WS T 49-1996 尿中苯酚的气相色谱测定方法.(一)液晶柱法.pdf

1、中华人民共和国卫生行业标准尿中苯盼的气相色谱测定方法(一)液晶柱法Urine-Determination of phenol-Gas chromatographic method-I Liquid crystal column 1 主题内容与适用范围本标准规定了尿中酷的气相色谱测定方法(一)液晶柱法。本法最低检测浓度为0.1mg/L。WS/T 49-1996 本标准适用于正常人和接触苯及接触苯盼和甲酣工人尿中对、邻、间甲酣的测定。2 原理尿样经加热酸解，乙酷萃取出苯酣，经液晶PBOB柱将苯酣及邻、间、对位甲酣分离后，用氢焰离子化检测器检测，以保留时间定性，内标法峰高比定量。3仪器3. 1 气相

2、色谱仪、氢焰离子化检测器。3.2 电热恒温水陷。3. 3 冰壶。3.4 容量瓶，50mL。3. 5 具塞离心管;或具塞试管，10mL。3. 6 聚乙烯塑料瓶，150mL。3. 7 微量注射器，10L。3.8 尿比重计。4 试剂本标准所用试剂除另有说明者外均为分析纯级。4. 1 实验用水:重蒸锢水或具同等纯度的去离子水。4.2 盐酸，P20=1.19 g/mL。4.3 无水乙醋。4.4 二氯甲:皖(用作固定液潜剂)。4.5 固定液z液晶-双-(对-辛氧基苯甲酸)对苯二酣醋CPBOB)。4.6 担体:ChromosorbW-AW-DMCS，80100目。4. 7 苯酣标准溶液:称取0.0250 g

3、苯酶，溶于少量蒸馆水中，将此溶液转移至50mL容量瓶中，加水至刻度，此溶被1mL=500g苯酣，为标准贮备液。取贮备液用水稀释成1mL=100周苯酣为标准应用液。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施WS/T 49-1996 4.8 内标(硝基苯)榕被:称取0.0250 g硝基苯，榕于蒸馆水中，转移至50mL容量瓶中，加水至刻度，此榕被1时，=500g硝基苯。4.9 质控样:用加标的模拟尿、接触者强合尿或加标的正常人?昆合尿作质控样。5 采样、运输和保存用聚乙烯塑料瓶收集约50mL班末尿，尽快测定比重，于室温下运输，夏季运输时最好冷藏，置4C冰箱中存放可保存两周。

4、6 分析步骤6. 1 仪器操作条件色谱柱:柱长2m.内径3mm.不锈钢或玻璃柱。担体:固定液z磷酸z载体=15: 0.5: 1000 150C通氮气老化8h。柱温:每次实验开始，在140C恒温1h.降至112C稳定后工作。汽化室温度:180C。检测室温度:160C。载气:氮气.20mL/min。6.2 样品处理取5mL尿样(5)于具塞试管中，加入1mL盐酸，摇匀，加塞。于90C水浴恒温1h后，取出冷至室温，加0.2mL内标溶液(4.的，加水稀释至10mL.放冰水浴冷至OC(约5min)。各加3mL乙酿，加塞振摇1mino静置分层，必要时离心。6. 3 标准曲线的绘制6. 3. 1 取7只10m

5、L具塞试管，分别加入0.0.25.0.50.1.0.2. 0.4. 0.6. 0 mL苯酣标准应用液(4.7) 各加水(4.1)至6mL.然后分别加入0.2mL内标榕液(4.的.1.0 mL盐酸(4.2).并加水至10mL刻度，摇匀。此时标准管系列中苯酣浓度分别为0.2.5.5.0.10.0.20.0.40.0.60.0mL/L。6. 3. 2 上列标准管各加3.0mL无水乙酶，加塞振摇1min后，静止分层，取5L乙酷萃取液进样测定。以苯酣浓度Cmg/U为横坐标，苯酣峰高与内标峰高比为纵坐标，绘制标准曲线。2 o 2 4 6 8 10 12 14 16 18 时间，mln酣的棍合标样色谱图l

6、苯盼;2邻甲盼;3间甲盼;4对甲盼WS/T 49-1996 6.4 样品测定取经处理的样品乙酷液(6.2)5L，进气相色谱仪测试。见上图。根据测得的苯酣峰高与内标峰高比值查标准曲线，再根据公式进行计算。7 计算7.1 按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数伪)。7.2 按式(2)计算尿中苯酣的浓度。式中:X一一尿中盼的浓度，mg/L;h1.020-1.000 一一实测比重一1.000X一巳羊旦-V c一一由标准曲线查得的苯酣浓度，mg/L;V一一尿样体积，mL;10-尿样处理时加水至10mL体积。8 说明. ( 1 ) . ( 2 ) 8. 1 本标准尿液中最低检测浓度

7、为0.1mg/L(检测限1.25 ng)，标准曲线线性范围0-60mg/L(苯酣量0-1000 mg);精密度T=1.0%-3.1%(酣浓度为5-40mg/L，n=6);加标回收率为77.5%-81. 0% (尿样本底浓度为6.9-34.0mg/L，加标量10-40mg/L，n=6)。8.2 对正常人，一般都取晨尿分析。对接触者因开始接触苯后尿酣浓度迅速上升，脱离接触后又很快下降，故取班末尿为宜。采集尿样时应注意防止污染。采样后测量比重，尽快运回实验室，如暂不进行分析需存放在40C冰箱中。8. 3 本法采用酸解法处理样品，同美国NIOSH采用的方法一致。德国用水蒸气蒸馆法处理样品。二法相比，测

8、得结果相同，但酸解法更为简便实用。8.4 乙酷与异丙酷都可作萃取剂。异丙酷不与水互溶，沸点高，色谱峰窄，但价格较贵。故推荐乙酷为萃取剂，但乙酷在水中有一定溶解度，且易挥发，萃取前后的样品及接触乙隘的器皿要放在冰瓶中，并尽快进行分析。8. 5 本法苯酣贮备液和标准应用液均配制在水溶液中，可于40C冰箱中保存备用。标准管与尿样采用相同萃取步骤和操作，可补偿因乙酷在水中有一定溶解度所引起的测定误差。8.6 亦可采用外标法定量，对标准系列和样品管中都不用加内标液，直接以峰高定量。但在萃取和进样时须仔细操作。8. 7 液晶柱可分离苯酣及邻、间、对位甲酣，不仅适用于接触苯者的生物监测，且适用于接触甲苯者的生物监测。8.8 质控样用加标的模拟尿时可考察准确度和精确度。用接触者尿或加标的正常尿时可考察精密度。但人尿不易久存。模拟尿只含人尿中大量成分。附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由上海医科大学公共卫生学院负责起草。本标准主要起草人陆培坤、张如午。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。