GB T 22492-2008 大豆肽粉.pdf

1、ICS 67.060 X 11 中华人民共和国国家标准G/T 22492-2008 粉肤一旦大Soy peptides powder 2009-01-01实施2008-11-04发布发布中华人民共和国国家质量监督检验检夜总局中国国家标准化管理委员会本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标准由国家粮食局提出。剧吕本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。GB/T 22492-2008 本标准起草单位z武汉工业学院、武汉天天好生物制品有限公司、临沂山松生物制品有限公司、临沂出入境检验检疫局。本标准主要起草人z刘大川、陈栋梁、刘鬼、莫朝晖、张立峰、陈建中、杨西江。I GB/T 22492-2008 大豆

2、肤粉1 范围本标准规定了大豆肤粉的术语和定义、质量要求和卫生要求、检验方法、检验规则、标签标识以及包装、储存和运输要求。本标准适用于以大豆粉或大豆蛋白等为原料，生产的食用大豆肤粉商品。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 5009.1食品卫生检验方法理化部分总则GB/T 5009.3 食品中水分的测定GB/T 5009.4 食品中灰分的测定GB/T 50

3、09.5 食品中蛋白质的测定GB/T 5009.6 食品中脂肪的测定GB/T 5009. 117 食用豆柏卫生标准的分析方法GB/T 5492 粮油检验粮食、油料的色泽、气味、口味鉴定GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008 ,ISO 3696 :1 987 , MOD) GB 7718 预包装食品标签通则GB/T 12096 淀粉细度测定方法GB 16740 保健(功能)食品通用标准3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 大豆肤粉soy peptides powder 以大豆柏或大豆蛋白等为主要原料，用酶解或微生物发酵法生产的，相对分子质量在5

4、000以下，主要成分为肤的粉末状物质。3.2 3.3 肤含量the content of soy peptides 肤占试样的质量分数。服酶(尿素酶)活性urease activity 腺酶(尿素酶)将尿素分解为氨和二氧化碳或碳酸镑的能力。4 质量要求和卫生要求4. 1 感官要求大豆肤粉感官指标见表1。1 G/T 22492-2008 表1大豆肤粉感官要求项目质量要求细度100%通过孔径为0.250mm的筛颜色白色、淡黄色、黄色滋味与气味具有本产品特有的滋味与气味，无其他异味杂质无肉眼可见的外来物质4.2 理化指标及分级指标大豆肤粉理化指标及分级指标见表2。表2大豆肤粉理化指标质量指标项目一级

5、粗蛋白质(以干基计，NX6.25)/%二三90.0肤含量(以干基计)/%注80.0注80%肤段的相对分子质量运2000 灰分以干基计)/%6.5 水分/%粗脂肪(干基)/%腮酶(尿素酶活性4.3 卫生要求4.3. 1 按GB16740及国家有关标准和规定执行。4.3.2 植物检疫按国家有关标准和规定执行。5 检验方法5. 1 采样:按GB/T5009.1要求执行。二级注85.0注70.07.0 运1.0阴性5.2 颜色、气昧和滋味检验:按GB/T5492执行。闻气味时，同时尝其滋味。5.3 细度检验z按GB/T12096执行。5.4 粗蛋白质检验:按GB/T5009.5执行。5.5 肤相对分子

6、质量分布检验:按附录A执行。5.6 肤含量检验:按附录B执行。5. 7 水分检验:按GB/T5009.3执行。5.8 灰分检验:按GB/T5009.4执行。5.9 粗脂肪检验:按GB/T5009.6执行。5. 10 腮酶检验:按GB/T5009. 117执行。6 检验规则6. 1 检验批同一批原料、同一班次生产的同一规格的产品为一批。6.2 出厂检验6.2. 1 应逐批检验，并出具检验报告。检验合格，方可出厂。6.2.2 除肤相对分子质量分布项目外，按4.1和4.2的规定检验。5 000 8.0 三级二三80.0注55.06.3 型式检验遇有下列情况之一时，应按第4章规定的全部项目进行型式检验

7、:一二新产品投产时;一-一连续生产的每半年至少进行一次;一-一当原料、设备、工艺有较大变化时有可能影响质量时;一一国家质量监督检验机构提出时。6.4 判定规则GB/T 22492-2008 6.4.1 产品未标注质量等级的，或有一项质量指标不符合本标准规定的按不合格判定。6.4.2 质量指标应符合本标准的等级规定，有一项不符合应判定为下一个等级。不符合最低等级的，判定为不合格产品。6.4.3 检验结果不符合4.1和4.2要求时，可在原批次产品中加倍抽样复检一次，判定以复检结果为准。若仍有项目不合格时，即判定该批为不合格产品。不合格产品不能供人食用。7 标签标识7. 1 应符合GB7718的规定

