1、GBT 14926.3094 1 主题内容与适用范围 本标准规定了兔轮状病毒抗体的检验方法、试剂等。适用于检测兔群的兔轮状病毒感染情况。 2 引用标准 GBT 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 3 设备、材料和试剂 3.1 猴轮状病毒SA11株毒种。3.2 MA-104细胞系。 3.3 ELISA、IFA和IEA方法所需的设备、材料和试剂见GBT 14926.18中4.1和 4.2。 4 检验步骤 4.1 ELISA 抗原的制备：SA11毒种接种MA-104细胞，37孵育23天，细胞病变达“ ”时收获培养物，冻融三次，超速离心收集沉淀物作为抗原。抗原的滴定、分装和
2、保存见GBT 14926.18中4.1。 4.2 玻片抗原的制备：SA11病毒接种MA-104细胞，37孵育23天细胞病变达“”时涂片。涂片、鉴定和保存见GBT14926.18中4.2.3。 4.3 阳性血清的来源：选择自然感染轮状病毒抗体滴度高的兔阳性血清，亦可用SA11病毒液免疫兔获得的阳性血清。 4.4 阴性血清：确证无轮状病毒感染的兔群的血清。 5 检验方法和结果判定 5.1 ELISA法：为首选的方法，使用SA11株的ELISA抗原。酶结合物用抗兔IgG酶结合物或SPA-酶结合物均可。操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.1.3。待检血清140阳性，经重试或用IFA重试仍为阳性判阳性。 5.2 IFA或IEA法：亦可使用，用SA11的抗原片，用抗兔IgG荧光结合物或酶结合物。操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.2.4。待检血清1：5阳性经重试仍为阳性判阳性。 6 结果报告 根据结果判定作出报告。 页码，1/1GB/T 14926.30942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92630R.htm
