1、GB/T 14926.2594 1 主题内容与适用范围 本标准规定了呼肠孤病毒型抗体的检测方法，试剂等。适用于检测实验小鼠、大鼠、地鼠和豚鼠群的呼肠孤病毒型感染情况。 2 引用标准 GB/T 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 3 设备、材料和试剂 3.1 呼肠孤病毒型（Reo-3）毒种。 3.2 BHK-21细胞系。 3.3 ELISA、IFA和IEA方法所需的设备、材料和试剂见 GBT 14926.18中4.1和4.2。 4 检验步骤 4.1 玻片抗原的制备：Reo-3毒种接种BHK-21细胞，置37温箱34天，细胞病变达“”时涂片。涂片、鉴定和保存见 GBT
2、14926.18中4.2.3。 4.2 ELISA抗原的制备：Reo-3病毒液接种BHK-21细胞，置37温箱35天，细胞病变达“ ”时收获培养物，冻融3次，超速离心收集沉淀物，作为抗原。抗原的滴定、分装 和保存见GBT 14926.18中4.1.2.2。 4.3 阳性血清制备：Reo-3病毒液免疫SPF小鼠、大鼠、地鼠和豚鼠的阳性血清，ELISA滴度11280，IFA和IEA滴度1160。 4.4 阴性血清：确证无Reo-3感染的SPF小鼠和大鼠以及地鼠和豚鼠的血清。 5 检验方法和结果判定 5.1 ELISA法：为首选的方法，使用Reo-3 ELISA抗原，根据待检血清的动物种属采用相应的酶结合物。操作步骤和结果判定见 GBT 14926.18中4.1.3。待检血 清140阳性，经重试或用IFA重试仍为阳性判阳性。 5.2 IFA或IEA法：亦可使用，用Reo-3玻片抗原。根据待检血清的动物种属采用相应的荧光或酶结合物。操作步骤和结果判定见 GB/T 14926.18中4.2.4。待检 血清15阳性，经重试为阳性判阳性。 6 结果报告 根据结果判定作出报告。 页码，1/1GB/T 14926.25942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92625R.htm
