SN T 1280-2014 国境口岸鼠疫检验规程.pdf

1、人共和境检检疫行标;SN/1280-2014 代替SN/T1280-2003 境口岸蘸踵栓验规程Inspection codes for plague at frontier port 2014-04-09发布2014-11-01实施中华人民共和ME发布匪家股量监督检验检疫总局目自吕本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准代替SN/T12802003(国境口岸鼠疫检验规程。本标准与SN/T12802003相比，主要技术变化如下:一一一修改了规范性引用文件:GB 15991 1995修改为ws279; SN/T 1280-2014 一修改了要求专用实验室修改为卫生部人间传染的病原

2、微生物名录规定的相应等级的生物安全实验室，条件具备用聚合酶链式反应(PCR)修改为用鼠疫特异抗原和抗体检测及基因检测;修改了检验程序;一一修改了结果判定;一一修改了附录A、附录B、附录D，附录B修改为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局和中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人:王东胜、乔舜、魏怀波、囚丽、孟东平、孙利。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:SN/T 12802003。I SN/1280-2014 国境口岸摄疫检验规程1 范围本标准规定了国境口岸鼠疫检验的

3、实验室生物安全规范、材料的采集、保存和运输、检验程序、结果判定。本标准适用于国境口岸2 规范性引用文件WS 279 鼠疫诊断标准人间传染的病原微生物名录(卫可感染人类的高致病性病原微生3 要求3.1 3.2 3.3 应两人以上同时进入实验室工3.4 及时准确做好检验的各项实验3.5 用鼠疫特异抗原和抗体检测(4 准备4.1 设备和材料天平;离心机、离心管;震荡器;温箱;皿;灭菌小试管;1mL注射器;血凝微量板、稀释棒;定量滴头。4.2 培养基和试剂4.2.1 鼠疫菌检验1-，仅注目期的版本适用于本文生部)级的生物安全实验室内进行。等，见附录A。口岸鼠疫的快速初步检验。;带盖自瓷缸;接种棒、自金

4、耳;平95%乙醇;生理盐水;革兰氏、美兰染液;溶血(0.1%)赫氏琼脂平板培养基(培养基的制备见附录C); 龙胆紫(1: 10万)(l: 20万)J亚硫酸铀(0.025%)平板或龙胆紫溶血平板培养基;鼠疫噬菌体。4.2.2 闰接血凝试验(lHA)4.2.2.1 2.5% F1抗原致敏血球。用细菌凝集效价为1: 320以上的鼠疫全菌免疫血清滴定、血凝滴度应不低于1: 40 000;与假结核血清交叉滴定、滴度应不高于1: 5;符合上两项规定的致敏血球为合格诊断用血球，每一鼠疫季节开始前或更换致敏血球批号时应进行上述滴定。SN/T 1280-2014 4.2.2.2 1%正常兔血清盐水。4.2.2.

5、3 2.5 %单宁酸血球。4.2.2.4 F1抗原液(50g/mL100g/mL)。4.2.3 反向血凝试验(RIHA)2.5%鼠疫抗体致敏血球;1%正常兔血清盐水;鼠疫诊断血清。5 疑似鼠疫材料的采取、保存和运输按附录D的规定执行。6 检验程序6.1 鼠疫菌检验6. 1. 1 镜检6. 1.1. 1 涂片6. 1. 1. 1. 1 取材腺、肝、脾、肺、心，用切面在洁净玻片上压印或涂成薄片;或取骨髓、脑脊液及各种渗出液、痰，用接种环直接涂片。至少2张，室握下自然干燥，人体及自死动物材料至少涂4张片。6. 1. 1. 1. 2 用95%乙醇或乙醇、乙酷各半配制的固定液固定10min，取出自然干燥

6、。6. 1.1.2 染色涂片进行革兰氏染色和美兰染色。6.1. 1.3 镜检发现革兰氏阴性、两极浓染、两端钝圆的短小球杆菌，为符合鼠疫菌的特点。注意腐败材料或陈旧材料菌本身形态的变化。6. 1. 2 细菌培养按WS279的规定执行。6.1.3 鼠疫噬菌体裂解试验按WS279的规定执行。6. 1. 4 动物接种按WS279的规定执行。6.2 血清学检验6.2.1 间接血凝试验(lHA)按WS279的规定执行。6.2.2 反向血凝试验(RIHA)按WS279的规定执行。2 7 结果判定7.1 鼠疫菌判定依据按WS279的规定判定。7.2 间接血凝试验的结果判定按WS279的规定判定。7.3 反向血

