6%(11二12)巧，号d0.044 0. 931 标准值0. 041士0.0100. 9400. 050 C22