GB T 28095-2011 木层孔褐根腐病菌检疫鉴定方法.pdf

1、ICS 65.020.01 B 16 中华人民GB 共和国国家标准GB/T 28095-20门木层孔褐根腐病菌检疫鉴定方法Detection and identification of Phellinus noxius (Corner)G. Cunn. 2011-12-30发布数码防伪中华人民共和国国家质量监督检验检亵总局中国国家标准化管理委员会2012-06-01实施发布GB/T 28095-2011 目U昌本标准按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会CSAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国宁波出入境检验检疫局检验检疫技术中

2、心、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。本标准主要起草人:张建成、陈先锋、丁国云、张慧丽、戴忠军、张培、王良华。I 木层孔褐根腐病菌检疫鉴定方法1 范围本标准规定了木层孔褐根腐病菌Phellinusnoxius的检疫鉴定方法。本标准适用于木材和苗木上的木层孔褐根腐病菌的检测和鉴定。2 规范性引用文件GB/T 28095-2011 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 12728 食用菌术语SN/T 1126 进出境木材检疫规程SN/T 1157 进出境植物苗木检疫规程

3、3 术语和定义GB/T 12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3. 1 平伏反卷effused-reflexed 担子果在基物上的着生形态，其一部分贴附于基物上，边缘翘起反卷形成檐状、条状、半圆形或扇形菌盖，有时呈覆瓦状叠生。整个担子果贴附于基物上，不形成菌盖的形态称为平伏(eHused)。3.2 生殖菌丝generative hyphae 担子果中基本的菌丝类型。在刺革菌科(Hymenochaetaceae)种类中，生殖菌丝只形成简单分隔，不形成锁状联合，通常元色、浅黄色或浅黄褐色，薄壁或厚壁，分枝或很少分枝。3.3 刚毛状菌丝setal hyphae 在菌肉或菌髓中形态像菌丝，但

4、明显比菌丝宽，且具有厚壁，顶端尖锐的结构。4 木层孔褐根腐病菌基本信息中文名:木层孔褐根腐病菌。学名:Phellinusnoxius(Corner)G. Cunn. 1965。异名:Fomesnoxius Corner 1932;Phellinidium noxium(Corner)Bondartseva &. S. Herrera 19920 病害英文名:brown root rot disease 0 属真菌界Fungi，担子菌门Basidiomycota，担子菌纲Basidiomycetes，刺革菌目Hymenochaetales，刺革菌科Hymenochaetaceae，木层孔菌属Ph

5、ellinus0 木层孔褐根腐病菌的其他信息参见附录Aol GB/T 28095-20门5 方法原理根据木层孔褐根腐病菌在寄主植物上的症状，抽取可疑样品进行病原菌分离培养，根据病原菌的形态特征、生物学特征和PCR特异性反应对病菌进行鉴定。6 仪器和用具6. 1 仪器设备体视显微镜、显微镜(具100X油镜和测微尺)、超净工作台、生物培养箱、冰箱、高压灭菌器、干热灭菌器。6.2 实验用具载玻片、盖玻片、滴管、培养皿、慑子、解剖刀、酒精灯、医用手术剪。7 试剂和材料7. 1 试剂7. 1. 1 蒸馆水CHzO)。7. 1. 2 5%氢氧化拥CKOH)溶液(质量浓度)。7. 1. 3 棉蓝试剂z棉蓝(

6、苯肢蓝)0.5g、乳酸60mL。7. 1. 4 Melz巳r试剂z腆(2)0.5g、腆化饵(KDl.5 g、水20g、水合氯醒22.5g , 7.2 培养基7.2.1 大麦提取物琼脂(MEA)培养基大麦提取物CMaltExtract) 20 g，琼脂CAgar)20 g，加蒸锢水至1000 rnL, 121 .C高压湿热灭菌30 min，倒平板备用。7.2.2 选择性培养基MEA培养基灭菌后，待冷却至40.C50.C，加入100mg氨韦青霉素，10mg氯硝肢，10mg苯菌灵，500mg没食子酸，提匀倒平板。7.2.3 马铃薯葡萄糖琼脂CPDA)培养基自行配制或使用市售PDA培养基。8 现场检测