7、凝试验的结果判定按WS279的规定判定。SN/T 1280-2014 3 SN/T 1280 2014 附录A(规范性附录)最疫实验室生物安全规范A.1 导吉由于鼠疫菌特别危险的性质，对鼠疫实验室有不同于一般细菌学实验室的特殊要求。鼠疫菌检验应在卫生部人间传染的病原A.2 鼠疫实验室结构A.2.1 普通鼠疫实验室实验室宜设立于独立的建筑物强毒操作区应安装带有除菌滤虫措施，防止陆齿类动物或昆实验室的强毒区域内，设材料接检室(接受材料、检蚤在强毒区域之外，宜根据需清学试验、高压、洗涤以及健A.2.2 生物安全E级实验在普通鼠疫实验室内装要求。A.2.3 生物安全E级实验在生物安全H级的基础全实验室

8、内进行。种及饲养室，如果有条件可增设疑似统。在实验室的强毒区和其他辅助E级实验室，可简化进入实验室的着出实验室时空气流向为由外向内，保证实验室内空气流向自上而下，无横二向过施细萦流，并维孽茹耍的洁净度，即达到生物安全皿级标准。适用于特别危险，容易产生气榕胶的实验操作，并具备较强的抗御事故能力。A.3 鼠疫实验室工作制度A.3.1 进行鼠疫实验室操作时，需有两名工作人员同时进入。A.3.2 非实验室工作人员一律禁止进入鼠疫强毒实验区。A.3.3 实验室内禁止吃东西、吸烟和喧哗。A.3.4 全体工作人员经鼠疫正规培训后方可进行强毒操作，并严格按照鼠疫菌强毒操作规程和其他国家标准进行各项实验，准确记

9、录实验结果。A.3.5 工作人员要熟知实验室常规感染途径和掌握个人防护措施。A.3.6 建立工作人员基础医学检测卡片。A.3.7 工作人员如有皮肤损伤、发热、感冒、抵抗力低下和娃撮者，不应进入强毒实验区。4 SN/1280-2014 A.3.8 工作完毕，检查实验室水、电、防火设备，打开防盗报警装置。A.4 鼠疫实验室着装要求A.4.1 普通鼠疫实验室按下列顺序穿着防护服装:穿内隔离衣裤;穿防蚤袜及长筒胶靴;戴白帽和小口罩(两鼻翼与小口罩间用适量脱脂棉填充):扎三角头巾及帽子;穿后开口的白大衣(偏衫);戴20层24层的纱布大口罩:戴医用手术手套，必要时外面套细线手套;进行已知毒菌动物接种、解剖

10、或菌种开封等工作应戴有机玻璃面罩或眼镜，以防操作时细菌溅入眼内或脸部裸露皮肤;或在无菌罩中进行。A.4.2 在配备生物安全柜的生物安全H级和田级实验室内，着装可简省至外科手术着装水平，即带一次性口罩、帽子、穿后开口的白在杂费要孝琪要素热点可使用一次性服装。用后高压灭菌。耐用服装也应定期高压灭菌。A.5 鼠疫生物安全操作规程间用紫外线照射消毒灭菌30mino A.5.2 进入鼠疫强毒实验区后A.5.3 进行细菌分离、培养或验室应在元菌罩中进行。A.5.4 工作之前，生物安全柜毒液的毛巾。A.5.5 进行细菌操作时，接种环A.5.6 稀释菌液时，将吸管插溶胶。A.5.7 切勿从吸管中打出最A.5.

11、8 实验中需使用酷、三A.5.9 离心时，应使用双盖平衡时不得有菌液渗漏到A.5.10 A.5.11 实验室中所需要的其裂，立即置消毒液中浸泡5mi日10min后更换。室应在生物安全柜中进行;普通实台面用消毒液灭菌，并铺放浸有消飞溅。次性打击菌液，避免产生气泡或气一次性塑料手套。总量低于最高容量一个刻度单位;毒。A.5.13 进行动物实验时，勿用于直接对接或拔开注射器和针头，以免划破皮肤或元意接种。A.5.14 切勿在空气中直接排放含有菌液的注射器内的气、泡，以免形成气溶胶。A.5.15 接种过的实验动物应该放在定期消毒、封闭式实验动物室内，并有明确的实验记录。A.5.16 每次操作规程结束后