8、。7.2 采用转基因大豆生产加工的大豆肤粉应按国家有关规定标识。7.3 应注明产品原料的生产国名。8 包装、储存和运输8. 1 包装材料应符合相应的食品卫生要求，包装容器应大小合适，且确保产品在贮藏和运输过程中，保持干燥和不受污染。8.2 储存应储存在通风、干燥、清洁的地方，严禁与有异昧、有毒物品一同存放。8.3 运输运输工具要清洁，防晒、防雨、防潮。不得与有毒、有异昧的物品混运。3 GB/T 22492-2008 附录A(规范性附录)肤相对分子质量分布的测定方法A.l 原理采用高效凝胶过滤色谱法测定。即以多孔性填料为固定相，依据样品组分相对分子质量大小的差别进行分离，在肤键的紫外吸收波长22

9、0nm条件下检测，使用凝胶色谱法测定相对分子质量分布的专用数据处理软件(即GPC软件)，对色谱图及其数据进行处理，计算得到大豆肤的相对分子质量大小及分布范围。A.2 试剂实验用水应符合GB/T6682中二级用水的规格，使用试剂除特殊规定外，均为分析纯。A. 2.1 乙腊色谱纯。A. 2. 2 三氟乙酸色谱纯。A. 2. 3 相对分子质量分布校正曲线所用标准晶A. 2. 3.1 膜岛素。A.2.3.2 杆菌肤。A.2. 3. 3 甘氨酸-甘氨酸-酷氨酸-精氨酸。A.2.3.4 甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸。A.3 仪器和设备A. 3.1 高效液相色谱仪:配有紫外检测器和含有GPC数据处理软件的色谱工作

10、站或积分仪。A.3.2 流动相真空抽滤脱气装置。A. 3. 3 电子天平:分度值0.0001 go A.4 操作步骤A.4.1 色谱条件与系统适应性实验(参考条件A. 4. 1. 1 色谱柱:TSKgelG2000swXL300 mmX7. 8 mm(内径或性能与此相近的同类型其他适用于测定蛋白质和肤的凝胶柱。A. 4. 1. 2 流动相:乙腊+水+三氟乙酸=20+80+0.10A.4. 1. 3 检测波长:220nmo A. 4. 1. 4 流速:O. 5 mL/mino A. 4. 1. 5 检测时间:30mino A.4. 1. 6 进样体积:20LoA. 4. 1. 7 柱温:室温。A

11、.4. 1. 8 为使色谱系统符合检测要求，规定在上述色谱条件下，凝胶色谱柱效即理论塔板数(N)按三肤标准品(甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸)峰计算不低于10000。A.4.2 相对分子质量标准曲线制作分别用流动相配制成质量浓度为1mg/mL的上述不同相对分子质量肤标准品溶液，按一定比例混4 GB/T 22492-2008 合后，用孔径。.2m-O.5m有机相膜过滤后进样，得到标准品的色谱图。以相对分子质量的对数对保留时间作图或作线性回归得到相对分子质量校正曲线及其方程。A.4.3 样品处理准确称取样品10mg于10mL容量瓶中，加人少许流动相，超声振荡10min，使样品充分溶解混匀，加流动相稀释至刻

12、度，用孔径0.2m._.O.5m有机相膜过滤，滤液按A.4.1的色谱条件进行分析。A.5 相对分子质量分布的计算将A.4. 3制备的样品溶液在A.4.1色谱条件下分析后，用GPC数据处理软件，将样品的色谱数据代人校正曲线A.4.2中进行计算，即可得到样品的相对分子质量及其分布范围。用峰面积归一法可计算得到不同肤段相对分子质量的分布情况，按式(A.1)进行计算:式中:x = -ft- x 100 几总X一一一试样中某相对分子质量肤段所占总肤段的质量分数，%;A一一一-某相对分子质量肤段的峰面积;. ( A. 1 ) 句一一各相对分子质量肤段的峰面积之和，A总=Ai(其中表示样品相对分子质量段数。