7、取样和抽样按照SN/T1157或SN/T1126方法进行。取样时应进行针对性检查，检查有无可疑症状，重点观察茎干基部1m范围内区域及根系是否包裹褐色菌丝层;剥去树皮，观察树木组织是否白色腐朽，有无褐色网纹状菌丝束;腐烂树木表面是否有真菌子实体。直接挑出带有可疑症状的货物，将可疑部分切(锯)下，送实验室作进一步检验鉴定。GB/T 28095-20门9 实验室检测9. 1 分离和培养将带病材料用自来水冲洗干净，洁净吸水纸吸干。去除树皮，用消毒的解剖刀片将内部病组织切成约3mmX3mmX6mm小块，置于选择性培养基平板上，每个培养皿放置5块，梅花状排列，30.C黑暗培养5d10 d。选择性培养基上的

8、褐色菌落转移到MEA培养基或PDA培养基30.C黑暗培养。长满平板后，检查培养性状，在光学显微镜下观察菌丝形态特征。9.2 子实体观察如发现病菌子实体，采用宏观形态观察和显微切片方法检测。宏观形态观察使用体式显微镜，观察子实体的形态、色泽、菌盖、菌孔等特征。显微切片检测方法，使用干标本制作成徒手切片，以蒸馆水、Melzer试剂和5%氢氧化饵榕液分别做为浮载剂，在显微镜下观察菌丝及子实层中的担抱子、担子、菌髓等微观特征。显微测量和摄像均在棉蓝试剂包埋的切片中进行。抱子测量30个，其他结构如菌丝直径、担子大小等均测量10个，取极小值与极大值，宽度测量于其结构的最宽部位，长度测量于其顶端至基部分隔处

9、。9.3 PCR检测方法培养物菌丝或病组织中病菌DNA提取和PCR检测方法见附录Bo引物PN-1F/PN-2R扩增病菌DNA，得到414bp或422bp扩增产物，则为PCR检测阳性，反之，为阴性。所有真菌DNA均可与通用引物ITS-1和ITS-2结合扩增产生300bp左右的DNA片段。10 鉴定特征10. 1 寄主上症状树木根和茎基部表面多形成一层厚厚的黑褐色到黑色菌丝壳，坚硬，油浸状表面，根部菌丝壳常与泥沙结合不明显。潮湿时，茎部菌丝壳的延伸边缘乳白色，约2cm宽，带有澄清褐色的渗出液滴。(参见图C.l)树皮易剥落，病害引起软而脆的蜂窝状白色腐烂，受感染树皮内侧组织具不规则暗褐色菌丝束形成的

10、网纹(参见图C.2)。10.2 无性阶段特征10.2. 1 培养性状在含有没食子酸MEA培养基上，能产生扩散性的暗褐色色素。菌落不规则，菌落前缘茵丝气生至平伏，初始白色至草黄色，渐渐转为黄褐色至褐色，有褐色网纹(参见图D.l)。10.2.2 显微特征菌丝透明到褐色，不产生锁状联合，一般能够产生节抱子和毛状菌丝。节抱子(参见图D.2)由菌丝断裂形成，与菌丝同色，球形到卵形。毛状菌丝(参见图D.3)鹿角状，菌丝分叉生长，表面有刺状突起。10.3 子实体形态10.3. 1 整体特征子实体单生，无柄，大小不一，平伏或平伏反卷形成窄的菌盖(参见图C.3和图C.4)，长可达10cm , G/T 28095

11、-2011 宽可达6crn，基部厚可达2.5crn;平伏时长可达40crn，宽可达15crn。新鲜时硬革质或软木栓质，无嗅元昧，干后硬木质。菌盖表面暗褐色至黑色，具不规则的环带，光滑。孔口表面灰褐色至暗褐色，不育的边缘明显，孔口圆形，每毫米7个8个，孔口边缘薄而全缘。10.3.2 微观结构子实体切片分为3部分，最上层表皮为一明显的黑色薄皮壳，中间菌肉层，下层菌管层。菌肉黄褐色，具同心环带，菌肉和菌管之间有一条黑色细线相间。菌管褐色。微观结构参见图D.4。具体结构如下:a) 菌丝结构:担子果内只存在生殖菌丝;菌肉中菌丝为菌肉菌丝，菌管为子实层体，其中的菌丝为菌髓菌丝，菌髓菌丝与菌肉菌丝相似F所有