12、，应清理工作面，普通实验室台面用消毒液，生物安全柜台面用75%乙醇抹拭。所有物品应该归位，关闭生物安全柜。A.6 污染处理及消毒A.6.1 强毒实验区内的各项工作记录和其他物品，需经消毒液浸泡或高压灭菌后，方可拿出实验室。A.6.2 实验用试管、吸管及其他器械，经消毒液浸泡24h，高压灭晤后，方可拿出实验室。A.6.3 细菌培养物、实验动物尸体及污物，经高压灭菌后，方可拿出实验室，进行进一步处理。5 SN/T 1280-2014 A.6.4 工作完毕，检查各仪器设备是否恢复零位或正常运行，做好使用记录。A.6.5 更衣顺序:在普通鼠疫强毒实验室内，工作结束后将于和脚(着穿胶靴和手套)在消毒液内

13、搜1 min3 mi口，然后在消毒间接上述相反顺序脱下(手术手套在偏衫后脱)，头巾或白大衣高压灭菌，医用于术手套和纱布口罩用0.1%新洁而灭消毒，如用滤材口罩可用环氧乙皖密闭灭菌，面罩或眼镜用酒精棉球消毒。最后洗手并用75%乙醇棉球擦面部裸露部位，用3%棚酸水漱口后，方可离开实验室。A.6.6 民主疫实验室内，未经消毒的污水不应直接排入公共下水系统。A.7 意外事故处理A.7.1 一般实验室事故，如培养物跌落破碎等，立即在污染区域喷洒消毒液，待消毒液彻底渗透污染物后，再行清理。清理时特别注意避免破碎玻璃等锐利物体割伤皮肤。清理出来的污染物品尽早高压灭菌，清理后的场所再用消毒液及75%乙醇擦拭后

14、，方可重新开始工作。A.7.2 可能造成人身伤害的实验室事故，如污染物溅落在身体表面，割伤、烧伤、烫伤，感染动物咬伤等情况时，立即进行紧急处理:未破溃的皮肤表面用消毒液清洗，伤口以腆酒、酒精消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗:事故的情况报告实验室主任，根据感染鼠疫的可能，决定预防性使用链霉素或其他对鼠疫有效的抗生素，并对受伤害者进行隔离观察。判明确实感染鼠疫肘，按传染病防治法的规定报告。A.7.3 工作人员进入强毒区工作后，7日内发生不明原因咳嗽、发烧和可疑为鼠疫的症状，应及时向实验室主任报告，不得擅自到医院就诊。不能排除实验室感染时，按鼠疫进行隔离观察和治疗。只有在排除鼠疫感染情况下方可到医院就医

15、。6 SN/T 1280-2014 附录8(规范性附录)鼠疫的PCR技术检测B.1 导言PCR(聚合酶链式反应)技术是用分子生物学技术，在体外模拟生物体内环境，对特定的DNA进行体外扩增。用这样的方法对鼠疫菌进行检测，操作简单、快速、特异性强、灵敏度高。将这一先进的检验技术应用到国境口岸的鼠疫检测工作中，可以提高鼠疫诊断的准确性和灵敏度，提高口岸鼠疫监测水平，对国境口岸鼠疫检测的快速诊断有一定的实用性。B.2 设备和材料高速台式离心机;水浴锅:培养箱;p日计;双蒸水发生器;微波炉;匀浆器;微量取液器(10L、20L、100L、200L、1000L) ;PCR仪;电泳仪;凝胶成像分析系统或紫外线

16、透射仪。B.3 试剂自己制B.3.1 1 mol/L Tris 100 mL Tris 12.1 g双蒸水90mL，加盐酸5mL左右，调pH=8.0，再加双蒸水至100mL，高压灭菌。B. 3.2 0.5 mol/L EDTA 100 mL EDTA 18.6 g双蒸水90mL，加氢氧化纳约2g，在磁力搅拌器上搅拌，再用10mol/L氢氧化纳滴加调pH=8.0，再加双蒸水至100mL，高压灭菌。(EDTA在加入氢氧化铀、pH近8.0时才全部榕解)。B.3.3 TE( 1 0 mmoI/L Tris、1mmoI/L EDTA ,pH=8.0)100 mL 1 mol/L Tris(pH=8.0)

17、 0.5 mol/L EDTA(pH=8.0) 加双蒸水至100mL，高压灭菌。1 mL 0.2 mL B. 3.4 蛋白酶K裂解液CO.5%SDS、300!lg/mL蛋白酶K、50!lg/mL RNA酶A)2mL 10%SDS 20 mg/mL蛋白酶K10 mg/mL RNA由每A加TECpH=8.0)至2mL。B. 3.5 10 %SDS SDSC十二皖基磺酸饷)双蒸水0.1 mL 30LC冷冻保存)10 !J- L 10 g 100 mL 7 SN/T 1280-2014 B.3.6 10 mol/L氢氧化铀100mL 氢氧化纳双蒸水40 g 100 mL B.3.7 加样缓冲液(0.2

