1、GBT 14926.3294 1 主题内容与适用范围 本标准规定了大鼠冠状病毒涎泪腺炎病毒抗体的检验方法，设备和试剂等。适用于检测实验大鼠群的大鼠冠状病毒涎泪腺炎病毒的感染情况。 2 引用标准 GBT 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 3 材料和试剂 3.1 大鼠冠状病毒（RCV）毒种。来自美国ATCC。 3.2 鼠肝炎病毒MHV1、MHV3、A59、JHM等的毒种。3.3 大鼠肾原代细胞。 3.4 DBT 传代细胞。 3.5 ELISA、IFA和IEA所需的设备、材料和试剂等见GBT 14926.18中4.1和 4.2。 4 检验步骤 4.1 玻片抗原RCV 接
2、种大鼠肾原代细胞，约2天，待病变达“”时涂片。涂片、鉴定和保存见GBT 14926.18中4.2.3。 4.2 ELISA 抗原：见鼠肝炎病毒检验。 4.3 阳性血清：RCVSDAV病毒液免疫SPF大鼠获得的阳性血清，ELISA滴度11 280，IFA或IEA滴度 1160。 4.4 阴性血清：确证无RCV感染的SPF大鼠群血清。 5 检验方法和结果判定 5.1 ELISA法：是首选的方法，使用鼠肝炎病毒多价ELISA抗原，酶结合物用 抗大鼠IgG辣根过氧化物酶结合物。操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.1.3 待检血清1：40阳性，经重试或用ELISA阻断试验重试仍为阳性判阳性。 5.2 IFA或IEA法：亦可使用，用RCV玻片抗原，用抗大鼠IgG荧光结合物（作 IFA）或抗大鼠IgG酶结合物（作IEA）操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.2.4。 待检血清1：5阳性经重试（本法或另一法）仍为阳性判阳性。 6 结果报告 根据结果判定作出报告。 页码，1/1GB/T 14926.32942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92632R.htm