12、隔膜元锁状联合;在5%KOH试剂中菌丝组织颜色变黑，对Melzer试剂无变色反应，在棉蓝试剂中略变蓝色。担子果菌髓里的刚毛状菌丝顶端钝而菌肉里的刚毛状菌丝顶端锐，是子实体的最重要的鉴定特征。b) 菌肉:生殖菌丝元色，薄壁，偶尔分枝，常具隔膜，平直，规则排列，直径为4rn7rn;刚毛状菌丝褐色至暗褐色，厚壁，内腔宽，通常末端尖，起源于黄色厚壁菌丝，长达数百微米，直径5rn10rn c) 菌管:生殖菌丝很少分枝，常具隔膜，略平行排列，相互紧密新结，直径为3m6m。刚毛状菌丝明显，厚壁并具一狭窄的内腔，顶端困钝，长达数百微米，最宽处直径为7m14.5rno 子实层通常在后期消解;囊状体捏棒状，具长而

13、尖锐的顶部，薄壁，大小为(16m21rn)X(4rn5m);担子近棍棒状，大小为(12rn16rn)X (3. 5rn4m);次生菌丝丰富，无色，博壁，常分枝，直径为3rn5m。d) 抱子:担抱子椭圆形或倒卵形，元色，薄壁，大小为(4rn6m)X (3rn5rn)。10.4 木层孔揭根腐病菌与其近似种的主要区别木层孔褐根腐病菌与其近似种橡胶木层孔菌的主要区别参见附录Eo11 结果判定11. 1 检出子实体，符合10.3的鉴定特征，可直接判为木层孔褐根腐病菌。11. 2 未检出子实体，为害症状、元性阶段培养特征符合10.llQ. 2鉴定特征，判为木层孔褐根腐病菌。11.3 未检出子实体，为害症状

14、不明显，分离得到符合10.2鉴定特征的真菌，PCR特异性反应阳性，可判为木层孔褐根腐病菌。12 标本和样品保存鉴定为木层孔褐根腐病菌的病木保存至少12个月。选择适当的病原菌材料制成永久玻片，分离获得的木层孔褐根腐病菌分离物转移到MEA斜面培养基或PDA斜面培养基或灭菌蒸馆水室温黑暗保存，每6个月转接到新的培养基上保存，并严格防止扩散。妥善保存实验原始记录等材料，以备复验、谈判和仲裁。样品和菌株保存期满后，经高温高压灭菌处理。4 GB/T 28095-2011 附录A(资料性附录)木层孔褐根腐病菌其他信息A.l 分布亚洲:巴基斯坦，菲律宾，马来西亚(西马来西亚、沙巴、沙捞越)，缅甸，斯里兰卡，印

15、度(喀拉拉邦、马德拉斯、迈索尔、东北地区、北方邦、安达曼群岛、尼科巴群岛)，印度尼西亚(爪哇、苏门答腊)，越南，中国(台湾)。非洲:安哥拉，贝宁，布基纳法索，多哥，刚果，加纳，加蓬，喀麦隆，科特迪瓦，肯尼亚，尼日利亚，塞拉利昂，坦桑尼亚，乌干达，中非。美洲z巴西，波多黎各，法属圭亚那，哥斯达黎加，古巴。大洋洲z澳大利亚(昆士兰)，巴布亚新几内亚，北马里亚纳群岛(美属)，斐济，美属萨摩亚，所罗门群岛，瓦努阿图，西萨摩亚，新西兰。A.2 寄主木层孔褐根腐病菌寄主范围很广，寄主包括56科近200种植物(见表A.l)。表A.l木层孔褐根腐病菌的寄主学名中文名学名中文名Acacia aulacocara

16、 纹英相思Atemisia ca乡illaIS茵陈商Acacia confusa 台湾相思Atemisia pinceps 魁篱，艾革Acacia mangium 马占相思Artocarpus heterophyllus 木菠萝Actinodahne pedicellata 小梗木姜子Averrhoa carambola 杨桃Agathis robusta 昆士兰贝壳杉Barleria cristata 假杜鹊Albizia lebbeck 大叶合欢Bauhiniaur甜ea红花羊蹄甲Albizia sp. 合欢属Bauhinia sp. 羊蹄甲属Aleurites fordii 汹桐Bauh

17、inia variegata 宫粉羊蹄甲Aleurites moluccana 石栗Bauhinia hybrid 艳紫荆Alstonia scholaris 糖胶树Bischofia javalca 茄苓Annona X squamosa-cherimola 凤梨释迦Bleharocarya involucrigea 漆树科一种Annona montana 山刺番荔校Boehmeria nivea 芝麻Annona squamosa 番荔枝Bombax ceiba 木棉Annona smosa xA. cherimola 凤梨释迦Bougainvillea sp. 九重葛属Araucaria