13、计算结果保留小数点后一位。A.6 重复性在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过两次测定结果算术平均值的15%。5 GB/T 22492-2008 B.l 原理附录B(规范性附录)肤含量的测定方法高分子蛋白质在酸性条件下易被沉淀，相对分子质量较小的蛋白质水解物(酸溶蛋白质)可溶于酸性溶液(其中包含肤及游离氨基酸)。样品经酸化后，滤液中的酸溶蛋白质含量减去游离氨基酸含量即为肤含量。B.2 试剂实验用水应符合GB/T6682中二级用水的规格，使用试剂除特殊规定外，均为分析纯。B.2.1 三氯乙酸:150 g/L。B. 2. 2 硫酸铜(CUS04 5H20)。B. 2. 3 硫酸御。

14、B. 2. 4 硫酸:密度为1.841 9 g/L。B.2.5 棚酸溶液:20g/Lo B.2.6 氢氧化锅溶液:400g/Lo B.2.7 盐酸:优级纯。B. 2. 8 硫酸标准滴定溶液c(1/2比S04)= O. 050 0 mol/LJ或盐酸标准滴定溶液c(HCl)= o. 050 0 mol/LJ 0 B.2.9 混合指示液:1份1g/L甲基红乙醇溶液与5份1g/L澳甲盼绿乙醇溶液临用时混合。或2份1 g/L甲基红乙醇溶液与1份1g/L亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。B. 2.10 混合氨基酸标准液:O. 002 5 mol/L。B. 2. 11 pH2. 2的拧棱酸锅缓冲液z称取19.6

15、g拧橡酸铀(Na3C6Hs 07 2H20)，加入16.5mL浓盐酸并加水稀释到1000 mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化销溶液调节pH至2.2。B.2. 12 pH3. 3的拧棱酸纳缓冲液:称取19.6 g拧橡酸锅，加入12mL浓盐酸并加水稀释到1 000 mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化纳溶液调节pH至3.30B. 2. 13 pH4.0的拧橡酸纳缓冲液z称取19.6g拧棱酸锅，加入9mL浓盐酸并加水稀释到1000 mL, 用浓盐酸或500g/L的氢氧化纳溶液调节pH至4.0。B.2. 14 pH6.4的拧橡酸销缓冲液:称取19.6g拧橡酸销和46.8g氯化铀(优级纯)，加水溶解并

16、稀释到1000 mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化纳溶液调节pH至6.40B. 2. 15 pH5.2的乙酸鲤溶液:称取氢氧化程(LiOH H20)168 g，加入冰乙酸(优级纯)279mL，加水稀释到1000 mL，用浓盐酸或500g/L的氢氧化纳溶液调节pH至5.20B.2.16 苟三酣溶液z取150mL二甲基亚枫(C2H60S)和50mL乙酸铿溶液，加入4g 7Jc合苟三酣(C9 H403 H20)和0.12g还原苟三酣(C1sHlQ06 2H20)搅拌至完全溶解。B.3 仪器与设备B. 3.1 氨基酸自动分析仪。B.3.2 定氮蒸馆装置如图B.1所示。6 1一-电炉32一一水蒸气发生

17、器(2L平底烧瓶); 3一一一螺旋夹;4-小漏斗及棒状玻塞;5一一反应室;6一-反应室外层;7一一橡皮管及螺旋夹58一-冷凝管z9一一蒸馆液接收瓶。B.4 操作步骤B.4.1 酸溶蛋白质含量的测定GB/T 22492-2008 5 图B.1 定氮蒸锢装置B. 4. 1. 1 准确称取样品1.000 g(精确至o.001 g)，加人15%三氯乙酸(TCA)溶液溶解并定容至50 mL，混匀并静置5min，过滤，去除初滤液，滤液作为备用液。B.4. 1. 2 吸取10.00mL-25. 00 mL滤液，移人干燥的100mL或500mL定氮瓶中，加人0.2g硫酸铜，6g硫酸饵及20mL硫酸，稍摇匀后于

18、瓶口放一小漏斗，将瓶以45。角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部碳化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h-1 h。取下放冷，小心加20mL水。放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。同时做试剂空白试验。B. 4. 1. 3 测定:按图B.1装好定氮蒸馆装置，于水蒸气发生瓶内装水至三分之二处，加入数粒玻璃珠，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。B. 4. 1. 4 向接收瓶内加入10mL棚酸溶液(20g/L)及1滴-2滴混

