JY T 026-1996 圆二色谱方法通则.pdf

1、现代分析仪器分析方法通则圆二色谱方法通则JY/T 026一1996General rules for circular dicbroism spectrometer 1997-01-23发布1997-04-01实施 前日本标准的编写格式和方法符合GB/T1.1-1993，GB/T1.4-1988A / E A 俨iIIll-JC Z R C为常数，对CD带求职分B当9000 +900时，R为正信号s当908180时，R为负倩号.因此，m和的相对取向确定了CD的得号，从而可以在-些情况下将其与绝对掏型相关。如果某-给定的光活性分子有正的CD信号.则真对映体必然会有同样强度的负CD倚号.引入一个披

2、挂依赖的量.各向异性因子gg=2A1=2(L句)/(L+句或g4R/Dg是一个完全吸收带的数值事征，R和D分别为旋光和偶极强度.R可以从CD谱，D可从吸收谱中测定.因此，g=4meos81.缉捕m/该各向异性因于是磁偶极与电偶极跃迁之比的If量.晴子电子11迁的CD，g在10-到10 间，而对于振动的CD，则在10;到10寸间.CD不但可以用来确定手幢分子的绝XP梅型，而且已广泛地用于生物高分子(置自、核酸、糖等的掏悻研究.5 试剂和材料6仪器6. 1 仪器组成通常使用的圆二色光谱仪主要由光源部分、单色圃铺摄光的严生、试悻部分相测光部分构成.如下图示医重遭到理鱼堕鱼壁主主生堕到匮重重jf盛董事

3、至重6.2 仪器性能接中华人民井相国国章教育委员会圆二色仪计量撞定规程JJG(.)026-凹进行检走校准后，仪器应有以下性能.406 JY/T 026-19% ?些更因lBO-700nm范围内立6mm 阳7 m mh 阳1冶士m阳m55 o m土阳3m mn muD m 恤8 度确己度准H确仅U准揽2 咀一一系江一性显二现一白皮1一重一敏因一一灵: 在290nm处椭圆度l四4m重复扫描相互偏盖小于1m灵敏度换档树.CD峰值相差小子2m7样品飞7.1 液体样品样品必须透明，如有量浮或沉淀，则需过撞或离心以除去沉滤a在测定的光谱植围内.吸光度值不应超过2.O.最优信唱比的吸光匮值为O.86.需据此

4、来选择告适的样晶浓度、光再任和研究范围内溶剂的透明度，7.2 固体样品单晶样品，需足够大且需合适的样品裂5部腹样品，可以矗透明的无视固体薄膜.也可以是有机高分子薄脯，由被悻样晶快速峙却形成透明的董璃事梓晶.所有固体样晶的吸光厦值也不应大于2.O. 8分析步骤8.1 开机，预热30min后进行测定z8.2 检测前的准备按JJG(截晏)626-1996进行检查和校准，8.3工作条件的选择在微机上或手动选择以下条件(1)世定波i:范围租披任扩属(2)选择灵敏度(3)选择时间常数(4)选择扫描速度(5 )挟缝(6)军位选择8.4 常规测定高灵敏度时，接8.5方法进行测定.()试样肇入样品池井放进样品罪

5、，(2)按8.3选择测定矗件。(3)调好革和纸位置(的在选择的搜i:范围内进行扫描于动或自动(5)取出样晶，换上空白试样，重重(4).空白的测定条件须与样品完全一样-8. 5 高灵敏度测量(1)进行高灵敏度测量时，需选较大的时间常数，较慢的扫描速度，因此测量时间i:.407 lV /T 026-119 (2)仪器的预热时间须足够佳，确认井调节基线在允许施圈，以确保稳定的军点。(3)测量过程同8.4。8.6 测定后仪器的检查测定完成后，取出样品池。切断电源，关闭冷却在和氧气-8.7 数据的整理F列事项记入测定结果中z(1)使用仪器的名林和型号。(2)测定波j;，范围、狭缝宽度。(3)测定灵敏厦、

6、时间常数、扫描速度、扫描次数.(4)测定的磁场强度(对MCJ刀。(5)试样液的成分和溶剂a(6)液池的长度。(7)室内的温度、湿度.(8)再它需要事项.9 测量结果的分析(定性与半定量分析方法)9.1 确认分子是否有于性及于性大小可以从有无CD倍号及其强弱(R或g值的大4叶，来判断所测试样是否有于性及手性大9.2 手性分于的梅型耐究对于手性样品，用圆二色谱分析可以得到其对映体的纯度的情息。比扭扭基酸、子性药物等。9.3 生物高分子的掏悻分析原管CD很少给出绝对的结构信息，它单还是需要与真官方法相比鞍，如X射线衍射、NMR谱等，但是对于生物高分子置白、核酸、精等)构像的变化特别灵敏。如果-个CD南以任何方式改变，则一定有陶惶上的变化.因此.即使结构完圭不知道，CD图真的难以解释，但CD分析时于任何作用引起的陶憧变化，仍是灵敏的检定。而且，吁通过寻找CD光谱的特征变化做到半定量目例如，可从对190nm 240nm伺CD谱的解析来求置白的二级结掏，此件，CD滴定可用来计量地测定与大分子不对称结合的金属离子、辅酶或抑制剂的摩如数.相似地.CDpH滴定可被用来测定色团的茬现结合常数。用CD方法还可对核酸和糖的构幢进行分析c408 u 4