GB T 8312-1987 茶 咖啡碱测定.pdf

1、 中华人民共和国国家标准 茶 咖啡碱测定 GB/T 8312 87 T ea- D et erm in at ion of caf f ein e con t en t 本标准适用于茶叶中咖啡碱的测定。 在茶叶水浸出物中除去叶蛋白、茶多酚等物质后,留下的生物碱其测定波长为 274nm 者,均称茶叶咖啡碱。 1 原理 茶叶中的咖啡碱易溶于水,除去干扰物质后,用特定波长测定其含量。 2 仪器和用具 实验室常规仪器及下列各项: 2.1 紫外分光光度仪。 2.2 分析天平: 感量 0.0001g。 3 试剂和溶液 本标准所用试剂,除另有规定外,均为分析纯(AR); 水为蒸馏水。 3.1 碱性乙酸铅溶液

2、: 称取 50g 碱性乙酸铅(HG 3 139681),加水 100mL,静置过夜。 3.2 盐酸(GB 622 77): 0.01N 溶液, 取 0.9mL 盐酸,用水稀释 1L,摇匀。 3.3 硫酸(GB 625 77): 9N 溶液,取硫酸 250mL,用水稀释至 1L,摇匀。 3.4 咖啡碱标准液: 称取 100mg 咖啡碱(纯度不低于 99)溶于 100mL 水中,作为母液,准确 吸取 5mL 加水至 100mL 作为工作液(1mL 含咖啡碱 0.05mg) 。 4 操作方法 4.1 取样 按 GB 830287茶 取样的规定取样。 4.2 试样的制备 按 GB 830387茶 磨碎

3、试样的制备及其干物质含量测定的规定,制备试样。 4.3 测定步骤 4.3.1 试液的制备 按 GB 830587茶 水浸出物测定中 3.4.1 的规定,制备试液。 4.3.2 测定 用 移液管 准 确 吸取试 液(4.3.1)20mL 移入 250mL 容 量瓶中,加入 10mL0.01N 盐酸(3.2) 和 2mL 碱性乙酸铅溶液(3.1), 用水准确稀释至刻度,充分混匀,静置澄清过滤,准确吸取滤液 50mL,注入 100mL 容量瓶中,加入 0.2m19N 硫酸溶液(3.3), 加水稀释至刻度,混匀,静置澄清 过滤。用 10mm 比色杯,在波长 274nm 处,以试剂空白溶液作参比,测定吸

4、光度(A) 。 4.3.3 咖啡碱标准曲线的制作 分 别吸取 0 、5 、10、15 、20 、25 、30mL 咖 啡碱工作 液(3.4) 于一 组 100mL 容量 瓶中, 各 加入 4.0mL 盐酸溶液(3.2), 用水稀释至刻度,混匀, 用 10mm 石英比色杯,在紫外分光光度仪 上选择狭缝 0.10.18mm,在波长 274nm 处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。将测 得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。 5 结果计算 5.1 计算方法和公式 茶叶中咖啡碱含量,以干态质量百分率表示,按下式计算: C 250 100 L1 1000 20 50 咖啡碱( )100 M

5、m 式中:C根据试样测得的吸光度(A), 从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量,mg/mL; L1 试液总量,mL; M 试样用量,g; m 试样干物质含量百分率。 如果符合重复性(5.2) 的要求,取两次测定的算术平均值作为结果。 5.2 重复性 同一样品的两次测定值之差, 每 100g 试样不得超过 0.2g。 6 结果报告 试验报告应包括下列内容: a. 使用的方法; b . 测定的结果(取小数点后一位); c. 本标准中末规定的或另加的操作; d . 试样的名称和产地; e. 试验日期,操作人员。 附加说明: 本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。 本标准由中国农业科学院茶叶研究所、商业部杭州茶叶加工研究所和上海进出口商品 检验局负责起草。 本标准主要起草人李名君、钟萝、严家辉、程坤、郭雯飞、王济安。 中华人民共和国商业部 1987-11-19 批准 1988-07-01 实施