1、GB/T 1470293 1 主题内容与适用范围 本标准适用于配合饲料，预混合饲料，浓缩饲料中所添加维生素B6的测定。测定范围为0.083.5 g/mL。 2 原理 用水提取，在pH7条件下，用荧光法测定维生素B6。3 试剂和溶液 除特殊规定外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或相应纯度的水。 3.1 pH7缓冲液 称取29.3023g磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O，GB 1263）和3.8115g柠檬酸（C6H8O7H2O），HGB 3296）于100mL容量瓶中，用煮沸后冷却的水，溶解并定容至刻度。混匀备用。 3.2 维生素B6标准贮备溶液称取40mg（中国药典参照标准）维生素B
2、6，或复合维生素（中国药典参照标准）B640mg， B1100mg，B250mg（精确至0.0001g）于100mL容量瓶中，加水溶解定容至刻度，此液1mL含400g的维生素B6。 3.3 维生素B6标准工作溶液吸取（3.2）贮备液1mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度，混匀，此液1mL含4 g的维生素B6。 4 仪器设备 4.1 荧光分光光度计； 4.2 分析天平：感量0.0001g。 4.3 实验室用器皿 容量瓶 1000mL，100mL，50mL，25mL。 刻度移液管 10mL，5mL，1mL。 5 分析步骤 5.1 试样的选取和制备 选取有代表性的试样，粉碎通过0.28mm孔筛，用
3、四分法缩减至100g，密封保存，以防试页码，1/2GB/T 14702932006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB147020a.htm样维生素 B6变化或变质。 5.2 测定步骤 5.2.1 维生素B6的提取称取试样（配合饲料，浓缩饲料，预混合饲料）0.52g，（精确至0.0001g）于100mL容量瓶中，加水溶解后，定容至刻度，振荡12min，静置待沉清，或离心（400r/min）10min。 5.2.2 试样的测定 移取试样的上清液1mL（40 gVB6）于25mL容量瓶中，加入（3.1）pH7缓冲液至刻度，混匀，用1cm石英比色杯，置入荧光分光光度
4、计内，于激发波长326nm、发射波长395nm测定其荧光强度。 同时做空白试验。 5.2.3 工作曲线的绘制 取0.00，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50mL维生素B6标准工作液（3.3）分别于25mL容量瓶中，加入pH7缓冲液（3.1）至刻度，混匀，用1cm石英比色杯，置入荧光分光 光度计内，于激发波长326nm、发射波长395nm测定其荧光强度，以荧光强度为纵坐标，维生素B6量为横坐标，绘制工作曲线。 6 分析结果计算和表述 维生素B6的含量（mg/kg）按下式计算：7 允许差 7.1 每个试样称取两份平行测定，取算术平均值为测定结果并保留两位小数。 7.2 维生素B6含量少于40mg/kg以下，平行测定结果相对差值不大于10，维生素B6含量大于40mg/kg的平行测定结果相对差值不大于5。 VB6（mg/kg） M D/W（1000/1000） M D/W 式中： M工作曲线上查得维生素B6含量， g/mL；W 试样的质量，g；D 试样的总体积，mL。页码，2/2GB/T 14702932006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB147020a.htm
