GB T 18448.10-2001 实验动物 肠道鞭毛虫和纤毛虫检测方法.pdf

1、ICS 65.020. 30 B 44 国v 中华人民共和国国家标准GB/ T 18448. 1 r-y 18448. 10- 2001 实验动物寄生虫学检测方法Laboratory animal- Parasitological examination methods 2001- 08-29发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002- 05-01实施发布目录GB/ T 18448. 1- 2001 实验动物体外寄生虫检测方法.GB /T 18448. 2- 2001 实验动物弓形虫检测方法.GB /T 18448.3-2001 实验动物兔脑原虫检测方法.9 GB /T 18448.4

2、-2001 实验动物卡氏肺抱子虫检测方法.12 GB /T 18448. 5一2001实验动物艾美耳球虫检测方法.14 GB/T 18448.6- 2001 实验动物蠕虫检测方法GB/T 18448.7-2001 实验动物疤原虫检测方法.20 GB/ T 18448. 8- 2001 实验动物犬恶丝虫检测方法.23 GB/ T 18448. 9- 2001 实验动物肠道溶组织内阿米巴检测方法GB/ T 18448.10- 2001 实验动物肠道鞭毛虫和纤毛虫检测方法.G/ T 18448.10-2001 前本标准由GB/T14926.40-1994(实验动物肠道鞭毛虫和小袋纤毛虫检验方法修订而

3、成。实验动物感染的寄生鞭毛虫和纤毛虫，用直接涂片法很容易检测到。但种类很多，无法一一描述，本标准中仅描述了几个常见代表性种类，除所描述的外，检查到其他种类，也一律判为阳性。本标准由中华人民共和国科学技术部提出井归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李冠民、诸欣平、潘振业、刘兆铭。本标准于1994年1月首次发布。27 中华人民共和国国家标准实验动物肠道鞭毛虫和纤毛虫检测方法1 范围Laboratory animal- Method for examination of Flagellata and ciliata GB / T 18448. 10- 2001 代替GB/T14

4、926. 40- 1994 本标准规定了肠道鞭毛虫及纤毛虫的检测方法和结果判定，并描述了其形态特征。本标准适用于小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠等实验动物肠道鞭毛虫及纤毛虫的检测。2 材料和试剂2. 1 显微镜。2.2 载玻片。2. 3 染色皿。2. 4 Schaudinn氏固定液饱和氯化隶水溶液2份95%乙醇1份混匀后每100mL中加入冰乙酸5mL。2. 5 苏木素染液苏木素染料10 g 95%或100%乙醇100 mL 加塞置室温68周成熟后即可使用。用时1份原液加蒸馆水19份。2.6 2%铁明矶榕液硫酸铁镀2g溶于蒸馆7.)(100 mL中，置于棕色瓶中，4C冰箱保存，以防出现沉积物。3 检测步骤

5、3. 1 直接涂片子载玻片上滴加1滴生理盐水，可直接取新鲜粪便作涂片检查，或解剖动物后立即用接种环挑取新鲜小肠、盲肠、结肠内容物，分别与生理盐水混合涂制成醇而均匀的粪膜。盖上盖玻片后于显微镜下检查。3. 2 苏木素染色用牙签挑取粪便少许，如粪便不易帖于玻片上，可加入适量的血清，均匀涂抹于载玻片上;将粪膜立刻放入40CSchaudinn氏液中3min. 5 min ; 置于50%、70%酒精中各10min ; 置于70%腆酒精中10min;70%酒精中1h或过液(也可放置数日); 转入50%酒精5min，并用水冲洗10min ; 放入40.C0.5%铁苏木素染液中10min，取出于流水中冲洗30

6、min; 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08 -29批准28 2002 - 05 -01实施GB/ T 18448. 10- 2001 2%铁明矶液中褪色10min20 min，褪色过程中应注意观察，具体时间以在显微镜下能看清结构而定;在流水中冲洗10min以上;顺序在50%、70%、85%、95%酒精、纯酒精I、纯酒精E中脱水2min5 min; 以加拿大树胶封片，于显微镜下观察。4 结果判定实验动物寄生的鞭毛虫和纤毛虫种类很多，除本标准描述的种类外，其他种类的鞭毛虫或纤毛虫都可检查到，凡在显微镜下检查到鞭毛虫或纤毛虫的滋养体或包囊都判为阳性。鼠三毛滴虫(Tritricho

7、monasmuris)滋养体呈梨形，有一明显的波动膜呈波浪状运动，虫体以转圈形式运动。大小为(16.-.，26)mX(lO14)m，染色后可见虫体前端有一椭圆形核，从核前端的毛基体发出前鞭毛为3根，后鞭毛即被动膜的游离缘向后行，末端伸出虫体尾端成为游离。鞭毛有一贯穿虫体全长并从尾部伸出体外的轴柱。鼠贾第鞭毛虫(Giardiamuris)滋养体正面观为梨形，侧面观为半月形，虫体运动形式为左右晃动。大小为(7-13)mX(510)m，左右对称，腹面有一大吸盘，两个核位于虫体前部。有4对鞭毛，按部位分为前、后鞭毛、腹鞭毛、尾鞭毛，各1对。包囊为椭圆形，大小为15mX7m，囊壁厚，未成熟包囊有2个核，

8、成熟后有4个核，位于包囊内一端。鼠六丝鞭毛虫(Sp衍。ucleusmur滋养体呈细长形，以直线形式运动，且速度较快。(7.-.9)mX (2-3)m，较其他类鞭毛虫小，左右对称，两个核位于虫体前端，核间的毛基体发出6根前鞭毛和2根后鞭毛，2根轴柱贯穿虫体，但未伸出体外。纤毛虫(Balantidiumspp. )滋养体虫体透明无色或呈淡绿色，外形近似椭圆形，周身纤毛不停振动，且虫体不停转动。虫体前端有胞口，呈短小豆状，后端有一小而不明显的胞缸，有一大一小两个核，大的为肾形，小的为圆粒形，多位于大核凹陆处，虫体中部、后部各有-伸缩泡。体表有许多斜形排列的纤毛。包囊壁稍厚、淡绿色，囊内结构同滋养体，

9、唯食物泡少;新形成的包囊可见囊内虫体仍能活动。5 结果报告根据结果判定，作出报告。CON-g.叮叮FJF.叮叮同筒。人民共和家标准寄生虫学检测方法华国实验动物GB/T 18448.1- 18448.10-2001 国申* 中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045电话:6852394668517548 中国标准出版杜秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售是开本880X12301/ 16 印张2字数45千字2001年12月第一版2001年12月第一次印刷印数1-20001巳峰定价15.00网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-17994