18、 cunninghamii 南洋杉Breynia nivosa 彩叶山漆茎Araucaria heteohylla 异叶南洋杉Boussonetia kazinoki 小构树Areca triandra 三药槟掷Boussonetia papyife 构树5 GB/T 28095-2011 表.1 (续)学名中文名学名中文名Cajanuscajan 木豆Cotalaria m icans 黄猪屎豆Calocedrus formosana 台湾肖楠Cycas taiwaniana 台湾苏铁Calohyllum inohyllum 琼崖海棠Dalbergia sissoo 印度黄植Camellia

19、 japonica 山茶Delonix regia 凤凰木C町nelliajaponica var. ja户onzca凤凰山茶Dimocarpus longan 龙眼Camellia sie咀szs茶Diospyros fee且var.趴xifolia象牙树Cassia fistula 腊肠树Diosyros kaki 柿树Cassia grandis 红花铁刀木Diospyros oldhamii 红柿Cassia sp. 铁刀木属Duranta repens 假连翘Casuarina equisetifolia 木麻黄Elaeis guineensis 油棕Cedrela mexicana

20、 墨西哥洋椿Elaeocar卢usserratus 锡兰橄榄Ceiba pentadra 爪哇木棉Eriobotrya ja户onzca枕把Cebe且manghas海芒果Erythrina variegate 刺桐Chamaecyparis formosensis 红栓Eucalyptus camaldulensis 赤按Chlorophora excelsa 绿柄桑Eucalytus citriodora 拧棱按Chorisia secwsa 美人树Eucalytus drepanohylla 纤脉按Chrysalidocarp臼slutescens 散尾葵Eucalytus gandis

21、巨按Cinnamomum camhora 棒树Ficus elastica var. elastica 印度橡胶树Cinnamomum缸nehirai牛榕Ficus hanceana 桑科一种Cinnamomum zeylanicum 锡兰肉桂Ficus microcara 榕Citrus au毡电tifolia莱棱Fic甜5umilavar. awkeotsang 爱玉子Citrus limon 拧攘Ficus religiosa 菩提树Citrus reticulata 柑桶Ficus stenopylla 竹叶榕Cocos nucifea 可可椰子Firmiana simlex 梧桐Co

22、diaeum variegatum 变叶木Flem口19iamacrohylla 大叶千金拔Coffea arabica 小粒咖啡Flindersia brayleyana 昆士兰巨盘木Coffea canehora 中粒咖啡F raxinus formosana 白鸡油Coffea sp. 咖啡属Gardenia jasminoides 黄橙子Cola nitida 可拉Grevillea robusta 银桦Cordia dichotoma 破布木Hedera australiana 五加科一种Crataegus sp. 山植Hevea brasiliensis 巴西橡胶树Crescent

23、ia cujete 葫芦树Hevea sp. 橡胶树Crotalaia anagyroides 三尖叶猪屎豆H ibiscus rosa-sinensis 朱檀Crytocarya concinnai 海南厚壳桂Hibiscus schizoetalus 裂瓣朱模Curessus lusitanica 墨西哥柏木H ibiscus tiliaceus 黄徨6 GB/T 28095-2011 表A.1 (续)学名中文名学名中文名Hydrangea chinensis 中国绣球Ochroma lagopus 轻木Iomoea pescaprae 马鞍藤Osmanthus fragrans 桂花Ke

24、telee任adavidiana v缸.formosana台湾油杉Pachira macocapa 马拉巴栗Kigelia pinnata 腊肠树Palaquium formosanum 大叶山榄Kissodendron austalianum 五加科一种Peltohorum inerme 盾柱木Koeleuteia hen.yi 台湾奕树Persea americana 鸽梨Lactuca indica 山窝宦Persea gratissima 鸽梨Lagerstroemia seClOsa 大花紫薇Pinus elliottii 湿地松. Lagerstroemia turbinata 棱

25、等紫薇Pinus elliottii var. elliottii 湿地松Lantana camara 马续丹Pinus thunbergii 黑松Leucaena X glabrata-leucocephala 银合欢Pipenigrum 胡椒Leucaena leucocehala 银合欢Pistacia chineSlS 黄连木Liquidambar formosana 枫香Podocapus macrohyllus 罗汉松Litchi chinensis 荔枝Podocarpus macrohyllus var. 罗汉松Litsea glutinosa 潺高树macophyllus L