19、合指示液，并使冷凝管的下端插入液面下，准确吸取10mL试样处理液由小漏斗流入反应室，并以10mL水洗涤小烧杯使流人反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馆。蒸馆5mino移动接收瓶，使液面离开冷凝管下端，再蒸馆1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，滴加指示剂，以硫酸或盐酸标准滴定溶液(0.05 mol/L)滴定至灰色或蓝紫色为终点。同时准确吸取10mL试剂空白消化液按同样步骤操作。7 GB/T 22492-2008 B. 4. 1. 5 试样中蛋白质的含量按式(B.1)进行计算。Xl一(V1- V 2 ) x c x O. 0140 F 100 1

20、- m X 10/100 式中:X1一一试样中蛋白质的含量，单位为克每百克(g/100g); V1一一试样消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升(mL); V2-一试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升(mL); C 一一一硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升(mol/L); .( B.1 ) 0.014 0一一-1.0 mL硫酸cO/2H2S04) =0.050 0 mol/LJ或盐酸c(HCl)=0.050 0 mol/LJ标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克(g); m一一试样的质量或体积，单位为克或毫升(g或mL); F一一氮换算为蛋白质的系数，取6.250计算结

21、果保留三位有效数字。B. 4.1.6 重复性:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过两次测定结果算术平均值的10%。B. 4. 2 游离氨基酸含量的测定B. 4. 2.1 准确称取样品(使试样游离氨基酸含量在10mg-20 mg范围内)，用pH为2.2的缓冲液溶解，定容至50mL，供仪器测定用。B.4.2.2 准确吸取0.200mL混合氨基酸标准溶液，用pH2.2的缓冲液稀释到5mL，此标准稀释液浓度为5.00nmol/50L，作为上机测定用的氨基酸标准，用氨基酸自动分析仪以外标法测定试样测定液的氨基酸含量。B.4.2.3 结果按式(B.2)计算zc xl x F XV X M

22、 5 X2 = VV. ., O X 100 ( B.2 ) 式中zX2一一试样氨基酸的含量，单位为克每百克(g/100g) ; C一一试样测定液中氨基酸含量，单位为纳摩尔每50微升(nmol/50L); F一一试样稀释倍数;V一一试样定容体积，单位为毫升(mL);M一一氨基酸相对分子质量;m一一试样质量，单位为克(g); 占一折算成每毫升试样测定的氨基酸含量，单位为微摩尔每升(mo阳;109一一将试样含量由纳克(ng)折算成克(g)的系数。十六种氨基酸相对分子质量z天冬氨酸:133.1;苏氨酸:119.1;丝氨酸:105.1;谷氨酸:147.1;脯氨酸:115.1;甘氨酸:75.1;丙氨酸:

23、89.1;缴氨酸:117.2;蛋氨酸:149.2;异亮氨酸:131.2;亮氨酸:131.2;酷氨酸:181.2;苯丙氨酸:165.2;组氨酸:155.2;赖氨酸:146.2;精氨酸:174.20计算结果表示为:试样氨基酸含量在1.00 g/100 g以下，保留两位有效数字;含量在1.00 g/100 g 以上，保留三位有效数字。B.4.2.4 精密度:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的12%。B.4.2.5 氨基酸分析仪得到的色谱图见图B.2。各种氨基酸的出峰顺序和保留时间见表B.10 8 GB/T 22492-2008 Nm-Nm )41.。的的.。【-N.N

24、H 0.hh o-mw mm-m N-dym co.NN dyN-HN Nhh. mhh.。由Y。时.的时图B.2氨基酸分析仪色谱图表B.l氨基酸出峰顺序和保留时间出峰顺序保留时间/min出峰顺序保留时间/min1 天冬氨酸5.55 9 蛋氨酸19.63 2 苏氨酸6.60 10 异亮氨酸21. 24 3 丝氨酸7.09 11 亮氨酸22.06 4 谷氨酸8.72 12 酶氨酸24.52 5 脯氨酸9.63 13 苯丙氨酸25. 76 6 甘氨酸12.24 14 组氨酸30.41 7 丙氨酸13.10 15 赖氨酸32.57 8 绩氨酸16.65 16 精氨酸40. 75 -结果计算B.5 试

25、样中多肤含量按式(B.3)计算:.( B.3 ) X = X1 -X2 式中zX一一一试样中多肤的含量，单位为克每百克(g/100g) ; X1一一试样中酸溶蛋白质的含量，单位为克每百克(g/100g) ; X2一一试样中游离氨基酸的含量，单位为克每百克(g/100g)。重复性B.6 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过两次测定结果算术平均值的12%。9 CON-N寸NNH筒。国华人民共和国家标准大豆肤粉GB/T 22492-2008 中* 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销争6印张1字数18千字2008年12月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2008年12月第一版苦定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-35536 GB/T 22492-2008