GB T 18932.22-2003 蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法 液相色谱示差折光检测法.pdf

1、GB/T 18932.22-2003 前百主FE司GB/T 18932的本部分等问采用加拿大标准ACC-017-V2.0(蜂蜜中糖类的测定液相色谱法) 只对个别内容作了编辑性修改。本部分的附录A为资料性附录。本部分由中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局提出。本部分由中华全国供销合作总社归口。本部分负责起草单位g中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。本部分参加起草单位s国家蜂产品质量监督检验中心。本部分主要起草人z庞国芳、曹彦忠、李子健、贾光群、范春林、张进杰、李学民、石玉秋。本部分系首次发布的国家标准。I GB/T 18932.22-2003 1 范围蜂蜜中果糖、葡萄糖、黯糖、麦芽糖含量的测定

2、方法液相色i普示差折光检测法GB/T 18932的本部分规定了蜂蜜中果糖、葡萄糖、庶糖、麦芽糖含量的测定方法。本部分适用于蜂蜜中果糖、葡萄糖、萧糖、麦芽糖含量的测定。本部分的方法检出限2果糖、葡萄糖、麦芽糖为0.5%，原糖为0.2%。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T 6379测试方法的精密度通过实验室间实验确定标准测试方法的重复性和再

3、现性(GB/T 6379-1986 ,neq ISO 5725 ,1 981) GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-1992 , neq ISO 3696: 1987) 3 原理试样用水溶解，乙脯定容后，经0.45m滤膜过滤，液相色谱示差折光检测器测定，外标法定量。4 试剂和材料4. 1 乙腊2色谱纯。4.2 水:GB/T6682规定的一级水。4.3 果糖、葡萄糖、庶糖、麦芽糖标准物质2纯度二三99%。4.4 果糖、葡萄糖标准储备溶液2准确称取5g果糖标准物质和4g葡萄糖标准物质，精确至0.0001g，放入同一100mL容量瓶中，加人60mL水溶解，用乙腊定容至

4、体积，摇匀。4. 5 jW，糖、麦芽糖标准储备溶液:分别称取2g jW，糖和2g麦芽糖标准物质，精确至0.0001g，放入同100 mL容量瓶中，加入60mL水溶解，用乙腊定容至体积，摇匀。4.6 果糖、葡萄糖、煎糖、麦芽糖标准工作溶液-吸取不同体积的果糖、葡萄糖标准储备溶液(4.的和静、糖、麦芽糖标准储备溶液(4.5) ，用乙脯十水(40+60)稀释至体积，配成不同浓度的果糖、葡萄糖、煎糖、麦芽糖标准工作溶液，用于绘制标准工作曲线。每种标准储备溶液的用量和定容体积见表l，表1果糖、葡萄糖煎糖、麦芽糖定容体积/标准工作溶液浓度/(g/lOOmLl 序号储备溶液体积/储备溶液体积/mL mL 果

5、糖葡萄糖i1f，糖麦芽糖mL 1 2.0 0.250 10 1. 00 0.80 0.050 0.050 2 3.0 0.500 10 1. 50 1. 20 O. 100 。1003 4.0 1. 0 10 2.00 1. 60 0.20 0.20 4 5.0 2.0 10 2.50 2.00 0.40 0.40 5 15. 0 7. 0 25 3.00 2.40 。.60 0.60 1 GB/T 18932.22-2003 5 仪器5. 1 高效液相色谱仪:配有示差折光检测器。5.2 分析天平2感量0.1mg和0.001g各一台。5.3 注射器10mL。5.4 有机相过滤膜:0.45m。5

6、.5 样品瓶:1. 5 mL。5.6 容量瓶:10 mL.25 mL.50 mL.100 mL。6 试样制备与保存6. 1 试样的制备对元结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60C的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于祥品瓶中，密封，并做上标记。6.2 试样的保存将试样于常温下保存。7 测定步骤7. 1 提取称取5g试样，精确至0.001go置于100时，烧杯中，加人30mL水，用玻璃棒搅拌使试样完全溶解，转移至100mL容量瓶中，然后再用10mL水洗烧杯三次并转移至上述100mL容量瓶中，用乙腊定容至

7、体积，混匀。用0.45m滤膜将样液过滤入样品瓶中供液相色谱测定。7.2 测定7. 2. 1 液相色谱条件a) 色谱柱z碳水化合物分析柱10m.300 mmX3. 9 mm(i. d) , b) 流动相E乙脯+水(77+23)，c) 流速:1. 0 mL/min, d) 柱温:25 C, e) 检测器池温度:35 C, 0 进样量:15L。7.2.2 液相色谱测定用配制的果糖、葡萄糖、煎糖、麦芽糖标准工作溶液(4.6)绘制以峰高为纵坐标，工作溶液浓度为横坐标的标准工作曲线，保证样品溶液中果糖、葡萄糖、煎糖、麦芽糖的响应值均应在标准工作曲线的线性范围内，样品溶液与标准工作溶液等体积进样进行测定。在

8、上述色谱条件下，果糖、葡萄糖、蕉糖、麦芽糖的分离度应大于1.5.其参考保留时间见表1: 表1糖类名称保留时间/min果糖7.804 葡萄糖8.973 R在糖12.521 麦芽糖15. 177 2 果糖、葡萄糖、庶糖、麦芽糖标准物质色谱图参见附录A中的图A.l。7.3 平行试验按以上步骤，对同试样进行平行试验测定。7.4 空白试验除不称取样品外，均按上述步骤进行。B 结果计算结果按式(1)计算z式中zx = c V m X一一试样中被测组分含量单位为克每百克(g/lOO日); GB/T 18932.22-2003 ( 1 ) c 从标准工作曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为克每百毫升(g/lO

9、OmL); V 样品溶液定容体职单位为毫升(mL); m 所称试祥的质量，单位为克(g)。注z计算结果应扣除空白值。9 精密度本部分的精密度数据是按照GB/T6379的规定确定的，其重复性和再现性的值是以95%的可信度来计算。9. 1 重复性在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(吟，蜂蜜中果糖、葡萄糖、，W，糖、麦芽糖含量范围及重复性方程见表2.襄2含量范围及重复性和再现性方程名称吉量范围/(g/100g) 重复性限r再现性限R果糖21. 31-39. 62 r= -0. 0095 m十0.5420 IgR0.452 9Igm-0.597 8 葡萄糖20.54-36.

10、 15 r -0. 009 4刑十0.4127 Ig RO. 090 5 Igm O. 423 6 m;糖0.22-5.95 -0.OJ15 m+0.157 9 RO. 001 1 m+O. 2149 麦芽糖0.98-6.99 r -0. 004 7 m十O.162 3 Ig RO. 147 4 Igm-O. 812 2 如果差值超过重复性限(r)，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。9.2 再现性在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(扣，蜂蜜中果糖、葡萄糖、煎糖、麦芽糖的含量范围及再现性方程见表2.问OON-NN.N何。F附录(资料性附录)标准物质色谱图A GB/T 18932.22-2003 H筒。果糖、葡萄糖、蔚糖、麦芽糖标准物质色谱图，见图A.l。mLFOmwio -vo-hR-h 为果精为葡萄糖为靡糖为圭芽糖7.804 min 8.973 min 12.521 min 15.177 min hh同tz】【N田，N同fm图A.1