26、itsea hypophaea 小梗木姜子Pongamiainnata 水黄皮Macaranga tanarius 血桐Populus sp. 杨树属Machilus zuihoensis 香楠Prunus campanulata 山樱花此Iaesatenera 台湾山桂花Prunus mume 梅Mallotusaniculatus 白揪Prunus persica 桃Mangifera indica 芒果Pterocarpus indicus 印度紫植Manihot utilissima 木薯Pyrus pyrifolia 沙梨Melaleuca leucadendon 白千层Rhodod

27、endron obtusum 杜鹊 Melia azedarach 楝Rosa sp. 蔷薇属Melicoe merilli 山川菜Roystonea regia 大王椰子Melodinus angustifolius 台湾山橙Salix babylonica 垂柳Michelia comessa 乌心石Saurauia oldhamii 水冬瓜此Iicheliacompressa var. formosana 台湾乌心石Schefflera octophylla 鹅掌柴Micheliaf王go含笑花Schinus terebinthifolinus 巴西乳香Muntingia calabur

28、a 西印度樱桃Stenocarpus sinuatus 火轮树Murrayaaniculata 千里香Sterculia foetida 掌叶苹婆Muruya panidata var. panidata 月桶Sterculia nobilis 苹婆Neolitsea pavigemma 小芽新木姜子Swietenia macrophylla 大叶桃花心木Nephelium lapaceum 红毛丹Swietenia mahagoni 桃花心木Nerium oleander 洋夹竹桃Syzygium samarangense 莲雾7 GB/T 28095-20门表A.l(续)学名中文名学名中文

29、名Tabebuia chysa白tha黄钟木Theobroma cacao 可可Taiu皿niacrytomerioides 台湾杉Thevetiaeruviana 黄花夹竹桃Tectona gradis 拙木Ulmus户arvifolia掷榆Tephosia sp. 灰毛豆属Urena lobata 中华地桃花Tephrosia vogelii 非洲山毛豆的tisvinifera 葡萄Teminalia boivinii 小叶榄仁Zelkova serata var. serata 书在Terminalia catap 榄仁. 8 GB/T 28095-2011 B. 1 仪器和用具B. 1

30、. 1 仪器设备附录B(规范性附录)PCR检测方法普通天平(感量为0.01g)、高速冷冻离心机、冰箱、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统。B. 1.2 实验用具可调微量加样器(2L、10L、100L、1000L)、离心管(1.5 mL)。B.2 试剂B.2.1 元菌双蒸水(ddH20)、液氮(Nz)、2斑基乙晖、聚乙烯毗咯皖酣(PV町、元水乙醇、氯化镜(MgC12)、TaqDNA聚合酶、10XPCR缓冲液、琼脂糖、DNA相对分子质量标记(100bp 1 000 bp)、10X上样缓冲液。B.2.2 2%CTAB提取缓冲液:2%十六烧基三甲基澳化镇(CTAB)(质量浓度)、0.01mol/L三是甲基

31、氨基甲烧盐酸盐(Tris-HCD(pH8. 0)、0.02mol/L乙二股四乙酸(EDTA)、1.4mol/L氯化铀(NaCD。B.2.3 三氯甲炕/异戊醇:体积比24: 1。B. 2. 4 TE缓冲液(pH8.0) : 10 mmol/L Tris-HCICpH8. 0)、1mmol/L EDTA(H8. 0.)。B. 2. 5 dNTP混合物:包括dATP、dTTP、dCTP、dGTP，每种浓度各2.5mmol/L。B.2.6 引物:根据表B.1和表B.2中序列合成引物，加元菌双蒸水配制成10mol/L。引物PN-IF PN-2R 引物ITS-l ITS-2 表B.1特异性引物序列5人3A

32、GT TTG CGC TCA TCC ATC TC AGC CGA CTT ACG CCA GCA G 表B.2真茵通用引物序列5-3TCC GT A GGT GAA CCT GCG G GCT GCG TTC TTC ATC GAT GC B. 2. 7 EB储存液z滇化乙链(EB)加元菌双蒸水配制成10mg/mL。B. 2. 8 5XTBE电泳缓冲液:Tris-HCl 54 g、副酸(H3B03)27.5g、0.5mol/L EDTA(pH8. 0)20 mL, 加蒸锢水至1000mL，使用时10倍稀释。9 GB/T 28095-20门B.3 病菌DNA提取不同组织DNA提取方法如下，也可