18、5%滇酣蓝、40%蔚糖)100 mL 澳酣蓝蔚糖加双蒸水至100mL, 4 C保存。B.3.8 漠化乙链保存液(10 漠化乙链双蒸水B.4 PCR模板的制作B. 4.1 蛋白酶K费解法B.4. 1. 1 适用于所有标本的血液(血清、血浆、全血)、局部B.4 .1.2 粪便、分泌物、痰液、去掉杂质、脱蜡。B.4.1.3 a) 分别取10mg 100 b) 置56C水浴0.5h c) 各加等体积的饱此抽提12次。d) 加等体积的主氯甲f) 取出后14000 r/min g) 沉淀加入75%冰冷乙醇15弃或倒掉上清。h) 真空或37C温箱或室温干燥。0.25 g 40 g 织细胞(包括石蜡包埋组织人

19、绒毛、化前，还需作预处理，其方法有离心0L，研磨或i昆匀。或壁上蒸发冷i疑的水分沉至管底。10 min，取上清液置新离心管。如10 mi口，取上清液置新离心管。如, -20 C放置20min3 ho i) 加TE缓冲液20L，溶解后，取3L8L用PCR扩增，或放一20oC保存。B.4. 1. 4 除4.1.2列项中第三项处理方法外，亦可在蛋白酶K消化处理标本并经离心处理后，吸取上清液，经95oC 970C水浴或煮沸10min后，离心取上清液，作PCR扩增。B.4.1.5 杂质较多时，还可继续经酣:三氯甲:境抽提后，离心取上清液，作PCR扩增。B.4.2 煮沸法B.4.2.1 动物脏器标本应如下

20、处理:a) 取被检动物肝、脾等组织10mg100 mg，加灭菌生理盐水或蒸馆水500Ll000L研磨;8 SN/T 1280一2014b) 将组织悬液移至1.5mL离心管中，煮沸10min; c) 10 000 r/min离心10min: d) 取上清液进行PCR扩增，或-20C保存。B.4.2.2 蚤标本应如下处理:a) 单匹蚤用100L灭菌生理盐水或蒸馆水、分组蚤用500L生理盐水或蒸悟水研磨;b) 将悬液移至1.5mL离心管中，煮沸10min; c) 10 000 r/min离心10min; d) 取上清液进行PCR:J!= B. 4.2.3 加适量元菌蒸馆水或生取上清液进行PCR扩增。

21、10 min, 10 OOOr/min离心10min, B.4.2 .4 菌悬液煮沸10min ,10 000 r/ B. 4.3 其他方法B. 5 PCR扩t曾B.5.1 加样B. 5. 1. 1 加样50L体系:a) 取PCR管编号;b) 各管加样量:10 X Buffer dNTP(25 mmol/U 引物1(50mol/U引物2(50mol/U三蒸水2. 5L 34.1L Taq自每O. 5 L 模板5L 菌悬于液体中，进行PCR扩增。B.5. 1. 2 以上PCR试剂(Taq酶、10X Buffer、dNTP)应保证20 C保存，使用时应放置在冰上。B.5.1.3 短暂离心，使管壁及

22、盖上的液体沉到管底。B.5. 1. 4 进行PCR扩增反应。B.5.2 扩增利用PCR仪进行PCR扩增反应，参照PCR仪说明进行加样、运行。反应过程如下:a) 94 C变性5min; b) 94 C变性50s , 53 C复性50s , 72 C延伸50s，此步骤需30个循环;9 SN/T 1280-2014 c) 72 C延伸5min; d) 4 C保存。B. 6 电泳B. 6.1 配制电泳缓冲液B. 6.1.1 5XTBE Tris E朋酸54 g 27.5 g 0.5 mol/L EDTA(pH8.0) 20 mL 加双蒸水至1000 mL。使用时用双蒸水1: 5稀释成1X的使用液。B.

