SN T 1900-2007 玉米晚枯病菌检疫鉴定方法.pdf

1、版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1900-2007 玉米晚枯病菌检疫鉴定方法Identification of Cephalosporium maydis Samra,Sabet et Hingorani 2007-05-23发布2007-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检度总局版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准玉米晚枯病菌检瘟鉴定方法S.I/1 1900-2007 关中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址www.spc.口 电话:685239466851754

2、8 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷今令开本880X1230 1/16 印张O.5 字数7千字2007年9月第一版2007年9月第一次印刷印数1-2000 今令书号:155066 2-18044 定价6.00元版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售SN/T 1900-2007 目IJ1=1 本标准的附录A和附录B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准起草人:严进、吴品珊、刘伟。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售SN/T 1900-2007 玉米晚枯病菌检疫

3、鉴定方法1 范围本标准确立了进境玉米(Zeamays L. )种子及其夹带物上的玉蜀秦头抱霉(Cehal吵rzurnrny dis Samra, Sabet et Hingorani)的检疫和鉴定方法。本标准适用于对来自玉米晚枯病发生国家和地区的所有用于加工和繁殖的玉米的进境检疫。2 原理2.1 分类地位英文名:Late Wilt of Maize 学名:CehalosjJoriumrnaydis Samra, Sabet et Hingorani 玉米晚枯病菌(Chal5户rzurnrnydis Samra, Sabet et Hingorani)属真菌界(Fungi)，有丝分裂抱子真菌(M

4、itosricfungi)。2.2 鉴定原理此真菌可通过种子传播，种传率为11%，另外，此真菌还可以菌核的形态存活于病残体中。此真菌为兼性寄生菌。因此，可以从种子和植物残体上分离病原菌并进行形态鉴定。3 仪器和用具3.1 仪器体视显微镜、普通光学显微镜(具油镜和测微尺)、普通天平(感量O.1 g)、洁净工作台、光照培养箱或光照培养架、近紫外光灯管(根据培养箱或培养架尺寸)、高压灭菌器。3.2 用具手持放大镜、滤纸、培养皿、烧杯、三角瓶、慑子、剪刀、载玻片、盖玻片、量筒、吸管、酒精灯。4 试剂和培养基4.1 式剂马铃薯、葡萄糖、琼脂粉、无菌水、1.25%次氯酸纳、75%酒精。4.2 培养基马铃薯

5、葡萄糖培养基(PDA)。5 鉴定方法5.1 症状检查受侵染的种子表面元症状。受侵染的茎杆变干、凹陷、中空，维管束变为红褐色。5.2 保湿培养5.2.1 种子保湿培养采用冷冻滤纸法检测。每份样品取400粒种子，用1.25%的次氨酸铀()JaOCl)溶液表面灭菌3 min4 min后，放在垫三层灭菌温滤纸的培养皿中，每皿10粒，在室温200C220C下放置24h后，在一200C下冷冻24h，然后转至250C培养箱或培养架上培养7d，近紫外光照和黑暗各12h交替。5.2.2 植物残体保湿培养植物残体在75%的酒精溶液中浸泡1min，经灭菌水洗涤后放置在垫三层湿润滤纸的培养皿中，在版权所有 禁止翻制、

6、电子传阅、发售SN/T 1900-2007 250C培养箱或培养架上培养7d，近紫外光照和黑暗各12h交替。5.3 分离7 d后观察种子表面或植物残体表面是否有白色真菌生长，如有，则用体视显微镜观察是否产生分生于包子，分生于包子是否聚成头状。如观察到分生于包子聚成头状，则准备一片灭菌的凹玻片，凹槽内滴数滴元菌水，在体视显微镜下用细针挑取子包子于凹玻片上的无菌水中，配成于包子悬浮液，用接种环在PDA培养基上划线做单子包分离。5.4 生物学鉴定将划线后的PDA培养基在室温条件下放置24h，在体视显微镜下用细针挑取单菌落转至放置在灭菌载玻片上的PDA培养基块O.5 cm X O. 5 cm上，加盖玻

7、片。载玻片放置在垫三层湿润滤纸的培养皿中保湿，250C培养箱或培养架上培养5d，近紫外光照和黑暗各12h交替。在显微镜下观察分生于包子梗和分生于包子的着生方式和形态特征。6 鉴定特征在PDA上，菌落呈淡灰色，后变黑色。分生于包子梗从菌丝生出，直立，顶端生分生于包子，分生于包子梗长30m250mo分生于包子聚成头状，透明，单细胞，椭圆形，大小(3.6m14m) x (3m 3. 6m)。本种与危害玉米的另一个头子包菌。halsjJriumacremunium (玉米黑束病菌)的区别是后者的分生于包子梗较短，23m78m，分生于包子较小，(2.9m8.7m) X (1.5m2. 9m)o 7 结果

8、判定如分离物的各形态特征与描述的病原菌形态相吻合，&p可判定为玉米晚枯病菌(Cehal5户rzurnrnaydis Samra ,Sabet et Hingorani)。2 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售SN/T 1900-2007 附录A(资料性附录)玉米晚枯病菌的分布和寄主A.1 分布印度、埃及、匈牙利。A.2 寄主玉米ZmaysL. 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售khCON-00-SN/T 1900-2007 附录(资料性附录)玉米晚枯病病原形态B 问Z表B.1项目Cehalos户oriummaydis Ce和halos和orzumacemonlum 菌落特性淡灰色，后变黑色白色分生袍子梗/m30250 2378 分生袍子/m3. 614X33. 6 2. 98. 7X 1. 52. 9 书号:155066 2-18044 定价:6.00元分生于包子聚集成头状图B.1SN/T 1900-2007