33、使用市售DNA提取试剂盒提取。B. 3.1 菌丝体DNA提取制备用菌丝体约0.2g于研钵中用液氮冷却，研成细粉，迅速将其放入1.5 mL离心管中加入少量的PVP，500L的2%CTAB提取缓冲液，20L2-疏基乙醇，轻轻混匀，置65.C水浴锅中温浴1h。取出加入等体积的三氯甲烧/异戊醇混匀，抽提，4.C下离心10minCl 2 000 r/min)，吸取上清液，移入另一支1.5 mL离心管中。重复用三氯甲:皖/异戊薛抽提，使蛋白质层沉淀完全。吸取上清液，置于一新的离心管中。加入2倍体积-20.C预冷的无水乙醇，混匀后，离心10minCl 2 000 r/min).将所得DNA沉淀用70%乙醇洗

34、2次。自然干燥，溶于100L150LTE中，贮存于一20.C冰箱中备用。B.3.2 病组织DNA提取将病组织切成小块，以液氮冷冻后研磨成扮，取0.2g粉末，DNA提取方法与B.3. 1菌丝体DNA提取方法相同。B.4 PCR扩增扩增引物两对，其中PN-1F和PN-2R为木层孔褐根腐病菌DNA的特异性引物(见表B.口，ITS-1 和IT5-2为真菌ITS区通用引物(见表B.2)。PCR扩增反应体系见表B.3.PCR扩增反应程序为:94 .C 3 min; 94 .C 30 s , 60 .C 30 s , 72 .C 45 s , 35个循环;72.C10 min.使用通用引物IT5-1和ITS

35、-2扩增，退火温度改为52.C，其他条件不变。扩增后产物置于一20.C保存备用。表B.3木层孔揭根腐病菌特异性PCR反应体系25L反应体系试剂名称储备液浓度加样体积L 10XPCR缓冲液2.5 MgCl, 25 mrnol/L l. 5 dNTP混合物2. 5 rnrnol/L 2 TaqDNA聚合酶5U/L 0.2 引物10 fLrnol/L 各0.5DNA模板50 ng/flL-100 ng/flL 1-2 ddH,O 补至25LB.5 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖加入0.5XTBE电泳缓冲液，加热溶解，加入EB储存液至终浓度为1L/mL，制成1.5%浓度琼脂糖凝肢。将5L10L的DNAMarke

36、r和PCR扩增产物分别与适量的上样缓冲液混合，点样。5V/cm恒压，电泳20min30 mino紫外凝肢成像系统下观察电泳结果，拍照并记录结果。GB/T 28095-20门附录C(资料性附录)木层孔褐根腐病菌为害状图C.l树皮内侧不规则暗褐色菌丝束形成同纹圄C.2 Phellinus noxius为害症状图C.3 Phellinus noxius平伏担子果图C.4 Phellinus noxius平伏反卷担子果11 GB/T 28095-2011 附录D(资料性附录)木层孔揭根腐病菌形态特征图 图D.1 Phellinus noxius培养性状图D.2 Phellinus noxius节抱子1

37、2 4移俨圄D.3 Phellinus noxius毛状菌丝。1 5m 二二5 10m 1一一担抱子;2一袋状体;3一一担子;4一一菌髓中的刚毛状茵丝;5-一一菌肉中的刚毛状菌丝;6一一菌髓菌丝;7 茵肉茵丝。二?1飞L二士-d二L2 10m 至二三口系-JJ二乙3 10m J4 6 10m 4 10m 图D.4 Phellinus noxius子实体显微结构7 10m GB/T 28095一-201113 GB/T 28095-2011 附录E(资料性附录)木层孔揭根腐病菌与其近似种的主要区别表E.1木层孔揭根腐病菌与其近似种的主要区别种类主要区别木层孔褐根腐病菌橡胶木层孔菌学名Phelli

38、nidium noxium Phellinus lamansis 菌髓中刚毛状茵丝直径7m14. 5m 4m7m 刚毛状茵丝占菌髓比重少数多数菌髓中刚毛状菌丝相对于生殖明显厚稍厚菌丝细胞壁厚菌髓中刚毛状菌丝形态埋生在菌髓中，顶端圆钝伸出子实层，顶端尖锐菌管内腔有无子实层刚毛无有，红色、短而尖锐围绕根茎形成菌丝壳形成不形成致病性及生境寄生，阔叶树活立木基部及腐朽腐生，阔叶树腐木、倒木根部14 FFONlmgNH因。华人民共和国家标准木层孔揭根腐病菌检疫鉴定方法GB/T 28095-2011 国白非中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张1.25 字数27千字2012年4月第一次印刷开本880X12301/16 2012年4月第一版争e21.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107定价书号:155066. 1-44651 GB/T 28095-2011 打印日期:2012年5月22H F002