1、GBT 14926.2894 1 主题内容与适用范围 本标准规定了小鼠细小病毒（以下简称MVM）的检验方法、试剂等，适用于检测实验小鼠群的MVM的感染情况。 2 引用标准 GBT 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 GBT 14926.24 实验动物 小鼠肺炎病毒检验方法 3 材料和试剂 3.1 MVM毒种。 3.2 SPF小鼠或大鼠胚原代或次代细胞。 3.3 豚鼠红细胞。 3.4 酶标仪。 3.5 荧光显微镜。 3.6 离心机。 4 检验步骤 4.1 制备血凝素抗原：将MVM病毒接种原代或次代大鼠或小鼠胚细胞，约712天，当细胞病变（CPE）达时收获，经冻融三次，
2、3000rmin离心1015min，取上清液。 4.2 制备ELISA抗原：同上述血凝素抗原，当细胞病变（CPE）达时收获，浓缩提纯方法见GBT 14926.18中4.1.2.2。 4.3 制备IFA，IEA抗原片：当MVM感染鼠胚细胞约712天，将细胞用胰酶消化分散，涂片，制片的操作程序，抗原的鉴定和保存见GBT 14926.18中4.2.3。 4.4 制备MVM小鼠免疫血清：将MVM感染的鼠胚细胞，经冻融，提纯的抗原免疫小鼠，每周腹腔注射一 次，0.1mL只，共四次，第五周放血。 4.5 制备MVM阴性血清：采集无MVM病毒感染的小鼠血清。 5 检验方法和结果判定 5.1 HI法，用8个单
3、位血凝素，待检样品HI抗体滴度达120时判为阳性。方法见GBT 14926.24中5.3。 5.2 ELISA法：见GBT 14926.18中4.1。 5.3 IFA法：见GBT 14926.18中4.2。 页码，1/2GB/T 14926.28942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92628R.htm 当检样出现阳性时，选用同一种方法或另一种方法重试。 如为阳性则判为阳性结果。 6 结果报告 根据判定结果，作出报告。 页码，2/2GB/T 14926.28942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92628R.htm