23、6.1.2 50 x TAE 300 mL Tris 72.6 g 冰乙酸17.13 mL 0.5 mol/L EDTA(pH=8.0) 30 mL 双蒸水253 mL 使用时用双蒸水1: 50稀释成1X的使用液。B.6.2 配制电泳胶(1%琼脂糖)琼脂糖电泳缓冲液(0.5XTBE或1XTAE)加热溶化。B.6.3 电泳胶制作和加样B.6.3.1 加热使琼脂糖珞解。1 g 100 mL B.6.3.2 制胶模具的两端用医用橡皮膏封好，在模具一端安插上梳子;梳子与模具底之间应保持1mm 的间隙。B.6.3.3 待琼脂糖冷却至60C，倒入模具，凝胶厚度一般为0.5cm , B.6.3.4 室温放置

24、30min45 min后，琼脂糖完全凝固，小心取出梳子，取下橡皮膏，将凝胶置于电泳槽上。B.6.3.5 加入电泳缓冲液，液面高于胶面1mm。注意缓冲液要与凝胶电泳缓冲液一致。B.6.3.6 在扩增的DNA样品中，加入六分之一体积的载样缓冲液(澳酣蓝)，短暂离心。B. 6.3.7 用移液器加入加样孔中(注意不要有气泪，不要过深扎破加样孔，加样要平稳、缓慢)。B.6.4 电泳B.6.4.1 加样端连接电泳仪的负极。B.6.4.2 100 v，t亘压电泳30min60 mi口。B.6.4 .3 随时观察澳酣蓝的电泳位置。10 SN/T 1280-2014 B. 7 结果观察B.7.1 电泳完毕，立即

25、染色(0.5g/mLi臭化乙链)20min。B. 7.2 在紫外线透射仪上，用透射光观察结果，或采用凝胶成像系统观察结果。做好记录及样品位置。B.7.3 照相留资料，照相机加近摄镜和红光镜;或采用凝胶成像系统保存结果。11 SN/T 1280一2014C.1 敏感培养基C. 1.1 成分赫氏膜酶消化液(氨基氮含量500磷酸氢二铀氧化铀琼脂粉蒸馆水10%榕血C.1. 2 制法在稀释好的消化液中加入磷酸氢p江为7.2，过滤后分装入三角烧瓶，塞45 C左右，加入10%洛血10mL，摇匀检查有无杂菌生长，然后放入4C冰箱内C.2 选择敏感培养基C.2.1 成分赫民膜酶消化液(氨基氮含量磷酸氢二铀氧化铀

26、琼脂粉蒸锢水10%溶血1%。龙胆紫溶液C.2.2 制法附录C(规范性附录)培养基的制备10 mL 10 min左右加热海解，校正105 20 min，取出后冷却至放入37C恒温冰箱中24h 10 mL (称取龙胆紫0.1g，加纯酒精10mL溶解，再加蒸懵水90mL，高压灭菌15X 10 20 min) 在稀释好的消化液中加入磷酸氢二铀、氧化铀、琼脂粉、蒸馆水，煮沸10min左右加热溶解，校正pH为7.2，过滤后装入主角烧瓶，塞好棉花塞并包好瓶口，高压灭菌15X 105 20 mi口，取出后冷却至45 C左右，加入10%溶血10mL、1%0龙胆紫水溶液10mL，摇匀后倾注平皿培养基。待培养基凝固

27、后放入37C恒温冰箱中24h检查有无杂菌生长，然后放入4C冰箱内保存备用。12 附录D(规范性附录)疑似愚痊材料的采取、保存和这输D.1 人体材料D.1.1 疑似鼠疫病人的取材D.1. 1. 1 疑似鼠疫病人应在服用抗菌D. 1. 1. 2 各型疑似鼠疫患者，除采诊断用。D. 1. 1. 3 供血清学诊断用被检血清应在56oC 30 D. 1. 1. 4 疑似腺鼠疫病人取材:16号针头)刺人淋巴结，抽取b) 淋巴结肿大不明显者，宜先抽取;c) 感染后期，宜在肿大的淋巴D. 1. 1.5 疑似肺鼠疫病人取材:a) 令病人对血琼脂平板咳嗽，或b) 用灭菌棉拭子涂擦咽部分泌D.1. 1. 6 疑似败

28、血型鼠疫应采取静D. 1.1. 7 疑似眼鼠疫应用棉拭子或D. 1. 1. 8 疑似肠嵌疫应取病人粪便D. 1. 1. 9 疑似皮肤型鼠疫取材:a) 水泡、服泪期，宜将陈泡表备检。b) 横痛、结班期以灭菌慑子持灭菌盐水内备检。D.1. 1. 10 疑似脑膜炎型鼠疫的病人用腰椎穿刺法抽取脑脊液备检。SN/T 1280-2014 L5 mL，供检菌和血清学接种于血琼脂平板;菌生理盐水，稍亭后再行广口瓶内备检;盐水管内备检。侧面刺入泡内，抽取内容物面，将棉球保存于灭菌试管或灭D.1.1.11 对于鼠疫病人的密切接触者、鼠疫污染材料的接触者、以及早期未出现典型可疑症状的疑似在支疫病人，均应按D.1.1

