GB T 17778-2005 预混合饲料中d-生物素的测定.pdf

1、ICS 65. 120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准G/T 17778-2005 代替GB/T17778 1999 预混合饲料中d-生物素的测定Determination of d-biotin in premix 2005-09-05发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2006-02-01实施发布中华人民共和国国家标准预混合饲料中d-生物素的测定GB/T 17778-2005 告陪中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销晤开本880

2、X12301/16 印张0.5字数9千字2006年2月第一版2006年2月第一次印刷电悔书号:155066 1-26934 定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533前言本标准是GB/T17778-1999(预混料中d生物素的测定的修订版。本标准与前版相比主要技术内容变化如下:一一一补充了高效液相色谱法，并规定其为仲裁法。G/T 17778-2005 一在吩光光度法中试样溶液的提取增加了用水先榕解的步骤;在测定中用吸光度的一阶导数的峰差值代替原吸光度。本标准自实施之日起，代替GB/T17778-1999。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会

3、提出并归口。本标准起草单位:国家饲料质量监督检验中心(武汉)。本标准主要起草人:钱时、屈利文、杨林、杨先奎。I GB/T 17778-2005 预混合饲料中d-生物素的测定1 范围本标准规定了用分光光度仪和高效液相色谱仪测定预混合饲料中d-生物素含量的两种方法。本标准规定的方法1和方法2适用于古生物素含量大于1.0 mg/kg的复合预混合饲料、维生素预海合饲料的测定。提取液的浓度范围为2.0g/mL-20.0g/mL。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注目期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达

4、成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(neqISO 3696: 1987) GB/T 14699. 1饲料采样3 方法1一一分光光度法3.1 原理用乙醇水溶液将试样中d-生物素提取出来，在硫酸乙醇榕液中d-生物素和4-二甲氨基肉桂醒生成橙色化合物，在一定范围内颜色深浅与d生物素含量成正比。3.2 试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。水符合GB/T6682三级水的规定。3.2.1 元水乙醇。3.2.2 乙醇溶液:将90体积的乙醇与10体积的水?昆匀。3.2.3 硫酸乙醇

5、溶液:将2体积的硫酸与98体积的无水乙醇混匀。3.2.4 4-二甲氨基肉桂醒无水乙醇溶液:2g/L。3.2.5 d-生物素标准溶液3.2.5. 1 标准储备液:准确称取O.100 0 g d-生物素标准品溶解于乙醇溶液(3.2.2)中，定量转入100 mL容量瓶中，用乙醇水溶液稀释至刻度，棍匀。此液1.00 mL含d-生物素1.00 mg。3.2.5.2 标准工作液:准确移取d生物素标准储备溶液(3.2.5.1)1.00 mL于50mL容量瓶中，加乙醇溶液稀释至刻度，棍匀。此液1.00 mL含d-生物素20.0吨。3.3 仪器与设备3.3.1 分光光度计(有一阶导数功能)。3.3.2 实验室用

6、超声波提取器。3.3.3 分析天平:感量0.0001 g。3.4 试样的制备按GB/T14699. 1规定方法采样，选取饲料样品至少500g，四分法缩减至100g，磨碎，通过0.42 mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，保存备用。3.5 分析步骤3.5.1 试样溶液的提取称取维生素预混料约2g(精确至0.0001 g)、复合预1昆料约5g-10g(精确至O.OOOlg)，置于磨口平底烧瓶中，加入5.00mL水置超声波提取器(3.3.2)中超声20min后，再加入20mL无水乙醇GB/T 17778一2005( 3. 2. 1)超声20min.然后转移到50mL容量瓶中，用无水乙醇(3.2.1)稀释

7、至刻度。过滤，弃去开始的10 mL，余下作为试样提取液。3. 5. 2 测定3.5.2.1 标准工作曲线的绘制精确吸取d-生物素标准工作熔液(3.2.5.2)0.00、1.00、2.00、5.00、10.00mL于25mL容量瓶中，分别加入乙醇水溶被(.3.2.2)10.00、9.00、8.00、5.00、0.00mL，加入硫酸-乙醇溶液(3.2.3)lmL和4.二甲氨基肉桂醒无水乙醇溶液(3.2.4)2mL，摇匀，室温下放置1h，用元水乙醇(3.2.1)稀释至刻度。用1.0 cm比色皿在500nm580 nm处，用分光光度计扫描吸光度的一阶导数，绘制d-生物素含量与520 nm和546nm处吸光度的一阶导数的峰差值的标准工作曲线。3.5. 2.2 精确吸取3.5.1试样提取液和4二甲氨基肉桂醒无水乙醇溶度。用1.0 cm比色皿在500数的峰差值，在标准工作曲3.6 分析结果的计算和3.6. 1 试样中d-生物式中:3. 7 精密度3.7. 1 重复性在重复性条件不超过5%为前提。3. 7.2 再现性d生物素含量/(mg/kg)土40士60100 100 侵权必究* 书号:155066 1-26934 定价:8.00元版权专有