GB T 26352-2010 蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊生物测定法.pdf

1、ICS 11. 020 C 05 远亩中华人民共和国国家标准GB/T 26352-2010 萤蝶抗药性检测方法德国小蝶生物测定法Test methods of cockroach resistance to insecticides-The bioassay methods for BlaUella germanica 2011-01-14发布数码防伪中华人民共和国卫生部4士中国国家标准化管理委员会保叩2011-05-01实施中华人民共和国国家标准萤蝶抗药性检测方法德国小P:.Jt生物刮定法GB/T 26352 2010 当&中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:1000

2、45 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销当峰开本880X 1230 1/16 印张0.5字数8千字2011年4月第一版2011年4月第一次印刷导节日:155066. 1-42183定价14.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533目。昌本标准按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。GB/T 26352-2010 本标准起草单位:北京市疾病预防控制中心、中国农业大学、中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所。本标准主要起草人:曾晓荒、马彦、高

3、希武、钱坤、薛素琴、佟颖、董言德。I 1 范围萤蝶抗药性检测方法德国小蝶生物测定法GB/T 26352-2010 本标准规定了德国小蝶(Blatutllagermanica)对有机磷类、氨基甲酸醋类、拟除虫菊醋类等杀虫药剂抗药性的诊断剂量法和敏感基线法。本标准适用于德国小蝶抗药性的生物测定。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1 诊断剂量diagnostic dose 由敏感品系的敏感基线计算得到的lj死亡率99%或99.9%相对应的杀虫药剂剂量值。2.2 Fl代Flgeneration 从现场捕捉的德国小蝶，繁殖后在j到的第一代。3 试虫现场采集德国小蝶，室内饲养，Fl代剧化盯7

4、d15 d的雄性成虫。4 试剂丙酣或其他有机溶剂，C02或乙膛，杀虫剂原药5 仪器养虫缸，500mL的锥形瓶，微量点滴器或微量进样器。6 测试条件温度:25oC士1oC，相对湿度:50%80%。7 敏感基线法7.1 原理依据杀虫剂应用剂量和死亡机率值关系建立毒力回归方程，以敏感品系得到的杀虫剂毒力回归线GB/T 26352-2010 作为敏感基线。以待测昆虫种群得到的杀虫剂毒力回归线与敏感基线对比，来确定待测种群的抗性水平。具体是比较两条毒力回归线的b值变化以及由毒力回归线计算得到的半数致死量的变化。7.2 操作步骤7.2.1 药膜法用丙酣或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙

5、酣或其他易挥发的有机榕剂将杀虫药剂母液稀释至一个系列浓度，通过预实验确定药剂的浓度系列范围，最低浓度时死亡率小于20%，最高浓度时大于80%。取不同浓度药剂榕液2.5mL加于500mL锥形瓶中，不断转动锥形瓶，使药液均匀分布于瓶内壁，置于通风橱中过夜，使有机溶剂全部挥发。然后每瓶放试虫10头，用纱网或纱布封口。每个浓度试验重复3次，以相应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡数。7.2.2 点滴法用丙酣或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酣或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释至一个系列浓度，通过预实验确定药剂的浓度系列范围，最低浓度时死亡率小于20%，最高浓度时大于80%。试

6、虫用二氧化碳或乙酷麻醉，用微量点滴器将1L杀虫剂药液点滴于雄性成虫第2、3对足基节间的胸部腹板上，以点滴相应溶剂为对照组。每个浓度试验重复3次。将处理后的试虫转入清洁容器内，供给水和食物。21h后记录死亡数。7.3 死亡判断试虫不能正常爬行或完全不动视为死亡。7.4 结果表述结果用抗性倍数表述，抗性倍数=待测种群LCsoCLDso)值/敏感种群LCsoCLDso)值。7.5 判别标准敏感品系和测定样本95%置信限不重叠，且抗性倍数大于等于5倍为抗性种群。8 诊断剂量法8. 1 原理依据药剂对敏感品系的毒力回归线，确定一个能够区分敏感个体和抗性个体或抗性杂合子的剂量。一般用2倍敏感品系的LDgg

7、CLCgg)值作为诊断剂量。根据待检测德国小镰种群在诊断剂量下的死亡率做为抗性判定标准。8.2 操作步骤8.2.1 药膜法用丙酣或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙嗣或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释到一定的浓度，取2.5r此溶液加于500mL锥形瓶中(锥形瓶内表面药膜的最终剂量达到诊断剂量，常见杀虫药剂对敏感德国小蝶品系的诊断剂量参见表A.1)，不断转动锥形瓶，使药液均匀分布于瓶内壁，置于通风橱中过夜，使有机榕剂全部挥发。然后每瓶放试虫10头，用纱网或纱布封口。试验重复10次，以相应溶剂处理为对照组。24h后记录死亡数。GB/T 26352-2010 8.2.2 点滴

8、法用丙酣或其他的有机溶剂将供试杀虫药剂配成一定浓度的母液。用丙酣或其他易挥发的有机溶剂将杀虫药剂母液稀释到诊断剂量需要的浓度(常见杀虫药剂对敏感德国小蝶品系的诊断剂量参见表A.l)。试虫用二氧化碳或乙酷麻醉，用微量点滴器将1L杀虫剂药液点滴于雄性成虫第2、3对足基节间的胸部腹板上，以点滴相应溶剂为对照组。每次测定至少处理100头试虫。将处理后的试虫转入清洁容器内，供给水和食物。24h后记录死亡数。8.3 死亡判断试虫不能正常爬行或完全不动视为死亡。8.4 结果表述结果用死亡率表述，计算见公式。)。式中:M 死亡率;Nm一死亡虫数;N 一试虫总数。M=安X1. ( 1 ) 对照死亡率小于5%元需

9、校正;对照死亡率在5%20%之间，用Abbott公式进行校正;对照死亡率大于20%为无效测定。依据Abbott公式校正死亡率，计算见公式(2)。式中:Mm 校正死亡率;M，处理组死亡率;M , 一对照组死亡率。8.5 判别标准校正死亡率小于80%为抗性种群。必4二Mm -一:X 100% 1-M, . ( 2 ) EON-NSNH闰。G/T 26352-2010 附录(资料性附录)常见杀虫药剂对敏感德国小蝶晶系的诊断剂量A 表A.l给出了常用杀虫药剂对敏感德国小蝶品系的诊断剂量。常见杀虫药jllJ对敏感德国小蝶品系的诊断剂量诊断剂盐(点滴法)诊断剂茧(药膜法)杀虫药剂LC LC g/头mg/L 残杀威(propoxur)1. 0 1. 1X10-4 主4菊醋(permethrin) 1. 5 澳刽菊酶(deltamethrin) 0.1 级低菊酶(cypermethrin) 0.5 敌敌畏(DDVP)1. 0 3.5X lO-4 注:敏感品系来自北京市疾病预防控制中心医学昆虫饲养室，测定时间为2004年10月。表A.1侵权必究书号:155066.1-42183定价:* 版权专有14.00豆。GB/T 26352-2010 打印日期:2011年5月4日F002A