29、.2和D.1.1.5的规定取材备检。D.1.2 疑似鼠疫尸体的取材D. 1. 2.1 首例疑似鼠疫尸体应作解剖取材。a) 取材前应作好解剖器材、场所选择和尸体处理的准备;b) 以无菌手续采取肝、牌、肺、心血及有可疑病理改变的淋巴结等，分别置于灭菌平皿或试管内保存。尸体有腐败迹象时，应取长骨材料。D.1.2.2 如不能解剖，宜行局部取材。用腰椎穿剌器按淋巴结、心、肝、脾及肺的顺序穿刺采取组织，分别保存于灭菌试管内，尸体腐败时可穿剌取骨髓。13 SN/T 1280-2014 D. 1. 3 保存、运输及注意事项D. 1. 3.1 凡所取材料均应保存于灭菌器皿内:组织块可保存于灭菌生理盐水中，或用5

30、mL10 mL Broke氏液保存;亦可应用CaryB1eir培养基保存运送材料。容器用石蜡密封。D.1.3.2 所取标本按照卫生部人间传染的病原微生物名录的规定进行包装。D.1.3.3 运输按照卫生部可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定执行。D.1.3.4 对疑似鼠疫病人取材时，按照进入普通鼠疫强毒实验室的着装要求进行个人防护。D.1.3.5 来自待检患者和疑似鼠疫尸体的检材，应进行鼠疫特异抗原及基因检测，以便做出早期诊断。D.1.3.6 如抗原及基因检测为阳性结果，负责检验的单位应在收到检材后24h内做出疑似鼠疫报告。D.2 动物及昆虫被检材料D.2.1 动物材料的采

31、集D.2. 1. 1 取材范围动物材料的取材范围包括:a) 对来自鼠疫疫区的交通工具、集装箱、货物中捕获的晴齿动物送检;b) 对有鼠疫自然疫源性存在地区的国境口岸范围内发现的自毙鼠类送检;c) 在调查范围内选择有代表性地段捕获所需动物并同时在全范围内收集自毙动物送检。D.2.1.2 取材方法将获得的全部应检动物分类编号登记，单只装入小布袋内，活动物处死后，拣净体外寄生虫，进行动物分类鉴定，然后按下述方法剖检:a) 自毙、染病萎靡动物:按常规方法解音。后，分别观察腺、肝、脾、肺、心等有无病变，并取相应材料作细菌学检查，使用的器械每用一次应进行消毒;b) 捕获动物:原则上只采取肝、脾或有病变的组织

32、进行检查;c) 腐败动物:多采取骨髓和脑组织作检查。D.2.2 昆虫材料的采集14 昆虫材料包括蚤类、蝉类、蜗类、虱子等，以蚤类为重点。蚤的采集:a) 动物体蚤的采集:收集的体蚤及其他昆虫，拣人装有0.5X 10龙胆紫、2%盐水的小瓶内，注明寄主、采集地点、采集日期;b) 洞道蚤的采集:用顶端困定白色法兰绒或毛巾的探蚤棒收集，探得的蚤及其他昆虫按D.2.2中的第一项方法分装并登记;c) 巢穴蚤的采集:主要靠挖掘巢穴内的窝巢及表层泥土而获得。应一巢装一袋，然后装入大白搪瓷盆内检蚤，采集的蚤按D.2.2中的第一项方法分装并登记;d) 地面游离蚤的采集:常用粘蚤纸收集，将粘蚤纸按要求放在房屋地面的一

33、定位置，昏量晨查，搜集粘蚤纸上的蚤类，按D.2.2中的第一项方法分装并登记;e) 将以上收集的蚤类进行分类鉴定并进行细菌学检验。立自|。NFH军中华人民共和国出入境检验检疫行业标准国境口岸鼠疫检验规程SN/T 1280-2014 兴中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029)北京市西城区三里河北街16号(100045) 总编室:(010)68533533网址.c口中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷争印张1.25字数28千字2014年12月第一次印刷1/16 2014年12月第一版印数1-1300 开本880X 1230 定价21.00元兴书号:155066 2-27612 SN/T 1280-2014