WS T 50-1996 尿中苯酚的气相色谱测定方法.(二)FFAP 柱法.pdf

1、中华人民共和国卫生行业标准尿中苯盼的气相色谱测定方法(二)FFAP柱法Urine-Determination of phenol-Gas chromatographic method n FF AP column 1 主题内容与适用范围本标准规定了尿中酣的气相色谱测定方法(二)FFAP柱法。本法最低检测浓度为1.5 mg/L。本标准适用于正常人和接触苯工人尿中苯盼的测定。2 原理WS/T 50 -1 996 尿样加盐酸加热，使结合态的酣水解，乙酷萃取，经FFAP柱将尿中苯酣及人体正常代谢物对甲酣分离。用氢焰离子化检测器检测。以保留时间定性，外标法峰高定量。3仪器3.1 气相色谱仪，氢焰离子化检

2、测器。3.2 电热恒温水洛。3.3 冰壶。3.4 容量瓶，10mL.50 mL。3. 5 具塞离心管.10mL。3. 6 聚乙烯塑料瓶.150mL。3. 7 尿比重计。4 试剂本法所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4.1 实验用水:为经全玻璃蒸馆器蒸馆的水。4.2 盐酸，20=1. 19 g/mL。4.3 无水乙醋，用前重蒸。4.4 固定相:FFAP改性的聚乙二醇)。4.5 载体:ChromosorbW HP.80100目。4.6 苯盼。4. 7 苯酣标准溶掖:称取苯酣0.0125 g溶于少量无水乙酷中，将此榕液定量转移至50mL容量瓶中，用无水乙酷稀释至刻度。此标准溶液1mL=O. 2

3、5 mg苯盼。4.8 质控样:用加标的模拟尿、接触者?昆合尿或加标的正常人混合尿作质控样。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施WS/T 50-1996 5 采样、运输和保存用聚乙烯塑料瓶收集班末尿约50mL，尽快测定比重，于室温下运输，但夏季运输需要冷藏，于一8C下可保存一周。6 分析步骤6. 1 仪器操作条件色谱柱z柱长2.5m，内径3mm.玻璃柱。固定液z载体=10:100。柱咀:165C。汽化室温度:180C。检测室温度:180C。载气:氮气，45mL/min。6.2 空白试验用模拟尿按6.3条处理、6.5条测定。6.3 样品处理取5mL尿样于具塞试管中，

4、加入mL盐酸，于90C水浴中加热水解1ho取出放冷，加水稀释至10 mL。置冰浴中冷至OC.加入3mL乙醋，振摇1min萃取，静置分层，将乙酷层补足至体积为3mL , 必要时离心。6.4 标准曲线的绘制取3只10mL容量瓶，按下表配制标准管。管号苯盼标准溶液(4.7).mL 乙酶.mL苯盼含量，问苯酣标准管的配制1 O. 6 9.4 15 2 1. 2 8. 8 30 3 2.0 8. 0 50 取2L上述标准管中潜液，进气相色谱仪测试。以苯酣的含量(ng)为横坐标，峰高(mm)为纵坐标，绘制标准曲线。6.5 样品测定取2L经处理的样品乙酷掖(6.3)，进气相色谱仪测试，见图1。根据测得的苯盼

5、峰高值查标准曲线(6.4).再根据公式(1)、(2)进行计算，得标准比重下的尿酣浓度。7 计算WS/T 50-1996 。6 12 m且a图1接触者尿酣气相色谱图1一苯盼，253.4mg/LI2一对申盼7. 1 按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数儿k = 1.:.?0-1._00_0 一一实测比重-1. 000 7.2 按式(2)计算尿中酣的浓度。x c b =一.-a V 式中:x一一尿中盼的浓度.mg/LIc一一由标准曲线查得的苯酣含量.ngla一一进样量，LIb一一乙酷提取液体积.mLIV一一-尿样体积.mL。8 说明.( 1 ) ( 2 ) 8. 本法最低检

6、测浓度为1.5 mg/L (取尿样5mL)，标准曲线线性范围0-50mg/L，精密度CV=3. 3%-5. 4% (酣浓度为15-50闯/mL.n=6).加标回收率为82.8%-87.0%(尿样本底浓度25.2-116.4g/mL.加标量34.5-69mg/L.n=2)。8.2 一般对正常人取晨尿分析，对接触者取班末尿分析。采样时应注意防止活染。采样后须将塑料瓶盖旋紧，并尽快运输，以避免苯酷的挥发及氧化。8.3 影响测定的因素WS/T 50-1996 8.3.1 样品酸解后加入乙酷提取，乙酷在水中有一定的溶解度，并可能有挥发损失，所以提取后须将乙酷层定容。实验过程中，为尽量避免乙酷的挥发损失，

7、应特别注意冷操作，凡接触乙酷的实验器具应预先在冰箱或冰壶中存放。8.3.2 本法采用峰高、外标法定量，气相色谱操作条件对测定的影响较大。柱温、载气流速均影响峰高，操作时应注意保持恒定。由于使用外标法定量，进样量的准确性亦是保证本法准确度的一个重要因素。8.4 对甲酣为人尿中的正常成分，可与被检物苯酣共存。采用FFAP柱在本法设定的条件下可将苯酣与对甲酣分离，分离度1.25。8.5 质控样用加标的模拟尿时，可考察准确度和精确度，用加标的正常人尿或接触者尿时只能考察精密度。人尿不易保存。模拟尿只含人尿的大量成分。附加说明:本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责起草。本标准主要起草人线引林、李晓立。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。